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一株裂解耐氨苄西林金黄色葡萄球菌的噬菌体及其生物学特性与全基因组分析
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作者 张雪丽 于浩淼 +3 位作者 闫振贵 杨少华 张亮 杨宏军 《山东农业科学》 北大核心 2024年第3期132-138,共7页
本研究旨在分离能够高效裂解耐药金黄色葡萄球菌的噬菌体,为噬菌体生物制品的研制提供候选材料。以耐氨苄西林金黄色葡萄球菌为宿主菌,用双层平板法分离噬菌体,通过透射电子显微镜观察噬菌体形态,并对其进行生物学特性分析及全基因组测... 本研究旨在分离能够高效裂解耐药金黄色葡萄球菌的噬菌体,为噬菌体生物制品的研制提供候选材料。以耐氨苄西林金黄色葡萄球菌为宿主菌,用双层平板法分离噬菌体,通过透射电子显微镜观察噬菌体形态,并对其进行生物学特性分析及全基因组测序分析。结果分离得到一株金黄色葡萄球菌噬菌体,效价达2.75×10^(10)PFU/mL,命名为SP688。该噬菌体具有长的不收缩尾巴,属长尾噬菌体科,对7株耐氨苄西林金葡菌均有裂解效果,最佳感染复数为1,可在10 h内抑制细菌生长,在温度-20~54℃范围和pH值3~11之间活性稳定,对紫外线敏感。全基因组分析显示,SP688基因组为环状DNA,全长45499 kb,GC含量为34.1%;预测到64个开放阅读框(ORFs),其中19个(29.69%)被预测功能。该噬菌体是一株新型裂解耐氨苄西林金黄色葡萄球菌的广谱噬菌体,可为噬菌体治疗提供材料。 展开更多
关键词 黄色葡萄球菌 噬菌体 形态 生物学特性分析 基因组分析
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鸽屠宰加工环节金黄色葡萄球菌肠毒素、生物膜形成能力及其相关基因的检测
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作者 豆涛 刘英玉 +3 位作者 王金泉 马兰 张柳青 胡芸 《现代食品科技》 CAS 北大核心 2024年第10期370-378,共9页
为了解鸽屠宰加工环节中金黄色葡萄球菌的肠毒素、生物被膜形成能力、肠毒素及生物被膜形成相关基因的情况。采用金黄色葡萄球菌肠毒素酶联免疫分析试剂盒和结晶紫染色法检测41株金黄色葡萄球菌的肠毒素含量和生物被膜形成能力,同时通过... 为了解鸽屠宰加工环节中金黄色葡萄球菌的肠毒素、生物被膜形成能力、肠毒素及生物被膜形成相关基因的情况。采用金黄色葡萄球菌肠毒素酶联免疫分析试剂盒和结晶紫染色法检测41株金黄色葡萄球菌的肠毒素含量和生物被膜形成能力,同时通过PCR方法扩增金黄色葡萄球菌12种肠毒素基因和10种生物被膜形成相关基因。41株金黄色葡萄球菌在肠毒素酶联免疫法检测中,有30株为产肠毒素的菌株。肠毒素基因的检测中,有35株菌含肠毒素基因,检出率为85.36%,且有携带一种或多种肠毒素基因的情况。经典肠毒素基因的检出率分别为:sea(29.27%)、seb(29.27%)、sec(4.88%)、sed(65.85%)和see(2.44%);新型肠毒素基因的检出率分别为:sel(36.59%)、seg(29.27%)、sem(17.07%)、seu(17.07%)、sei(14.63%)、seh(7.32%)和sek(0.00%)。结晶紫染色法测定菌株生物被膜形成能力弱、中等和强的检出率分别为39.02%、43.90%和17.07%。生物被膜形成相关基因的检测中,clfB、luxS和clfA的检出率最高均为100.00%,其次是sarA和ccp均为97.56%,sigB、cna、icaA、agrC的检出率分别为85.37%、65.85%、41.46%、2.44%,bap未检出。此外,所有菌株均有携带多种生物被膜相关基因的情况,以携带7种基因的菌株最多(15/41,36.59%)。鸽屠宰加工环节污染中金黄色葡萄球菌存在较多的肠毒素且生物被膜形成能力较高,预测该鸽屠宰加工环节中金黄色葡萄球菌具有致病性,存在引起食物中毒的潜在风险。 展开更多
关键词 黄色葡萄球菌 肠毒素 生物被膜形成能力 生物被膜形成相关基因
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食源性金黄色葡萄球菌生物膜形成调控与生物防控策略研究进展 被引量:1
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作者 李玉珍 肖怀秋 王斌 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第6期188-196,共9页
