江西省猪生殖和呼吸系统综合征的初步诊断

20 0 1年入夏以后 ,江西省一些猪群暴发流行一种以发热、厌食、皮肤发红、繁殖障碍、呼吸加快为特征的疾病 ,并易继发多种传染病而造成巨大损失。根据流行特点、临床症状、剖检变化、实验室检验和防制情况 ,初步诊断为猪生殖和呼吸系统综合征 (PRRS)。其中仔猪所表现的弥漫性间质性肺炎病变在PRRS的诊断上有重要意义。

猪生殖和呼吸系统综合征的血清学调查

采用IDEXX公司生产的ELISA试剂盒对 2 0 0 1年 8月至 2 0 0 2年 8月湖北、河南、福建、浙江等省的大中型猪场猪生殖和呼吸系统综合征 (PRRS)的流行情况进行了血清学调查。共检测84 4份血清 ,检出阳性 382份 ,阳性率为 4 5 .2 6 %。其中湖北省猪场的 6 6 1份血清 ,检出阳性 2 4 9份 ,阳性率 37.6 7%。 4 83份种猪血清 ,检出阳性 2 4 4份 ,阳性率 5 0 .5 2 % ,36 1份仔猪血清 ,检出阳性 14 1份 ,阳性率 4 0 .0 6 %。在被检的 5 0个猪场中 ,检出PRRS血清学阳性猪的猪场 4 1个 ,占 82 .0 0 % ,其中湖北省的 38个猪场 ,检出PRRS阳性的 2 9个 ,阳性率 76 .32 %。

浙江省规模化养猪场猪生殖和呼吸系统综合征的血清学调查

应用ELISA方法 ,对浙江省杭州、嘉兴、宁波、绍兴、金华、衢州、丽水和舟山 8个地区的 1689份血清进行了PRRSV抗体检测。结果表明 ,血清PRRSV抗体平均阳性率为 3 1.91% ,其中 1999、2 0 0 0和 2 0 0 1年抗体阳性率分别为 11.64 %、18.47%和 46.86% ,逐年提高 ;以地区统计 ,2 0 0 1年嘉兴地区猪血清PRRSV抗体阳性率最高 ,达 73 .61% ,而宁波最低 ,为 2 2 .86% ;以生猪类型统计 ,母猪、公猪、育肥猪和断奶仔猪 2 0 0 1年血清PRRSV抗体阳性率分别为 49.69%、42 .86%、5 1.5 6%和 2 8.83 %。

种猪场猪生殖和呼吸系统综合征血清抗体检测

应用ELISA试剂诊断盒对青海省几个主要种猪场的 10 3份血清进行了PRRS的血清抗体检测 ,共检出阳性血清 6份 ,阳性率为 5 83 % ,表明青海省几个主要种猪场存在PRRS。

猪生殖和呼吸系统综合征诊断技术研究进展

从病毒的分离培养、病原检查、血清学诊断,分子生物学诊断等方面对猪生殖和呼吸系统综合征病毒的诊断 技术研究进展进行了综述。

猪生殖和呼吸系统综合征病毒的分子生物学研究进展

本文对猪生殖和呼吸系统综合征病毒的分子生物学研究进展从病毒的形态、病毒基因组结构、基因的表达、病毒蛋白、病毒的变异等方面进行了简要综述。

猪生殖-呼吸道综合征病毒(PRRSV)CH-la株N基因的分子克隆、序列测定及其比较分析

根据已发表的ＰＲＲＳＶＩＡＦ－ｅｘｐ９１株的核酸序列，设计了一对特异性引物，用ＲＴ－ＰＣＲ扩增了ＰＲＲＳＶＣＨ－ｌａ株的Ｎ基因，经补平和磷酸化后，克隆到ｐＵＣ１８ＳｍａＩ位点上。经电泳分析、酶切和ＰＣＲ鉴定证实后，进行序列测定。序列分析表明ＣＨ－ｌａ株与ＩＡＦ－ｅｘｐ９１株（美洲型）Ｎ基因核苷酸同一性为９３．２％，氨基酸同一性高达９６．７％，而与ＬＶ株（欧洲株）核苷酸同一性为６３％，氨基酸同一性仅为５９％。其推导氨基酸残基分子量为１３．３ｋＤａ。根据ＣＨ－ｌａ株Ｎ基因推导的氨基酸残基缺少欧洲型毒株ＬＶ特有的两个氨基酸片段，表明ＣＨ－１ａ株与ＩＡＦ－ｅｘｐ９１株同源性高于它与ＬＶ株的同源性，而且ＣＨ－１ａ株与鼠乳糖脱氢酶增高症病毒（ＬＤＶ）在进化关系上比ＬＶ株与ＬＤＶ更密切。ＣＨ－１ａ株Ｎ基因推导的氨基酸残基Ｎ－端１／２段约２６％是由Ａｒｇ、Ｌｙｓ和Ｈｉｓ这３种氨基酸组成的，其疏水性侧像图与ＬＶ株和ＶＲ－２３３２株（美洲型）几乎相同，这表明两种基因型的核衣壳蛋白（Ｎ蛋白）具有一定的保守性。由于Ｎ蛋白是ＰＲＲＳＶ所有结构蛋白中免疫原性比较强的病毒蛋白，是现行血清学试验的抗原基础，因此Ｎ基因的分子克隆为研制ＰＲＲ?

