新型天然胶乳生物保存剂在标准胶制备中的应用研究

研究新型天然胶乳生物保存剂(简称生物保存剂)在标准胶制备中的应用,并与传统保存剂氨进行对比。结果表明:随着生物保存剂和氨质量分数的增大,天然胶乳的保存时间延长,当生物保存剂的质量分数大于0.010(按干胶计)时,天然胶乳的保存时间超过10 h;与采用氨保存的天然胶乳制备的标准胶相比,采用生物保存剂保存的天然胶乳制备的标准胶凝固用酸(甲酸)量大幅度减小,回收率较高,灰分含量、杂质含量、挥发分含量和塑性初值较大,塑性保持率和门尼粘度较低,胶料物理性能无明显差异,生产成本较低,生产环境改善。

酵母综合利用产品——提取高效天然生物保存剂海藻糖

海藻糖是理想的天然保存剂,用于高档食品、医用等生物活性物质保存剂和稳定剂。然而过去只能从天然物中提取,提取量有限且成本高,限制了它的应用。用糖蜜发酵生产酵母,从酵母中提取,将能大量生产井降低生产成本,也为糖业增加经济效益。本文介绍海藻糖的功能、用途、国内外情况及生产方法。

砀山梨生物保存法的探索

1前言 平时我们在吃水果时,可能没有留意到:砀山梨的价格卖得比黄瓜、青菜等蔬菜还要便宜.2002年1月21日<文汇报>上登载着这样一则消息:我国的砀山梨以个大、汁多、味甜、肉脆而闻名于世.2001年砀山县砀山梨产量达到8亿公斤,比往年增产1亿公斤.但高产并没有带来俏价,收获季节的九、十两个月,梨价跌到每公斤0.6元左右,相当于成本价.这无疑将严重挫伤果农的种植和开发新品种的积极性.

北京市首家动物源性致病原微生物保存使用场所通过动物防疫条件现场审核

近日，北京市兽医卫生监督检验所组织“兽医生物安全专家组”首次对申办单位(中国农业科学院生物制品工程技术中心)进行动物防疫条件现场评审，并一致通过。

用真空冷冻干燥法保存微生物菌株

本文主要介绍用Flexi Dry冷冻干燥仪保存微生物菌株的应用。研究了微生物菌株在真空冷冻干燥保藏中 ,不同浓度的保护剂和不同冻干温度对存活性的影响。

菌种的甘油冷冻保存法

以体积分数为 0 8的甘油生理盐水为保存液 ,在 2 0℃保存军团菌、葡萄球菌等 35个菌株。观察 9年 。

海藻糖及其在微生物领域中的应用

海藻糖是生物体低湿休眠及微生物、生物大分子耐热抗干燥的稳定物质，８０年代以来受到国内外广泛关注并做了大量细致研究，本文详细介绍了这种独特双糖的理化及分子生物学特性、功能和作用机理以及它的制备和应用前景。

薄壁颈管气相液氮罐设计漏热计算及验证

为适应生物样本低温储存的发展需求,试制了有效容积375 L、320 mm大口径偏口气相液氮罐。为降低漏热,达到蒸发率指标的设计要求,采用薄壁颈管结构的优化设计。根据设计结构,给出了固体导热、辐射传热及残余气体自由分子导热的漏热估算方法及结果,漏热设计计算符合国家标准规定的蒸发率指标。对一批试制品的初样产品的测试验证表明,其静态液氮蒸发率在(1.15~1.32)%/d,符合设计要求,产品主要性能指标满足要求。