生物膜是很多食源性致病菌应对各种极端环境、杀菌理化因子以及维持菌体内环境稳定的重要基质屏障。数据显示,有超过80%的细菌感染由生物膜引起,尤以金黄色葡萄球菌感染多见。食源性金黄色葡萄球菌是引发细菌性食物中毒和食品安全事故... 生物膜是很多食源性致病菌应对各种极端环境、杀菌理化因子以及维持菌体内环境稳定的重要基质屏障。数据显示,有超过80%的细菌感染由生物膜引起,尤以金黄色葡萄球菌感染多见。食源性金黄色葡萄球菌是引发细菌性食物中毒和食品安全事故的重要风险源,特别是多重耐药菌株。金黄色葡萄球菌的耐药性、致病性和免疫逃逸与生物膜复杂的三维结构有重大关系。由于生物膜结构基因和调控因子结构相对保守,现已成为金黄色葡萄球菌生物防控新的重要的效应靶点。本文从多糖细胞间黏附素、胞外DNA和生物膜形成相关蛋白等角度阐明了生物膜形成机制,从群体感应系统(如Agr系统和LuxS/AI-2群体感应系统)、全局性调控因子(如附属调节因子Sar和转录因子SigB)及双组分信号转导系统(如SrrAB系统、SaeRS系统、ArlRS系统、LytRS系统和WalKR系统)等角度系统阐述了生物膜形成调控机制。最后,从抗菌肽(蛋白)、植物源化合物、生物酶、抗菌药物等角度提出新的防控策略,以期为食源性金黄色葡萄球菌的生物防控提供指导。 展开更多
关键词 食源性致病菌 黄色葡萄球菌 生物 基因调控因子 生物防控
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新疆驼乳源金黄色葡萄球菌MLST分型与毒力基因检测 被引量:1
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作者 吴自豪 蔡依龙 +1 位作者 池昊明 陈伟 《塔里木大学学报》 2024年第2期12-18,共7页
为了解驼乳源金黄色葡萄球菌多位点序列分型(multilocus sequence typing, MLST)与毒力基因携带情况,本试验对新疆驼乳源分离得到的金黄色葡萄球菌进行MLST、药物敏感性检测、生物被膜形成能力和溶血性检测以及毒力基因检测。结果表明,... 为了解驼乳源金黄色葡萄球菌多位点序列分型(multilocus sequence typing, MLST)与毒力基因携带情况,本试验对新疆驼乳源分离得到的金黄色葡萄球菌进行MLST、药物敏感性检测、生物被膜形成能力和溶血性检测以及毒力基因检测。结果表明,金黄色葡萄球菌在健康生驼乳中的分离率为5%(4/80);4株金黄色葡萄球菌分别属于ST8114、ST8119、ST2073和ST130(其中ST8114和ST8119为新的序列型),对12种抗菌药物全部敏感;在4株驼乳源金黄色葡萄球菌中可检测到sei、hla、hlb、clfA和clfB等毒力基因,并且均具有生物被膜形成能力和溶血活性。说明新疆驼乳源金黄色葡萄球菌分型丰富,在宿主致病和食品生产安全等方面存在隐患。本研究可为新疆驼乳源金黄色葡萄球菌的相关研究提供基础试验数据。 展开更多
关键词 驼乳 黄色葡萄球菌 MLST分型 毒力基因 生物被膜
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临床分离金黄色葡萄球菌生物膜相关基因的PCR分析 被引量:9
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作者 孙凤军 枉前 夏培元 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第15期1447-1449,共3页
目的确定临床分离的金黄色葡萄球菌生物膜形成能力和生物膜相关基因之间的关系,为生物膜形成的机制研究提供依据。方法96孔板番红染色法检测生物膜的形成,icaAD、icaBC、sar、agr和sigB的PCR扩增,并对产物进行测序和同源性比较。结果27... 目的确定临床分离的金黄色葡萄球菌生物膜形成能力和生物膜相关基因之间的关系,为生物膜形成的机制研究提供依据。方法96孔板番红染色法检测生物膜的形成,icaAD、icaBC、sar、agr和sigB的PCR扩增,并对产物进行测序和同源性比较。结果27株金黄色葡萄球菌中共有17株形成了肉眼可见的生物膜,其中以X387和X409两株最明显;有22株扩增出icaAD和icaBC,全部菌株扩增出sar、agr和sigB。结论ica是形成金葡菌生物膜的关键基因,但ica在形成生物膜过程中需要其他基因的协同作用。 展开更多
关键词 黄色葡萄球菌 生物 生物膜相关基因
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金黄色葡萄球菌生物被膜形成与生物被膜相关基因的调查研究 被引量:7
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作者 贺建忠 陈宏伟 +4 位作者 王贵强 王永 白万胜 郭新怀 王勇 《江苏农业科学》 北大核心 2015年第4期55-59,共5页
以分离自全国9个省(市、区)的102株奶牛乳房炎源性金黄色葡萄球菌为研究对象,应用刚果红法(congo red agar,CRA)和半定量黏附试验(semi quantitative adherence assay,SQAA)检测了生物被膜形成情况,应用PCR法检测了8种生物被膜相关基因... 以分离自全国9个省(市、区)的102株奶牛乳房炎源性金黄色葡萄球菌为研究对象,应用刚果红法(congo red agar,CRA)和半定量黏附试验(semi quantitative adherence assay,SQAA)检测了生物被膜形成情况,应用PCR法检测了8种生物被膜相关基因分布情况。结果发现,携带7种基因的菌株占有绝对优势,其次是携带6种基因的菌株;最流行的基因组合是Sig B-icaR-ica A-ica D-sar A-rbf-Sas G,比例高达66.7%;北京、内蒙古、宁夏、甘肃、广西、上海等地生物被膜形成与生物被膜相关基因的分布高度一致。以上研究结果表明,多种生物被膜相关基因组合是奶牛乳房炎源性金黄色葡萄球菌流行的主要特点,生物被膜形成和生物被膜相关基因的分布在大多数地区表现高度一致性,rbf和Sig B基因可能在金黄色葡萄球菌生物被膜形成和乳房感染过程中发挥着重要作用。本研究结果将为金黄色葡萄球菌性乳房炎的防治提供一定的科学参考。 展开更多