猪生殖-呼吸道综合征病毒(PRRSV)分离鉴定及其与欧、美PRRSV抗原的比较

在我国吉林省某地猪生殖－呼吸道综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）抗体阳性猪群的４头２日龄弱仔猪实质脏器中分离到２株ＰＲＲＳＶ。间接荧光抗体试验（ＩＦＡ）结果表明，ＰＲＲＳＶ（ＬＶ．ＶＲ－２３３２）抗血清与２个分离株呈阳性反应；分离到病毒的弱仔猪血清与参考株（ＬＶ．ＶＲ－２３３２）也呈阳性反应；而分离株与ＨＣＶ、ＰｒＶ、ＰＰＶ、ＴＧＥＶ、ＰＥＤＶ和ＨＥＶ无交叉抗原。以上试验证明，我们已成功地分离到２株地方性ＰＲＲＳＶ。进一步用六种ＰＲＲＳＶ单抗（Ａ～Ｆ）进行ＩＦＡ试验，结果２个分离株与ＶＲ－２３３２的荧光反应谱相同。说明它们之间在抗原结构上具有同源性。

中国华东地区猪生殖-呼吸道综合征病毒(S_1株)ORF_(5～7)基因特征研究

本研究对我国华东地区猪生殖和呼吸综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）分离株Ｓ１主要结构蛋白基因（ＯＲＦ５～７）进行了ＰＣＲ扩增和ＤＮＡ测序分析。结果表明，长度为１５２０ｂｐＤＮＡ序列含有３个阅读框ＯＲＦｓ，即ＯＲＦ５、ＯＲＦ６和ＯＲＦ７，ＯＲＦ５和ＯＲＦ６及ＯＲＦ６和ＯＲＦ７间有部分碱基重叠，且与欧洲型和美洲型ＰＲＲＳＶ相似。ＯＲＦｓ推导的氨基酸序列与美国ＶＲ２３３２和欧洲ＬＶ毒株同源性分析为９９％～１００％和５９％～７８％。ＯＲＦｓ预测的蛋白质分子量、等电点、糖基化位点、亲水性分布图及跨膜螺旋区与ＶＲ２３３２毒株相似。

规模化养猪场猪瘟、猪生殖-呼吸综合征、猪伪狂犬病监测及原因分析

采用夹心ＥＬＩＳＡ对我省１２猪场６０份猪组织样品进行猪瘟抗原检测，其中阳性样５０份，占８３．３％，分布于１０猪场。用ＰＲＲＳＶ抗体ＥＬＩＳＡ对１８猪场５１８份猪血清样品进行抗体检测，其中阳性样品２１３份，占４１．１％，分布于１３个猪场。用ＰＲＶ－ｇｐＩ－抗体ＥＬＩＳＡ对２６个猪场５１４份猪血清样品进行抗体检测，其中阳性样品２６８份，占５２．１％。

黄芪-山楂对多囊卵巢综合征大鼠卵巢生殖功能的影响及炎性作用机制

目的:探讨黄芪-山楂预防给药对于多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)大鼠卵巢生殖功能的的影响及炎性作用机制。方法:将50只21日龄雌性大鼠随机按10只一组分为5组,分别为正常组、模型组、黄芪组、山楂组、黄芪-山楂组。除正常组外,其余各组均喂食高脂饲料来造模。各给药组在造模期间分别以黄芪、山楂、黄芪-山楂水溶液灌胃,持续干预15周。第8周开始镜下观察各组大鼠动情周期并计算紊乱占比;HE染色法观察卵巢的组织变化;采用ELISA测定大鼠血清中性激素、促炎因子和抗炎因子的水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠出现动情周期紊乱占比升高(P<0.01);卵巢组织多囊改变,可见较少数量的黄体和具有许多滤泡卵巢囊肿的窦卵泡;促黄体生成素/卵泡刺激素(LH/FSH)、睾酮(T)、白介素6(IL-6)、白介素17A(IL-17A)、肿瘤坏死因子(TNF-α)水平显著升高;白介素10(IL-10)水平显著降低(P<0.05)。与模型组比较,黄芪-山楂组大鼠出现动情周期紊乱占比降低(P<0.01);卵巢组织中的囊性卵泡数减少,成熟卵泡和黄体数增多;黄芪组、山楂组、黄芪-山楂组LH/FSH、T、IL-6,IL-17A水平显著降低;黄芪组、黄芪-山楂组TNF-α水平显著降低;山楂组、黄芪-山楂组IL-10水平显著升高(P<0.05)。与黄芪组比较,黄芪-山楂组T水平显著降低;IL-10水平显著上升(P<0.05)。与山楂组比较,黄芪-山楂组T、IL-17A水平显著降低(P<0.05)。结论:黄芪-山楂预防给药可以改善PCOS大鼠的卵巢生殖功能,其作用机制可能与降低促炎因子IL-6、IL-17A、TNF-α水平,提高抗炎因子IL-10水平,减轻炎症状态有关。