人角膜基质透镜长期超低温保存的可行性评估

目的观察超低温环境下长期保存后人角膜基质透镜的透明度及结构变化,探讨简单可行且有效的角膜基质透镜长期保存方案。方法收集2013-2020年于中山大学中山眼科中心海南眼科医院行飞秒激光小切口角膜透镜取出术(SMILE)200眼,手术中获取完整人角膜基质透镜标本200份。将人角膜基质透镜标本置于-80℃超低温冰箱中保存,按照保存时间的不同将标本分为1个月组、24个月组、60个月组和84个月组,每组50份。采用超微量分光光度计测量各组在300~800 nm波长范围内角膜基质透镜的透光率,每个透镜共连续检测10次,每次间隔50 nm;分别采用苏木精-伊红染色和Masson染色观察各组角膜基质透镜的组织学形态变化和胶原纤维结构改变;采用透射电子显微镜观察各组角膜基质透镜中胶原纤维排列方式及角膜基质细胞的超微结构变化;采用TUNEL染色法检测各组人角膜基质透镜中角膜基质细胞凋亡情况。结果各组450~800 nm波长范围内角膜基质透镜透光率比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。Masson染色结果显示,1个月组角膜基质透镜胶原纤维排列整齐、紧密,24个月组部分胶原纤维间出现空泡,60个月组胶原纤维排列疏松,空泡增多,84个月组部分胶原纤维脱落,角膜基质透镜变薄;苏木精-伊红染色显示角膜基质透镜形态改变与胶原纤维变化相对应。透射电子显微镜下可见1个月组角膜基质透镜胶原纤维排列规则,角膜基质细胞呈长梭形,核膜完整,胞质丰富;24个月组胶原纤维排列稍疏松,角膜基质细胞变形,核膜不完整;60个月组胶原纤维排列疏松、不整齐,细胞核萎缩变形;84个月组胶原纤维排列紊乱,角膜基质细胞皱缩,核膜不连续,核质裂解。TUNEL染色结果显示,1个月组、24个月组、60个月组和84个月组透镜中基质细胞凋亡率分别为(87.80±1.17)%、(89.50±1.05)%、(89.30±1.51)%和(90.20±1.47)%,总体比较差异无统计学意义(F=4.525,P=0.053)。结论人角膜基质透镜超低温环境下保存84个月可见胶原纤维排列紊乱及角膜基质细胞凋亡,但其透明度和完整性仍较好。超低温保存技术长期保存角膜基质透镜有效且简单可行。

基础生物学实验开放式教学改革的探索

为了加强学生实验动手能力和创新能力的培养，针对基础生物学实验教学进行了开放式教学改革，并在此基础上创新其实现形式。实践证明，开放式实验教学有利于创新人才的培养，而实验教学改革是创新能力培养的不竭动力。

新鲜羊膜及几种保存羊膜移植治疗角膜碱烧伤

目的:近年来羊膜移植成为治疗角膜碱烧伤较为有效的手段之一,但其生物学基础尚不完全清楚。观察不同活性羊膜移植对兔眼角膜碱烧伤的治疗效果,并分析其生物活性成分作用。方法:实验于2004-01/07于重庆医科大学动物实验中心实验室完成,动物实验方法符合动物伦理学要求。①实验材料及分组:健康产妇剖宫产胎盘由重庆医科大学附属第一医院产科提供。选用新西兰大白兔45只,按随机数字表法分为5组(n=9):新鲜羊膜组、甘油保存羊膜组、乙醇保存羊膜组、真空干燥羊膜组及对照组。②实验方法:于新鲜羊膜制备后24h内,保存羊膜保存1个月后行羊膜移植。③实验评估:术后2～21d每日、21d后每3日观察眼表角膜透明度及新生血管生长情况;术后14,30,60d行荧光素染色,观察角膜上皮的修复情况;术后2周、1个月、2个月行组织病理和透射电镜观察。结果:白兔43只进入结果分析。①在角膜透明性及角膜上皮修复速度上新鲜羊膜组、甘油保存羊膜组和真空干燥羊膜组无明显差异,均明显优于乙醇保存羊膜组和对照组,乙醇保存羊膜组与对照组无明显差异。②在抑制新生血管方面,新鲜羊膜组明显优于甘油保存羊膜组及真空干燥羊膜组。结论:真空干燥羊膜、甘油保存羊膜和新鲜羊膜移植后均能减轻眼表碱烧伤的炎症反应,促进角膜上皮修复。其中新鲜羊膜效果最好,可能与其较其他羊膜含有更多的生物活性物质有关。