关键词 黄色葡萄球菌 生物被膜 奶牛乳房炎 生物被膜相关基因
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尿路感染分离金黄色葡萄球菌生物膜形成能力及相关基因的分析 被引量:4
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作者 孙凤军 洪海 +2 位作者 冯伟 孙艺璇 夏培元 《重庆医学》 CAS 北大核心 2016年第19期2617-2619,共3页
目的探讨尿路感染分离金黄色葡萄球菌的生物膜形成能力及相关基因分布,为预防和治疗临床感染提供理论基础。方法采用标准琼脂平板倍比稀释法检测最小抑菌浓度,菌落计数法检测细菌黏附能力,96孔板结晶紫染色法检测细菌生物膜形成能力,生... 目的探讨尿路感染分离金黄色葡萄球菌的生物膜形成能力及相关基因分布,为预防和治疗临床感染提供理论基础。方法采用标准琼脂平板倍比稀释法检测最小抑菌浓度,菌落计数法检测细菌黏附能力,96孔板结晶紫染色法检测细菌生物膜形成能力,生物膜相关基因检测采用PCR扩增法。结果 11株金黄色葡萄球菌临床株对青霉素和红霉素耐药率较高,而对万古霉素和呋喃妥因全部敏感。所有菌株都有较强的黏附能力,而生物膜形成能力一般。其中10株菌株扩增出icaAD和icaBC基因。结论尿路感染金黄色葡萄球菌的黏附能力和生物膜形成能力具有菌株差异性,ica是金黄色葡萄球菌生物膜形成的重要基因。 展开更多
关键词 黄色葡萄球菌 尿路感染 生物 黏附 ica基因
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金黄色葡萄球菌临床分离株生物膜形成能力及其相关基因的检测 被引量:4
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作者 潘红 罗欲承 +2 位作者 赵建忠 段秀杰 邵世和 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2012年第4期332-335,共4页
目的:检测临床分离金黄色葡萄球菌(金葡菌)的生物膜形成能力及其相关基因。方法:用半定量微量平板法检测临床分离的92株金葡菌生物膜形成能力,并通过扫描电镜观察生物膜形态,用PCR法来检测生物膜形成的相关基因ica和sarA。结果:92株临... 目的:检测临床分离金黄色葡萄球菌(金葡菌)的生物膜形成能力及其相关基因。方法:用半定量微量平板法检测临床分离的92株金葡菌生物膜形成能力,并通过扫描电镜观察生物膜形态,用PCR法来检测生物膜形成的相关基因ica和sarA。结果:92株临床分离金葡菌菌株均可形成生物膜,PCR结果显示100%的分离株均含有sarA基因,78株(84.78%)含有ica基因。结论:临床分离的金葡菌都具有形成生物膜的能力,生物膜形成的相关基因ica和sarA的携带率较高。 展开更多
关键词 黄色葡萄球菌 生物 ica基因 sarA基因
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金黄色葡萄球菌生物膜形成相关基因及检测方法的研究进展 被引量:4
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作者 刘美慧 李建科 刘柳 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期265-269,共5页
金黄色葡萄球菌在食品加工设备表面和储藏过程中极易形成生物膜,形成的生物膜很难被彻底清除,并且可以保护膜内生长的细菌,从而给食品安全乃至整个食品产业带来了安全隐患。该文综述了生物膜形成过程中相关基因和目前常用生物膜定量定... 金黄色葡萄球菌在食品加工设备表面和储藏过程中极易形成生物膜,形成的生物膜很难被彻底清除,并且可以保护膜内生长的细菌,从而给食品安全乃至整个食品产业带来了安全隐患。该文综述了生物膜形成过程中相关基因和目前常用生物膜定量定性检测方法的最新研究进展,为深入了解生物膜形成机理以及定量定性检测相关方法提供一定的参考。 展开更多
关键词 黄色葡萄球菌 生物 基因 检测方法
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一种快速检测含tst基因的金黄色葡萄球菌的纳米生物 传感器 被引量:1
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作者 李明阳 贺气志 +1 位作者 马春霞 俞建昆 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期81-86,共6页
