突触素在鸡产蛋前后下丘脑内生殖核团的表达和发育

应用免疫组织化学方法研究了突触素 (SVP- 38)免疫反应产物在鸡产蛋前后下丘脑中生殖内分泌核团内的表达和发育情况。结果显示 ,前联合区、视前室旁核、室周弓状核、下丘脑室旁核、乳头体内侧核、乳头体外侧核等生殖核团内突触素免疫反应强度 ,在 3个年龄组间差异显著。 2 40 d组反应强度最高 ,70 d组次之 ,5 0 0 d组最低。结果表明 ,产蛋高峰期下丘脑内的突触可塑性增强 ,突触素产蛋高峰期表达强度最高 ,后随日龄增加而强度下降。说明突触素的表达与生殖内分泌激素的分泌有依赖性。

Nifedipine对烟草花粉萌发、花粉管生长及生殖核分裂的影响

用细胞学和统计学方法研究了Ｃａ２＋ 通道专一性阻滞剂ｎｉｆｅｄｉｐｉｎｅ（Ｎｉｆ）对烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍＬ．）离体花粉萌发、花粉管生长及生殖核分裂的影响。１０－ ４ ｍ ｏｌ／ＬＮｉｆ可抑制花粉萌发。Ｎｉｆ对花粉管生长的影响与其浓度和处理持续时间有关，１０－ ４ ｍ ｏｌ／Ｌ Ｎｉｆ始终抑制花粉管生长；而１０－ ７～１０－ ５ ｍ ｏｌ／ＬＮｉｆ在较短时间内起不同程度的促进作用，之后逐渐过渡为抑制花粉管生长。较高浓度处理可使花粉管形态趋向异常，细胞质流动趋于停滞。Ｎｉｆ抑制生殖核的有丝分裂，相对推迟分裂高峰。Ｎｉｆ使花粉管中的金霉素（ＣＴＣ）荧光趋于减弱，表明Ｎｉｆ通过抑制Ｃａ２＋ 通道活性产生生理效应。

外源钙调素和钙调素拮抗剂对烟草离体花粉管生长和生殖核分裂的调节

外源花椰菜钙调素（CaM）、牛脑CaMagarose以及CaM拮抗剂TFP对花粉管生长与生殖核分裂的作用均具有浓度和时间效应，CaM在花粉管生长早期，较低浓度能促进花粉管生长和生殖核分裂；但后期，较高浓度则有抑制作用。ITP在花粉管生长早0000000000000期，较高浓度抑制花粉管生长和生殖核分裂。

向日葵是观察生殖核(雄配子)的好材料

向日葵(Helianthus annuns)的小孢子是具三细胞(核)的小孢子体(花粉),2个生殖核(细胞)细而长,1个营养核呈椭圆形,三核同时存在的时间长,容易区分,是观察三核小孢子体的一种好材料。

生殖细胞核因子及其相关因子在恶性生殖细胞肿瘤中的表达

为研究生殖细胞核因子(GCNF)及Oct-4在恶性生殖细胞肿瘤中的表达,揭示GCNF及Oct-4在恶性生殖细胞肿瘤中关系。运用免疫组化SP法分别检测41例男女生殖系统恶性肿瘤及8例无瘤变卵巢组织及10例无瘤变睾丸组织中GCNF及Oct-4的表达。结果显示GCNF在所有的恶性生殖细胞肿瘤及无瘤变的睾丸组织均呈阳性表达,定位于肿瘤细胞的细胞核,Oct-4在未成熟畸胎瘤,无性细胞瘤及精原细胞瘤呈阳性表达,定位于肿瘤细胞的细胞核,在其他类别的恶性生殖细胞肿瘤及无瘤变卵巢组织及睾丸组织中不表达。由此可知,GCNF和Oct-4在恶性生殖细胞肿瘤中的表达呈负相关,二者的表达强度可能与肿瘤细胞的分化状态有关。

