TNF-α对雌性大鼠生殖轴调控作用的研究

目的 通过动物实验探讨肿瘤坏死因子 (TNF α)在生殖轴调控中的作用及作用部位。方法 情前期成年雌性S D大鼠 4 4只 ,取下丘脑、腺垂体及卵巢分别进行原代细胞培养 ,贴壁后 ,于腺垂体及卵巢培养液中分别加入TNF α (10 0ng/ml) ,孵育 2 4h后 ,进行顺序灌流共 5次 ,将培养液冷冻干燥后按放免试剂盒说明测FSH、LH、E2 及P ,并收集各组培养卵巢颗粒细胞 ,用流式细胞仪检测颗粒细胞凋亡率 ,观察TNF α对生殖轴调控作用及卵巢颗粒细胞增殖的作用的影响。结果 (1)TNF α (10 0ng/ml)明显抑制原代培养的雌性动情前期大鼠卵巢组织E2 及P的分泌量。 (2 )TNF α (10 0ng/ml)明显抑制原代培养的雌性动情前期大鼠腺垂体细胞LH、FSH的分泌量。 (3)FCM检测结果 :实验组卵巢颗粒细胞凋亡率为 (37 84± 3 84 ) %与对照组 (2 6 3±0 37) %相比有显著性差异 (P <0 0 1) ,说明TNF α能够抑制颗粒细胞增殖 ,并促进其凋亡。结论 TNF α在腺垂体及卵巢水平上同时发挥作用 ,抑制FSH、LH、E2 、P的合成 ,同时抑制颗粒细胞的增殖 ,促进其凋亡。

水温对文昌鱼生殖活动的影响及其内分泌机制

采用慢性实验方法,研究在不同水温条件下饲养性腺发生前的文昌鱼(Branchiostomabelcheri)对其性腺分化和发育的影响。另外,在繁殖季节研究在低温16℃、中温22℃和高温28℃下饲养性成熟的文昌鱼对其产卵和排精的影响。同时,采用免疫组织化学方法对几种生殖相关激素在不同发育期文昌鱼的生殖调控轴(脑-哈氏窝-性腺)中的分布进行免疫识别,并用磁酶免定量测定方法检测睾酮和17β-雌二醇在文昌鱼性腺中的含量,以分析和探讨水温影响文昌鱼生殖活动的内分泌机制。结果表明:低温有利于文昌鱼性腺向雌性分化,雌雄比例为4.2∶1,中温和高温组则不受影响,雌雄数量大致相等。高水温则有利于文昌鱼的精巢发育和生精活动。28℃海水适于文昌鱼的产卵和排精。根据免疫组织化学和磁酶免定量测定的结果分析提示,温度影响文昌鱼性别分化和发育以及繁殖活动的内分泌机制是:首先水温经皮肤或哈氏窝化学感受器,刺激神经系统(脑泡)释放GnRH。然后GnRH促进哈氏窝分泌LH,从而可能刺激性腺产生和分泌性类固醇激素,始动文昌鱼性腺的发育至成熟及其生殖活动。此外,脑中芳香化酶可能介导文昌鱼性别分化。

P物质对培养的大鼠垂体前叶细胞IP_3含量影响的研究

目的 探讨SP对大鼠AP培养细胞中IP3 的水平是否有影响 ,进一步阐述SP产生生物学效应的机制。方法 原代培养成年雌性S -D大鼠AP细胞 48h ,[3 H]-肌醇标记 36h ,加入不同浓度的SP孵育 30min ,超声震碎细胞 ,用AG1-X8阴离子交换层析树脂提取分离 [3 H]-IP ,应用液闪测定样本计数率 (cpm)。 结果 孵育时间为 30min时 ,SP以浓度依赖的方式使AP细胞内IP3 的水平增加。结论 兴奋AP细胞SPR后的生物学效应至少有一部分是通过第二信使IP3 来完成的 ,在信息转导途径上为SP对生殖轴调控的理论进行进一步证明和补充。