基于荧光能量共振转移(Fluorescence energy resonance transfer,FRET)原理利用单壁碳纳米管(Single-walled carbon nanotubes,SWCNTs)构建一种操作简单、成本低、灵敏度高和选择性强的纳米生物传感器快速检测含有tst基因金黄色葡萄球... 基于荧光能量共振转移(Fluorescence energy resonance transfer,FRET)原理利用单壁碳纳米管(Single-walled carbon nanotubes,SWCNTs)构建一种操作简单、成本低、灵敏度高和选择性强的纳米生物传感器快速检测含有tst基因金黄色葡萄球菌。将tst基因互补序列设计为探针,利用单壁碳纳米管联合羧基荧光素(FAM)标记的DNA分子探针(FAM-P)构建出FAM-P/SWCNTs复合检测体系。考察该体系对靶标序列和靶标菌的灵敏度和特异性。结果表明,该生物传感器对靶标序列的检测下限低至10 nmol/L,并在10-100 nmol/L范围内具有较好的线性关系(R2=0.994),对靶标菌的检测下限低至102,且在102-107CFU/m L范围内均呈现良好的线性关系(R2=0.999)。此外,在错配实验和对非靶标菌检测时,该传感器呈现了较高的特异性。本研究构建的FAM-P/SWCNTs体系能快速检测含tst基因金黄色葡萄球菌,并具有操作简单、灵敏度高、特异性强等优点,为食品检测、临床诊断等领域开辟了新途径。 展开更多
关键词 单壁碳纳米管 荧光标记的核酸探针 tst基因 黄色葡萄球菌
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基于Antares2的金黄色葡萄球菌生物发光示踪系统的构建 被引量:1
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作者 胡珍 尚伟龙 饶贤才 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期393-399,共7页
目的构建融合型荧光素酶标记的金黄色葡萄球菌示踪菌株,建立金葡菌示踪系统。方法采用同源重组技术将融合型荧光素酶Antares2编码基因敲入到金葡菌USA300基因组中,与金葡菌烯醇酶编码基因eno融合,构建稳定表达的示踪菌株。将示踪菌株与... 目的构建融合型荧光素酶标记的金黄色葡萄球菌示踪菌株,建立金葡菌示踪系统。方法采用同源重组技术将融合型荧光素酶Antares2编码基因敲入到金葡菌USA300基因组中,与金葡菌烯醇酶编码基因eno融合,构建稳定表达的示踪菌株。将示踪菌株与不同的底物混合,检测生物发光强度差异,筛选合适的菌株/底物示踪系统,并探究其在体外和体内的敏感性。结果通过构建基因敲入质粒pBT2-eno-antares2,转化金葡菌USA300菌株中进行基因敲入菌株筛选,经DNA测序和Western blot鉴定示踪菌株USA300/Eno-Antares2构建成功。细菌生长曲线和溶血实验表明所构建的示踪菌株与野生型USA300无明显差异。将示踪菌与DTZ、FUR和HFZ底物混合,肉眼均可观察到发光。不同浓度不同底物分析显示,USA300/Eno-Antares2/HFZ组成的系统发光性能最优,体外发光示踪的敏感性为50 CFU(菌落形成单位),小鼠体内示踪敏感性为100 CFU。结论金葡菌USA300/Eno-Antares2/HFZ示踪系统性能佳,可用于金葡菌感染、定植、播散等研究。 展开更多
关键词 黄色葡萄球菌 生物发光 示踪系统 荧光素酶
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血流感染金黄色葡萄球菌毒力基因、agr分型及生物膜形成能力调查
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作者 贾佳 纪玥玥 +3 位作者 高硕 张燕 周万青 沈瀚 《临床检验杂志》 CAS 2023年第2期117-122,共6页
目的探讨血液来源金黄色葡萄球菌耐药性、毒力基因、agr分型、生物膜形成能力,并比较甲氧西林敏感株与耐药株间的差异。方法收集2019年1月—2020年12月102株血液分离非重复金黄色葡萄球菌菌株,采用全自动微生物鉴定药敏分析系统进行药... 目的探讨血液来源金黄色葡萄球菌耐药性、毒力基因、agr分型、生物膜形成能力,并比较甲氧西林敏感株与耐药株间的差异。方法收集2019年1月—2020年12月102株血液分离非重复金黄色葡萄球菌菌株,采用全自动微生物鉴定药敏分析系统进行药物敏感性检测;采用PCR及多重PCR分析菌株毒力基因携带情况及agr基因多态性;采用96孔板结晶紫染色法检测生物膜形成能力。采用卡方检验和Fisher精确概率法比较分析甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)菌株间耐药性、毒力基因、agr分型及生物膜形成能力的差异。结果102株金黄色葡萄球菌中,43株为MRSA,59株为MSSA。