生殖细胞核因子在精原干细胞体外培养分化中的表达

目的将分离纯化的小鼠精原干细胞(SSCs)体外培养并诱导分化,检测生殖细胞核因子(GCNF)在小鼠SSCs诱导分化前后的表达。方法用干细胞因子(SCF)诱导小鼠SSCs向精母细胞分化,通过间接免疫荧光染色和RT-PCR,检测GCNF在小鼠SSCs诱导分化前后的表达。结果小鼠SSCs向精母细胞诱导分化前后,在倒置相差显微镜下进行形态学观察,细胞形态未发生明显变化,仍然呈圆形或椭圆形,核较大;间接免疫荧光及RT-PCR结果均显示,原代培养的小鼠SSCs呈现GCNF阴性,但是向精母细胞诱导分化2d后,GCNF开始表达。结论 GCNF在体外培养小鼠SSCs向精母细胞分化的早期有表达,提示GCNF可能参与了SSCs的早期分化。

Oct-4及生殖细胞核因子在精原干细胞体外分化前后的表达

目的：检测Oct-4和生殖细胞核因子（GCNF）在小鼠精原干细胞（SSCs）诱导分化前后的表达。方法：体外分离培养小鼠SSCs，用干细胞因子（SCF）诱导其向精母细胞方向分化，通过间接免疫荧光显色和RT-PCR，检测Oct-4和GCNF在小鼠SSCs诱导分化前后的表达。结果：Oct-4在小鼠SaCs诱导前有表达，诱导2d后表达下降；而GCNF在小鼠SaCs诱导前呈阴性表达，向精母细胞诱导2d后呈阳性表达。结论：GCNF可能通过抑制Oct-4的表达促使SSCs分化。

生殖细胞核因子及Oct-4在P19细胞系诱导分化中的表达

目的体外培养未成熟畸胎瘤细胞(P 19细胞)并诱导分化,检测生殖细胞核因子(GCNF)及Oct-4在P 19细胞诱导分化前后的表达。方法用全反式维甲酸(ATRA)诱导P 19细胞分化,通过间接免疫荧光染色和RT-PCR方法检测GCNF及Oct-4在P 19细胞诱导分化前后的表达。结果 Oct-4在P 19细胞诱导前呈强阳性表达,诱导2 d后表达下降;而GCNF在P 19细胞诱导前呈阴性表达,诱导2 d后呈阳性表达。结论 GCNF参与了恶性生殖细胞肿瘤的体外分化。GCNF可能是通过下调Oct-4基因的表达参与了恶性生殖细胞肿瘤的分化。

生殖细胞核因子在雌鼠卵巢的表达特点

目的研究生殖细胞核因子(GCNF)在不同年龄、不同生理周期的雌鼠卵巢中的表达特点。方法用免疫组化技术,检测胚胎卵巢、生后5d、10d、3w、6w、8w3、月雌鼠及在不同动情周期雌鼠卵巢中GCNF的表达变化,并通过图像分析系统进行统计学分析,比较不同组卵巢中GCNF表达的差异有无显著性。结果1.不同年龄组:GCNF在新生5d卵巢的生长卵泡中即出现明显表达,随着年龄的增长,表达逐渐增强,在5w时达到最强,然后表达持续在高水平,直到3月。2.不同动情周期:随着动情前期、动情期、动情后期及动情间期的变化,GCNF表达逐渐增强。结论在不同年龄、不同生理周期的卵母细胞中,GCNF表达的差异有显著性,提示其与卵母细胞的生长、雌鼠的生殖力有着密切的关系,同时提示其表达与不同激素之间有一定的相互影响。

生殖细胞核因子的研究进展

生殖细胞核因子(GCNF)是核受体超家族成员之一,由于其配体未知,因而又称孤儿核受体。GCNF主要功能是抑制基因表达,它可以促进Oct-4基因的甲基化,使0ct-4发生基因沉默。GCNF基因高度表达在发育中的神经系统、胎盘、发育中的生殖细胞。GCNF基因表达具有的时空特性,提示GCNF在胚胎发生以及配子形成过程中发挥着重要作用。

生殖细胞核因子在骨髓间充质干细胞增殖分化中的表达

目的：研究生殖细胞核因子在骨髓间充质干细胞增殖与分化中的表达。方法：取4-6周BALB/c小鼠，采用全骨髓贴壁筛选法体外培养小鼠BMSCs。取第3代小鼠BMSCs，定向诱导BMSCs向成骨细胞分化，通过检测碱性磷酸酶鉴定诱导后的细胞。采用RT-PCR及间接免疫荧光染色，从mRNA和蛋白水平检测GCNF在小鼠BMSCs诱导分化前后的表达。结果：RT-PCR与间接免疫荧光染色结果同时显示，第3代的小鼠BMSCs和向成骨方向诱导10d后的BMSCs均有GCNF表达。结论：GCNF在BMSCs增殖分化中有表达。