猪生殖-呼吸道综合征病毒的分子生物学研究现状

:猪生殖 -呼吸道综合征病毒 (PRRSV)是近几年发现的一种新病毒 ,就该病毒的生物学特性、基因组结构、病毒蛋白。

猪生殖与呼吸综合征病毒JK-100弱毒株生物学和血清学特性研究

通过ＩＦＡ、ＶＮＴ和Ｗｅｓｔｅｒｎ－Ｂｌｏｔ等血清学试验及电镜观察，证明ＪＫ－１００株为ＰＲＲＳＶ。本病毒感染ＭＡＲＣ１４５细胞后，３６小时的ＴＣＩＤ_(50)最高，为１０^(-7.83)。把本病毒分别保存在４℃、３７℃各９天，保存在４℃９天后，ＴＣＩＤ_(50)从１０^(-7.83)下降至１０^(-7.32)，３７℃７天已测不到效价。

二甲双胍联合达英-35治疗多囊卵巢综合征及对辅助生殖技术结局的影响

目的:探讨二甲双胍联合达英-35治疗对多囊卵巢综合征患者的临床体征、激素水平内分泌、代谢以及辅助生殖技术结局的影响,为多囊卵巢综合征的临床治疗提供参考。方法:选择100例多囊卵巢综合征患者作为研究对象,随机分为观察组和对照组两组,各50例,其中对照组患者给予达英-35治疗,观察组患者在对照组治疗的基础上外加二甲双胍联合治疗,治疗3个月以后,比较两组患者治疗前后的临床表现、临床体征、激素水平、血脂代谢以及胰岛素分泌情况的变化。同时给予上述患者体外受精-胚胎移植(IVF-ET)方法,分析药物治疗对辅助生殖技术结局的影响。结果:两组患者治疗前各临床体征、临床表现、性激素以及血脂内分泌指标差异无统计学意义(P> 0. 05);与治疗前相比,两组患者的临床表现和临床体征显著改善,而观察组改善更为显著(P <0. 05);治疗后两组患者的WHR、BMI、T、LH、FSH、TG、TC以及LDL-C值均明显降低,SHBG、HDL-C值明显升高,而观察组性激素以及血脂指标改善更为显著(P <0. 05);治疗后两组患者的FIN、FBS、Homaβ以及Homa IR值明显降低,而观察组患者降低更为显著(P <0. 05);治疗后观察组患者的优质胚胎数明显多于对照组,受精率、卵裂率以及妊娠率高于对照组(P <0. 05)。结论:二甲双胍和达英-35的联合应用可以更为显著的改善多囊卵巢综合征患者的临床表现、临床体征、性激素以及血脂、内分泌指标,更有助于改善多囊卵巢综合征患者辅助生殖技术结局。

猪生殖—呼吸道综合征病毒(PRRSV)E蛋白基因真核表达质粒的构建

新近发现的ＰＲＲＳＶ是单股ＲＮＡ病毒，属于不久前成立的动脉炎病毒科。其基因组包括８个开放阅读框架（ＯＲＦ），其中ＯＲＦ５编码糖基化的囊膜（Ｅ）蛋白，是病毒的主要免疫保护性抗原之一。为了研制ＰＲＲＳ基因疫苗，扩增并克隆了ＰＲＲＳＶ－１ａ株ＯＲＦ５，并将其亚克隆至真核表达载体ｐＣＲ３－Ｕｎｉ的ＣＭＶ启动子下游，构建成真核表达质粒。

针刺结合腹诊推拿对更年期综合征大鼠模型生殖-内分泌影响的研究

目的:探讨针推结合疗法对更年期大鼠模型血清雌二醇(E2)、黄体生成激素(LH)及促卵泡刺激素(FSH)的影响及机制。方法:将SPF级13-14周龄的SD雌性大鼠50只,随机分为5组,采用放射免疫方法,观察针推疗法对去卵巢大鼠外周血清雌二醇(E2)、黄体生成激素(LH)及促卵泡刺激素(FSH)的影响。结果:模型组大鼠外周血E2、FSH与正常组比较,差异具有显著性(P<0.05)。经针推结合疗法干预7d后,E2可明显回升,HSP可显著下降,与模型组比较均有统计学意义(P<0.01)。结论:针推结合疗法可以减缓去卵巢大鼠生殖内分泌紊乱,可能与该疗法直接或间接促进E2的合成有关。

应用酶联免疫吸附试验检测猪生殖与呼吸综合征血清抗体的研究

建立的检测猪生殖与呼吸综合征 (PRRS)酶联免疫吸附试验 (ELISA) ,其抗原包被浓度为 2 .4μg/mL ,血清稀释度为 1∶10 0 ,酶标二抗的工作浓度为 1∶5 0 0。应用该方法对陕西省 9个地区采集的有疑似PRRS征候的 2 5 0份猪血清进行检测 ,检出阳性血清 3 2份 ,阳性率为 12 .8% ,从而证实陕西省存在PRRS ,也为该病的大面积血清学普查提供了一种简易、快速、准确的检测方法。