毒力基因普遍表达葡萄黄质蛋白基因crtN(99.0%)、溶血素基因(hla 97.1%、hlb 98.0%、hld 96.1%),其次为表面因子CP8合成酶基因cap8H(34.3%)、中毒性休克综合征毒素-1基因tst(21.6%),其中携带crtN/hla/hlb/hld 4种毒力基因组合的菌株最多(48株)。agr分型阳性率为97.1%,其中agrⅠ型占56.9%,agrⅡ型占36.3%,agrⅢ型占4.9%,未检测出agrⅣ型,agr未获分型3株。生物膜形成阳性共28株,其中12株可形成强生物膜。MRSA菌株对环丙沙星、四环素、红霉素、克林霉素、左氧氟沙星、莫西沙星的耐药率高于MSSA菌株(P<0.05);MRSA菌株tst基因携带率高于MSSA(P<0.01),cap8H基因携带率低于MSSA(P<0.05),差异有统计学意义;MRSA菌株中agrⅠ和agrⅡ型各占46.51%和48.84%;MRSA菌株更倾向形成中等或弱生物膜,与MSSA菌株相比在生物膜形成能力上差异无统计学意义。结论临床分离血流感染金黄色葡萄球菌存在多种毒力基因、agr分型、生物膜形成能力,需加强监测。 展开更多
关键词 甲氧西林耐药黄色葡萄球菌 血流感染 附属基因调节因子agr 毒力基因 生物
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奶牛源金黄色葡萄球菌新疆分离株生物被膜、肠毒素基因与毒力的检测及其相关性分析 被引量:8
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作者 伍晔晖 孟庆玲 +4 位作者 乔军 李静 蔡扩军 王登峰 才学鹏 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第11期2693-2698,共6页
【目的】检测奶牛源金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)新疆分离株生物被膜、肠毒素基因分布与毒力,分析其内在联系。【方法】采用微量滴定板测定法(MPA)、PCR方法和寇氏改良法分别测定164株S.aureus新疆分离株生物被膜(BF)形成能... 【目的】检测奶牛源金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)新疆分离株生物被膜、肠毒素基因分布与毒力,分析其内在联系。【方法】采用微量滴定板测定法(MPA)、PCR方法和寇氏改良法分别测定164株S.aureus新疆分离株生物被膜(BF)形成能力、肠毒素基因分布、小鼠半数致死量(LD50)和脏器载菌量,观察其病理组织学变化。【结果】164株S.aureus BF阳性率为83.4%,以弱BF(BF^+)菌株为主;肠毒素基因检出率为96.3%,传统肠毒素see和新型肠毒素seg检出率最高,分别为57.3%和81.1%;强BF菌株(BF^3+)LD50要高于弱BF菌株(BF^+)和阴性菌株(BF^-),但其脏器载菌量低于BF^-菌株(P<0.05)。【结论】奶牛源S.aureus新疆分离株BF阳性菌株所占比例较高,其肠毒素基因携带率也较高。毒力研究表明,S.aureus分离株BF^3+菌株脏器载菌量低于BF^-菌株(P<0.05),且随着BF形成能力的增强毒力相应减弱。 展开更多
关键词 黄色葡萄球菌 生物被膜 肠毒素基因 半数致死量
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临床分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物膜表型检测及其相关基因分析 被引量:11
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作者 黄惟彬 黄静 +2 位作者 朱家馨 杨海玲 吴文斌 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第5期830-833,共4页
目的:探讨耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)生物膜表型与其相关基因的关系。方法:收集33株临床分离的MRSA菌株并对其进行结晶紫半定量黏附实验及刚果红琼脂实验,同时用PCR方法对菌株的生物膜相关基因icaA、sarA、fnbA、fnbB进行检测。结... 目的:探讨耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)生物膜表型与其相关基因的关系。方法:收集33株临床分离的MRSA菌株并对其进行结晶紫半定量黏附实验及刚果红琼脂实验,同时用PCR方法对菌株的生物膜相关基因icaA、sarA、fnbA、fnbB进行检测。结果:33株MRSA中,结晶紫半定量黏附实验阳性有29株,即MRSA生物膜形成率为87.9%;刚果红琼脂实验阳性有16株(48.5%);icaA、sarA、fnbA、fnbB检出率分别为39.4%(13株)、69.7%(23株)、39.4%(13株)、75.8%(25株)。其中通过ica依赖途径形成生物膜的有44.8%,ica A非依赖途径的有55.2%。在生物膜阳性的29株菌中,sarA、fnbA、fnbB的检出率分别为75.9%、37.9%、79.3%。结论:MRSA菌株主要通过ica非依赖途径形成生物膜,fnbB和sarA基因在MRSA生物膜相关基因中检出率较高,MRSA生物膜主要通过fnbB基因介导形成,sarA可能通过调节fnbB基因的表达而促进生物膜的形成。 展开更多