雄核发育新途径及细胞学研究

发育早期的单核花粉,第一次有丝分裂形成2生殖核花粉,以后继续分裂形成3生殖核花粉、4生殖核花粉乃至多生殖核花粉。此时,其中的细胞仍聚集在花粉壁范围以内,成为多细胞团。当生殖核继续分裂长到一定长大后,撑破花粉壁,成为一团游离的组织,皆由生殖核细胞组成。当此,认为是早期的幼小愈伤组织。这是雄核发育的第4条途径,称D途径。生殖核发育过程中,出现二游离生殖核发生融合的行为,这是染色体自然加倍的一种途径。同时,发现发育时期和形态大小相同的8个生殖核细胞由一个胼胝质的壁包被,形成花粉小块。

用荧光染色与冬青油透明技术显示花粉细胞核

花粉经 Hoechst 33258(H33258)染色、乙醇脱水、冬青油(水杨酸甲酯)透明后,荧光镜检可透视到其中的生殖核(或精核)及营养核。冬青油能保存 H33258荧光、减弱花粉壁自发荧光、增加花粉内含物透明度,因而观察效果比不透明时显著改进。用此法观察人工萌发的花粉管,可显示细胞核由花粉粒向花粉管转移的过程及其在花粉管中的动态变化。

桉叶油毒性及其对环磷酰胺致小鼠骨髓微核及精子畸形的保护作用

目的探讨桉叶油对环磷酰胺(CP)致小鼠遗传毒性的保护作用。方法①毒性实验:小鼠ig给予桉叶油1700,1750,1800,1850和1900mg·kg-1,检测桉叶油的半数致死量(LD50)。另小鼠分别ig给予桉叶油100,200和400mg·kg-1及花生油(阴性对照)组,每天1次,连续5d。阳性对照组ip给予CP40mg·kg-1,每天1次,共给2d。检测小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率。30只雄性小鼠,分别ig给予按叶油100,200和400mg·kg-1和花生油,阳性对照组ip给予CP40mg·kg-1,每天1次,连续5d。观察小鼠精子畸形率。②保护作用实验:小鼠按照如下分组给药:CP+桉叶油400,200和100mg·kg-1,花生油+CP,CP组。第4天与阳性对照组一起ip给予CP40mg·kg-1,每天1次。第5天给药后测定小鼠骨髓微核率。30只雄性小鼠按分组,第6天起与阳性对照组一起每天ip给予CP40mg·kg-1,连续5d,实验共10d。测定小鼠精子畸形率。结果①毒性实验:桉叶油的LD50为1824.01mg·kg-1,95%可信限为(1799.48～1851.19)mg·kg-1。桉叶油对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率和精子畸形率无影响。②保护作用实验:桉叶油100,200和400mg·kg-1组的微核率和精子畸形率明显低于未ig给予桉叶油的CP诱发的微核率和精子畸形率(P<0.05)。结论桉叶油对小鼠无明显的遗传毒性,可降低CP所致小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率和精子畸形率。

花粉生殖细胞的融合试验

花粉生殖细胞(以下简称生殖细胞)是精子的前身,具有单倍体遗传组成。核大质小,缺乏典型细胞壁等特点是生殖系统中天然的单倍体核质体类型。值得在植物细胞工程中加以开发利用。为此,我们曾开展了生殖细胞的大量分离与离体培养研究。在此基础上进一步进行了生殖细胞的融合试验,结果表明,用 PEG 法可以诱导同种或异种生殖细胞之间以及生殖细胞与体细胞愿生质体之间的融合。