检材采集与保存方式对DNA提取效率的影响

目的研究检材采集与保存方式对DNA提取效率的影响。方法使用生物检材采集与保存套管棉签、尖头棉签和普通医用棉签采集血样,分别放置于生物检材采集与保存套管或纸质物证袋中保存1周。剪取全部血样于96孔板中,用磁珠法结合自动化工作站提取DNA,以ABI7500型荧光定量PCR仪定量。结果生物检材采集与保存套管采集保存的血样所提取的DNA浓度平均为(2.54±0.63)ng/μL,而尖头棉签、普通医用棉签采集并分别用纸袋保存的血样提取的DNA浓度平均为(2.06±0.44)ng/μL和(0.93±0.59)ng/μL。结论生物检材采集与保存套管较之于尖头棉签或普通医用棉签采集、纸袋保存方式,其获得的DNA浓度显著提高,DNA提取率高。

新鲜制备及中长期保存的羊膜细胞外基质结构特征

目的:制备并保存羊膜细胞外基质,观察新鲜制备及中长期保存的羊膜细胞外基质的结构特点。方法:实验于2004-01/12在赣南医学院科研中心完成。①采用目前国际公认的羊膜制备与保存方法,制备并保存羊膜细胞外基质。②取新鲜制备的羊膜细胞外基质、中期保存的羊膜细胞外基质(4℃恒温冰箱储存备用1周)、长期保存的羊膜细胞外基质(-80℃超低温冰箱中储存备用3个月),通过大体、光镜、透射电镜和扫描电镜观察其形态及结构特点。结果:①羊膜细胞外基质大体观察:新鲜制备及中、长期保存的羊膜细胞外基质均为透明、无色、有一定韧性生物膜,其厚度约0.02～0.4mm。②光镜观察结果:新鲜制备和经中、长期保存的羊膜细胞外基质可见2层结构:基底膜厚薄不均,无细胞结构;致密层由结缔组织组成。新鲜羊膜与中期保存的羊膜细胞外基质致密层较长期保存的羊膜细胞外基质略厚;新鲜羊膜细胞外基质可见少量成纤维细胞,而中、长期保存羊膜细胞外基质的成纤维细胞较少见。③透射及扫描电镜观察结果:新鲜制备与中期保存的羊膜细胞外基质两者的基底膜厚约0.1～0.2μm,致密层厚约30～400μm,其主要结构由胶原纤维、网状纤维和基质组成,偶见成纤维细胞;长期保存的羊膜细胞外基质的基底膜厚约0.2～0.3μm,致密层厚约20～400μm,其中致密层的主要成分为胶原纤维和网状纤维,无细胞结构;三者的胶原原纤维结构完全一致。结论:羊膜经过组织工程技术处理后去除其上皮细胞或使上皮细胞失活,保留基底膜与致密层,形成羊膜细胞外基质。羊膜细胞外基质主要成分是胶原纤维和网状纤维,因其免疫原性低于羊膜并具有抗炎性,是一种特殊的细胞外基质,作为一种细胞黏附的基膜和生物支架,具有广阔的研究和应用前景。因此羊膜细胞外基质可作为体外细胞培养的生物载体而应用于基础研究。

弯曲菌菌种冷冻保存及复苏方法的研究

目的探索一种简单、方便、有效的弯曲菌菌种保存方法。方法采用含30%甘油的脑心浸液肉汤,将实验室保存的19株弯曲菌于-30℃和-70℃分别保存,每个菌株3个菌种管。1年后,采用5%脱纤维羊血的布氏肉汤进行增菌,然后转种哥伦比亚血平板,比较存活效果。结果-30℃条件下采用多管法保存弯曲菌可以获得与-70℃条件下保存相当的效果。结论采用多管法(每株菌3个菌种管)于-30℃冷冻保存弯曲菌是一个简单、方便、有效、实用的方法。