关键词 耐甲氧西林黄色葡萄球菌 耐药 生物 基因 fnb
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牛源金黄色葡萄球菌生物被膜与毒素基因检测及agr分型 被引量:5
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作者 张行 李新圃 +4 位作者 武小虎 丁学智 严作廷 王胜义 李宏胜 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期2903-2910,共8页
旨在对牛源金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)的生物被膜、耐药性、毒素基因和agr基因型进行研究,并分析agr基因型与毒素基因之间的相关性。分别用微量滴定板法、药敏纸片法和PCR对S.aureus的生物被膜、耐药性和毒素基因... 旨在对牛源金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)的生物被膜、耐药性、毒素基因和agr基因型进行研究,并分析agr基因型与毒素基因之间的相关性。分别用微量滴定板法、药敏纸片法和PCR对S.aureus的生物被膜、耐药性和毒素基因进行检测,用多重PCR对S.aureus进行agr分型。结果表明,336株牛源S.aureus均能形成生物被膜,其中,形成中等(++)和强(+++)生物被膜的S.aureus分别占52.1%和47.9%。药敏试验结果显示,S.aureus对青霉素耐药最为严重,耐药率达91.7%,其次是红霉素、卡那霉素、克林霉素和庆大霉素,耐药率分别为89.6%、72.9%、66.7%和60.4%,而所有S.aureus对呋喃妥因和利奈唑胺均表现为敏感。PCR检测结果显示,黏附素基因fnbA检出率最高,达99.7%,其次是icaD、icaA、clfA和cna,检出率分别为98.2%、89.6%、86.0%和56.0%,bap基因检出率最低,为14.6%。肠毒素基因sea的检出率为26.5%,其次是seb(8.3%)和sec(6.8%),毒素基因tst的检出率占8.3%。分型结果显示,agrⅠ型S.aureus是主要的流行菌株,占77.1%,agrⅡ、agrⅢ和agrⅣ型S.aureus流行率分别为14.0%、4.8%和2.1%。统计分析结果表明,agrⅠ型S.aureus更具有携带多种毒素基因的潜力,而agrⅣ型S.aureus无毒素基因携带潜力。综上表明,牛乳腺炎性S.aureus对常见的抗菌药物耐药严重,毒素基因分布多样,agrⅠ型是奶牛乳腺炎性S.aureus主要的基因型,且具有携带多种毒素基因的能力,其潜在威胁应引起重视。 展开更多
关键词 奶牛乳腺炎 黄色葡萄球菌 生物被膜 毒素基因 agr分型
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食品中金黄色葡萄球菌生物被膜形成基因分析及影响因素研究 被引量:10
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作者 马伊萨兰 张荣 +4 位作者 王洪志 赵燕英 陈娟 刘骥 唐俊妮 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2017年第15期129-133,139,共6页
分析金黄色葡萄球菌食品分离菌株生物被膜形成相关基因,研究茶多酚和乳酸链球菌素(Nisin)对不同菌株生长及生物被膜形成的影响。以实验室保存的16株金黄色葡萄球菌食品分离菌株为研究对象,采用聚合酶链式反应(PCR)检测14种生物被膜形成... 分析金黄色葡萄球菌食品分离菌株生物被膜形成相关基因,研究茶多酚和乳酸链球菌素(Nisin)对不同菌株生长及生物被膜形成的影响。以实验室保存的16株金黄色葡萄球菌食品分离菌株为研究对象,采用聚合酶链式反应(PCR)检测14种生物被膜形成相关基因;通过微孔板法研究不同浓度茶多酚和Nisin对不同菌株生长的抑制作用,确定最小抑菌浓度(MIC);在此基础上进一步研究茶多酚和Nisin对生物被膜形成能力影响。结果表明:14种生物被膜形成相关基因中有10种被检出,其中cna、ebp S、fib和ica AD基因检出率为100%,sas C为87.5%、fnb A为68.75%、sas G为68.75%、clf B为68.75%、eno为62.5%,ica BC为56.25%;16株菌株中均不携带bbp、bap、clf A和fnb B基因。16株菌株均能形成生物被膜,但形成能力有差异,其中F23、F44、F58、F64、F71、F86、F107和F109等8株菌株为被膜强形成菌株,F7、F19、F40、F46、F60、F99、F101、F106等8株菌株为被膜弱形成菌株。茶多酚和Nisin对16株金黄色葡萄球菌食品分离菌株的MIC范围分别为0.1~0.2 g/L和0.125~1 g/L,茶多酚和Nisin在1/2MIC和1/4MIC浓度下对生物被膜形成抑制作用明显(p<0.05),且茶多酚抑制效果强于Nisin。本研究结果为食品中金黄色葡萄球菌生物被膜形成控制具有参考意义。 展开更多