捞刀河浏阳段河蚬的遗传多样性及生殖特征研究

研究以线粒体细胞色素氧化酶Ⅰ(COⅠ)部分序列(614 bp)为分子标记,对捞刀河浏阳段河蚬Corbicula fluminea(n=40)的种群遗传多样性进行评价,并分别从性腺组织学和精子形态学两方面分析其生殖特征,以期丰富河蚬的繁殖生物学信息,为开展其人工繁殖及资源保护提供参考。结果显示,40条河蚬COⅠ基因序列共检出4种单倍型,17个变异位点,平均单倍型多样性、平均核苷酸多样性和平均核苷酸差异数分别为0.664±0.042、0.014±0.006和8.595。捞刀河浏阳段河蚬存在雌雄同体和雌雄异体2种性别系统,雌雄同体、雄性和雌性的性比约为6﹕3﹕1。雌雄同体个体生殖滤泡存在滤泡混合型和滤泡并存型2种类型。23个雌雄同体和8个雄性个体的精子均为双鞭毛。结果表明,捞刀河浏阳段河蚬种群的遗传多样性相对较低,生殖方式多样且以雄核生殖为主。

菏泽地区X线工作者生殖系统功能调查

为改进放射卫生工作和防护措施提供依据,菏泽地区403例X线工作者细胞染色体畸变、微核细胞和生殖系统功能状况进行调查.染色体总畸变率为0.61%,微核细胞率为4.59‰,明显高于对照组(P<0.05).X线工作者自然流产率、早产率、子女先天性疾病发生率分别为1.49%、0.25%、1.49%,高于对照组.结果表明菏泽地区X线工作者仍然面临较严重的放射危害.

膜荚黄芪花粉发育的细胞形态学观察

利用不同的染色剂观察花粉的发育动态,观察结果如下:四分体多为四面体型,少数为左右对称。成熟花粉为2细胞型,近三角形,在花粉管萌发时破裂,形成三个萌发孔。营养核在花粉内就有花粉管生长,在花粉管生长的过程中,营养核向生殖核靠近,发生融合,之后向萌发孔移动。

生殖细胞核因子在不同成长期大鼠附睾中的表达

目的 探讨生殖细胞核因子 (GCNF)在大鼠附睾中的时空表达与分布。方法 应用免疫组化和蛋白质免疫印迹技术 ,检测GCNF蛋白在出生后 7、14、2 8、4 5、6 0、90天龄和 18月龄大鼠附睾内的表达、定位和发育变化 ,并通过凝胶成像及图像分析系统对实验结果进行统计学分析。结果 GCNF表达于出生后 14天龄至 18月龄大鼠附睾上皮的细胞核内 ,其表达呈明为的年龄相关性和附睾区段以及细胞特异性。 14天龄附睾上皮内出现散在阳性细胞核 ,2 8天龄时阳性细胞数和阳性强度明显增强 ,4 5天龄时达到高峰。成年后阳性细胞数维持不变而阳性染色强度开始逐渐减弱 ,18月龄时减弱非常明显。附睾管上皮内的各种细胞如主细胞、基细胞、顶细胞、狭窄细胞和亮细胞等均呈GCNF阳性染色 ,从附睾起始段到尾段到尾段均有阳性染色 ,其中以近端头部最强 ;远端尾部主细胞核阳性减弱非常明显甚至呈阴性 ,而亮细胞核则阳性较强。 14d后各年龄组附睾抽提物中均可见 5 50 0 0处有GCNF特异性条带 ,其年龄变化与免疫组化结果一致。结论 GCNF在大鼠附睾上皮内的表达与附睾上皮分化和发育过程明显相关 ,且其分布表现出明显的附睾区段和细胞特异性。

生殖细胞核因子GCNF在宫颈癌中的表达

目的:探讨生殖细胞核因子(GCNF)在宫颈癌中的表达及其在宫颈癌发生发展的作用。方法:运用免疫组织化学Envision法和RT-PCR技术检测GCNF蛋白和mRNA在正常宫颈组织、上皮内瘤变组织及宫颈鳞癌组织中的表达。结果:GCNF蛋白在正常宫颈组织、上皮内瘤变组织(CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ)和宫颈鳞癌组织中的表达率分别为90.0%(18/20)、78.3%(18/23)、45.0%(9/20)、33.3%(9/27)和3.4%(4/29),差异有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR结果显示GC-NF mRNA的表达与GCNF蛋白相一致,即宫颈鳞癌组织与正常宫颈组织相比GCNF mRNA的表达显著降低(P<0.05)。结论:初步认为GCNF蛋白和mRNA表达的下调或缺失可能是宫颈癌发生的一个早期信号,以期为宫颈癌的靶向治疗提供研究方向。