一种短期保存肺炎双球菌的简单方法

目的 寻求一种简单易行的保存肺炎双球菌的方法。方法 在 - 2 0℃和 - 80℃条件下 ,用体积分数为 10 %的甘油新鲜兔脱纤维血 (新鲜兔血 )、体积分数为 10 %的甘油陈旧兔脱纤维血 (陈旧兔血 )和脱脂鲜奶作为保存剂 ,观察保存一定时间后肺炎双球菌存活百分率和其生物学性状的变化。结果 在 - 80℃保存 18个月其存活率均达 10 0 % ,且生物学性状保存前后无明显变化 ;在 - 2 0℃该菌株保藏 12个月以上时 ,用新鲜兔血、陈旧兔血和脱脂鲜奶保存剂保存该菌 ,其存活率分别为 70 %、30 %和 5 5 % ,差异有显著性 (P <0 0 1) ;而用新鲜兔血方法保存的菌株 ,其菌形、胆汁溶解和荚膜试验与保存前菌株相似 ,生化反应与保存前菌株相比稍有改变 ,而其它生物学性状无变化。结论 在 - 80℃保存该菌 ,上述 3种保存剂均可使用 ;在 - 2 0℃保存该菌 。

SMO保存液对犬肾低温保存期间Na^+-K^+ ATPase的影响

目的:研究SMO保存液对犬肾低温保存期间Na+-K+ATPase的影响。方法:建立犬离体肾脏单纯低温保存模型,对照组用0~4℃HTK保存液和UW保存液对供肾进行灌注和保存,试验组用0~4℃自制SMO保存液对供肾进行灌注和保存,分别于24、48、72h后取皮质标本,进行组织病理学观察及检测Na+-K+ATPase的活性。结果:SMO液组所见组织病理学改变,48h和72h比HTK液组轻,在各时间点与UW液组基本相似。Na+-K+ATPase活性,保存各时点,SMO液组与UW液组无明显差异;保存24h和48h,SMO液组与HTK液组无明显差异;保存72h,SMO液组Na+-K+ATPase活性明显高于HTK液组,存在明显差异。结论:SMO保存液在减轻细胞形态学改变和减缓Na+-K+ATPase活性下降方面显著优于HTK保存液,与UW保存液相当。

形态学实验室菌种保存的实验方法改革

目的探讨形态学实验室菌种保存的新方法。方法采用液状石蜡、甘油冷冻以及滤纸片低温冷冻保存菌种的方法对实验室的菌种进行保存。结果 3种菌种保存方法经过1年的保存,各菌种均生长良好。结论此3种菌种保存的方法适于实验室现有条件,切实可行。

一种低温生物实验用微型冷冻干燥仪及其初步应用

报道一种基于半导体制冷的微型真空冷冻干燥实验仪器,经初步测试,在输入功率低于70W条件下,可达到-70℃低温,当样品台载有小量液体时可在10min内降至-60℃。该仪器可用于实验室中对小量生物样品进行真空冷冻干燥保存的研究,也可在其它需要良好控制降温和升温的低温生物医学实验中得到应用。仪器具有可控温度范围宽、响应速度快、结构简单、操作方便等优点。该文还使用该仪器对水滴的冷冻和真空升华情况进行了试验研究。

临床与基础研究中实验室生物样本对接管理的主要问题及对策

背景:转化医学实现需要临床医师与基础研究者的密切合作。疾病相关的人体生物样本是转化医学研究的重要资源,是实现转化的核心环节。目的:分析临床医师与基础研究者合作开展转化医学研究的必要性,并就临床与基础研究实验室生物样本对接管理中的主要问题及策略进行了探讨。方法:英文检索词设定为"Translational medical research,biosample,biobank";中文检索词设定为"转化医学,生物样本,生物样本库"。检索中国知网、维普资讯、万方数据、Pub Med数据库2010年1月至2016年12月相关的文献124篇,选取其中部分文献及作者所在单位与其他单位的科研合作经验进行分析探讨。结果与结论:临床与基础研究实验室生物样本对接管理中可能遇到的问题,包括生物样本采集的伦理问题、标准操作流程的设定、生物样本的采集、运输、保存、登记、管理以及有关生物样本的知识产权分割等,医学标准化,高质量的疾病相关的人体生物样本是实现转化医学的核心环节。建立完善的利益共享机制,对于做好临床与基础研究实验室生物样本对接管理,后续转化医学研究工作的顺利进行将起到至关重要的作用。