关键词 黄色葡萄球菌 生物被膜形成相关基因 最小抑菌浓度 茶多酚 乳酸链球菌
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食源性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物被膜的形成及相关基因的检测 被引量:4
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作者 张鹏飞 王婷 +2 位作者 钟楠 张伟松 王新 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2020年第10期41-49,共9页
为了解食源性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant S.aureus,MRSA)生物被膜形成能力及其相关基因携带情况。采用刚果红琼脂法和96孔板法测定22株食源性MRSA菌株(包括:原料乳分离株4株,鸡肉、速冻水饺和即食食品分离株各6株... 为了解食源性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant S.aureus,MRSA)生物被膜形成能力及其相关基因携带情况。采用刚果红琼脂法和96孔板法测定22株食源性MRSA菌株(包括:原料乳分离株4株,鸡肉、速冻水饺和即食食品分离株各6株)的生物被膜形成能力,同时通过PCR方法对MRSA菌株生物被膜形成相关的15个基因进行检测分析。22株MRSA菌株中,刚果红琼脂法和96孔板法分别检测出21株(95.45%)和22株(100.00%)有生物被膜形成能力。96孔板法测定菌株生物被膜形成能力弱、中等和强的检出率分别为54.55%、40.91%和4.55%。MRSA菌株生物被膜相关基因clfA、fib和eno的携带率最高均为95.45%,其次是clfB(90.91%)、fnbB(54.55%)、icaBC和ebpS(都为45.45%)、agr(27.27%)、icaAD和cna(都为22.73%)、fnbA(13.64%),sar,bbp和sigB(都为4.55%)。此外,来自原料乳和即食食品的MRSA菌株较生鸡肉和速冻水饺MRSA菌株生物被膜形成能力强(p<0.05)。结果表明,96孔板法能够进行定性和定量检测生物膜的形成,而刚果红琼脂法只能定性检测生物被膜的形成,两者的定性检测结果存在一定的差异。通过96孔板法定量检测的结果表明食源性MRSA菌株普遍能形成生物被膜,其中存在一些生物被膜形成能力强的MRSA菌株,同时大部分MRSA菌株不依赖ica途径形成生物被膜,提示产肠毒素MRSA菌株形成生物被膜定植在食品加工过程的环境中,不易清除,成为食品安全中的潜在隐患。 展开更多
关键词 耐甲氧西林黄色葡萄球菌 生物被膜 生物被膜形成相关基因
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杀白细胞毒素基因阴性金黄色葡萄球菌的基因分型、耐药性及其生物学特征 被引量:3
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作者 额尔德木图 王艳艳 +2 位作者 吕莹莹 陈贵林 王俊瑞 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期971-978,共8页
目的:研究杀白细胞毒素(pvl)基因阴性金黄色葡萄球菌对多种抗菌药物的耐药性、基因分型和生物膜形成能力。方法:收集于内蒙古医科大学附属医院住院患者送检标本中分离出的100株金黄色葡萄球菌,包括耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和甲... 目的:研究杀白细胞毒素(pvl)基因阴性金黄色葡萄球菌对多种抗菌药物的耐药性、基因分型和生物膜形成能力。方法:收集于内蒙古医科大学附属医院住院患者送检标本中分离出的100株金黄色葡萄球菌,包括耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA),进行细菌鉴定和12种抗菌药物的药物敏感性试验(药敏试验),采用辅助基因调控子(agr)分型方法进行基因分型,采用PCR法检测pvl基因及其他31种毒力基因,结晶紫染色法检测菌株的生物膜形成能力。结果:100株pvl基因阴性金黄色葡萄球菌临床分离株中,38株为MSSA,62株为MRSA;金黄色葡萄球菌对万古霉素、利奈唑胺和奎奴普丁/达福普丁全部敏感,除红霉素以外,MRSA对其他产生耐药抗生素的耐药率均明显高于MSSA(P<0.01)。agr基因分型,agr-Ⅰ~Ⅳ均在金黄色葡萄球菌中发现,其中agr-Ⅰ为主要基因型(79.0%),其次为agr-Ⅱ基因型(16.0%);MSSA的agr-Ⅱ基因携带率(81.3%)明显高于MRSA(19.7%)(P<0.01);MRSA的agr-Ⅰ基因携带率(72.2%)明显高于MSSA(27.8%)(P<0.01)。32个毒力基因中,hla和hld基因阳性率均为100%,而edin、etb和pvl基因均阴性。MRSA中sdrE、sea、seb、seh、tsst、lukDE、lukM、hlb和mpHLG2-1基因携带率高于MSSA,其中sea和seh基因携带率(56.5%和79.0%)明显高于MSSA(7.9%和60.5%)(P<0.05或P<0.01),而其他18个基因携带率均低于MSSA,其中mpHLG、seo、sed和sej基因的携带率明显低于MSSA(P<0.05或P<0.01),MSSA中23.7%(9/38)同时携带≥15个毒力基因,明显高于MRSA[14.5%(9/62)]。MSSA和MRSA产膜株分别占100%(38/38)和85.5%(53/62)(P<0.05)。结论:pvl基因阴性金黄色葡萄球菌主要以agr-Ⅰ型为主,MRSA对多种抗菌药物耐药率高于MSSA,而MSSA整体毒力基因携带率明显高于MRSA,且MSSA生物膜形成能力高于MRSA。 展开更多
关键词 黄色葡萄球菌 杀白细胞毒素 耐药性 基因分型 生物
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两株新的金黄色葡萄球菌烈性噬菌体的生物学特性和基因组学研究 被引量:4
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作者 靳晓东 张聪慧 钟江 《微生物与感染》 2018年第6期335-341,共7页
以金黄色葡萄球菌为宿主菌,从奶牛场废水样品中分离到两株烈性噬菌体,分别命名为phiSA_BS1和phiSA_BS2。电子显微镜观察显示其头部呈多面体对称,有伸缩性尾部。对这两株噬菌体的一步生长曲线、温度耐受性和pH耐受性进行研究,发现两者均... 以金黄色葡萄球菌为宿主菌,从奶牛场废水样品中分离到两株烈性噬菌体,分别命名为phiSA_BS1和phiSA_BS2。电子显微镜观察显示其头部呈多面体对称,有伸缩性尾部。对这两株噬菌体的一步生长曲线、温度耐受性和pH耐受性进行研究,发现两者均裂解3株金黄色葡萄球菌,但不能裂解1株表皮葡萄球菌。进一步分析它们的全基因组序列,发现phiSA_BS1基因组大小为142 978bp,GC含量为29.80%,预测到201个开放读码框(open reading frame,ORF),未预测到tRNA基因;phiSA_BS2基因组大小为149 230bp,GC含量为29.61%,预测到210个ORF和1个tRNA基因。系统发育分析表明,这两株噬菌体同属肌尾噬菌体科,属于新的金黄色葡萄球菌噬菌体,可能为治疗金黄色葡萄球菌相关的奶牛乳腺炎提供新的方法。 展开更多
关键词 黄色葡萄球菌 噬菌体 生物学性状 基因组学分析
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社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec基因分型及药敏结果 被引量:3
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作者 牛瑞兵 郭利平 +2 位作者 王新刚 段宝生 巴特尔 《中国感染控制杂志》 CAS 北大核心 2016年第12期897-901,共5页
目的了解某院门诊和住院患者标本分离的社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(CA-MRSA)盒式染色体基因(SCCmec)型别以及CA-MRSA耐药性。方法收集该院2011年5月—2015年8月分离的MRSA及其相关病史资料,利用聚合酶链反应(PCR)方法进行MRSA... 目的了解某院门诊和住院患者标本分离的社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(CA-MRSA)盒式染色体基因(SCCmec)型别以及CA-MRSA耐药性。方法收集该院2011年5月—2015年8月分离的MRSA及其相关病史资料,利用聚合酶链反应(PCR)方法进行MRSA的mecA基因和CA-MRSA的SCCmec基因分型检测,对CA-MRSA进行药物敏感性试验并进行统计分析。结果共收集MRSA 305株,其中mecA阳性296株。CA-MRSA88株,占29.73%(88/296),其中48株为SCCmecⅣ型,36株为SCCmecⅤ型,4株未定型。药敏试验显示,CA-MRSA对万古霉素、利奈唑胺、替加环素均100%敏感,对青霉素和苯唑西林100%耐药;SCCmecⅣ和Ⅴ型CA-MRSA对左氧氟沙星、利福平、环丙沙星的耐药率比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。SCCmecⅣ、Ⅴ型CA-MRSA对氨苄西林/舒巴坦、呋喃妥因、红霉素的耐药率均>58%。结论该院CA-MRSA的SCCmec分型以Ⅳ和Ⅴ型为主,且耐药率较高,临床医生应对此高度重视,根据药敏结果合理应用抗菌药物。 展开更多
关键词 黄色葡萄球菌 社区获得性耐甲氧西林黄色葡萄球菌 CA-MRSA SCCMEC基因分型 抗药性 生物 耐药性 合理用药
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