冷冻猪肝细胞在生物型人工肝系统中生存状态研究

目的研究冷冻复温后猪肝细胞在生物型人工肝支持系统(BALSS)中的生存状态。方法用酶法从中国实验用小型猪肝脏分离猪肝细胞,将1×1010猪肝细胞冷冻保存在-196℃液氮中,1个月后复温,将等量冷冻和新鲜猪肝细胞分别培养在BALSS中,比较其形态、存活率和白蛋白、尿素、葡萄糖合成功能及对利多卡因的转化功能。结果冷冻保存的猪肝细胞,复温后存活率较高,在培养于BALSS时其生化功能、利多卡因转化功能及超微结构与新鲜肝细胞类似。结论用冻存方法保存猪肝细胞可试用于BALSS系统。

TECA生物型人工肝支持系统替代衰竭肝脏功能机制的实验研究

分析中国实验用小型猪肝细胞型生物人工肝支持系统 (BALSS)替代衰竭肝功能的可能机制。使少肝急性肝衰 (ALF)犬血液或 16 40培养液循环流经BALSS中空纤维管的内腔 ,与培养于中空纤维管外腔中的猪肝细胞营养液进行物质交换。测定 16 40液中利多卡因浓度、白蛋白和尿素浓度的变化 ;用蛋白电泳法测定 16 40液和猪肝细胞营养液中蛋白成分的变化 ;用透射电镜观察治疗ALF犬时BALSS中猪肝细胞超微结构的变化。结果显示BALSS循环 6h时 ,16 40液中利多卡因浓度明显降低 ;白蛋白和尿素浓度明显升高 ;分子量小于 10 0kD的蛋白质成分明显增多。BALSS治疗ALF犬 6h时 ,猪肝细胞的超微结构出现明显的损伤。提示此型BALSS的猪肝细胞通过透析膜可较好地发挥肝细胞的生物转化及合成代谢等功能 ,以此达到暂时替代衰竭肝脏功能的效应。

新型生物人工肝支持系统的控制与实现

本研究阐述了生物型人工肝支持系统中用于肝细胞培养的生物反应器的控制原理和工程实现。针对肝细胞生长过程中的各种特殊环境要求,设计了以关联控制为核心的控制算法,结合比例、积分、微分(PID)技术、预测控制、先进过程控制(APC)等方法,实现了对各种指标的稳定控制。实验中使用HepG2细胞连续培养60 h,温度(T)控制在37℃±0.2℃,溶解氧(DO)含量控制在95%±10%,酸碱度(pH)控制在7.3±0.2,用以验证生物反应器的实际效果。细胞在连续培养24 h和60 h时取样,经镜检并进行细胞计数。实验结果表明:细胞生长过程中的各项主要物理指标控制稳定,细胞在该反应器中生长状态良好,生长速度明显优于对照组。

生物型人工肝支持系统研究进展

暂时的功能替换和加强支持在抢救终末期器官衰竭病人中有重要作用。透析技术已常规用于急慢性肾功能衰竭治疗。但肝脏功能极为复杂 ,人工模拟或部分替换其功能一直都只是临床医生和生物工程学家的梦。随着细胞生物学和材料科学研究的飞速发展 ,结合生物医用材料和肝细胞体外培养技术而设计的体外灌流装置能替代人类肝脏部分功能 ,此即所谓“组合型”或生物型人工肝支持系统。最近 ,许多类型的人工肝支持系统已进入临床前试验。

APC技术在生物型人工肝支持系统中的应用

提出了一种基于先进过程控制(Advanced Process Control,APC)技术的综合控制方案在生物型人工肝支持系统(BAL)中的应用;对系统中被控物理量之间的相互作用规律进行了定性分析,按照物料平衡算式使之关联匹配,经过PI调节后,根据使用经验进行离线结合在线的预测控制;实验结果表明:尽管生物反应器内存在着诸多非线性因素,且具有很强的耦合性及滞后特性,该方法仍取得了较好的控制效果,达到了BAL的使用要求。

生物型人工肝支持系统新型曝气装置的研究

生物反应器是生物型人工肝支持系统(BioartificialLiverSupportSystem,BALSS)的核心部件,肝细胞在反应器中存活,分泌出的活性物质对肝衰竭患者起到生物合成、代谢、解毒的作用。肝细胞的生长状态直接关系到BALSS的效果。向分体双循环生物反应器内通入氧气、氮气、二氧化碳,可以控制系统内溶解氧浓度(DO)值和酸碱度(pH)在一定范围之内,从而保证体外培养肝细胞能够最大程度发挥功能活性。本文所述内容是对该生物反应器曝气装置的改进,利用中空纤维膜式吸收器构建了适用于BALSS的新型曝气装置,采用人工神经网络(ANN)自适应算法,计算机根据传感器实时测量的pH与DO值,通过执行机构对气体进行调控,达到了安全、稳定、高效的目的。

一种新型生物人工肝支持系统

目的构建一套拥有独立知识产权的新型生物人工肝支持系统,用以满足生物型人工肝临床治疗的需要。方法针对肝细胞生长过程中的各种特殊环境要求,设计了以关联控制为核心的控制算法,结合PID技术、预测控制等方法,实现了对各种指标的稳定控制。实验中使用HepG2连续培养60h,用以验证生物反应器的实际效果。结果温度控制在37℃±0.2℃,溶解氧含量控制在95%±10%,酸碱度控制在(7.3±0.2)pH。细胞连续培养60h,经镜检,其效果优于对照组。结论细胞生长过程上的各项主要指标控制稳定,细胞在本系统中生长状态良好,为下一步的实验奠定了坚实的基础。

闭合型双循环生物人工肝支持系统的构建

目的 构建简便、安全和稳定的闭合型双循环生物人工肝支持系统 (closedbi -circulat ingbioartificialliversupportsystem ,CBC -BALSS)。方法 采用改良两步原位胶原酶灌注法分离猪肝细胞。利用肝细胞、细胞池和BiolivA3A生物反应器构建CBC -BALSS ,进行 8次闭合循环实验 ,监测双循环路压力 ,肝细胞密度和活率、生化全套和MEGX。结果 闭合循环过程中 ,双循环路压力于 30min后趋于平稳至 (10 5± 5 )mmHg。循环中肝细胞总数、活率和密度变化无显著性差异。细胞循环路ALT、LDH、TB、DB和ALB在各时间点间均不存在显著性差异 ;TB和DB显著性升高。结论 在闭合循环实验中 ,肝细胞活率和功能良好 ,双循环路压力平稳 ,生物膜通透性好。我们构建的CBC -BALSS安全、稳定、有效 。

生物型人工肝支持系统在治疗急性肝衰竭中的应用

体外人工肝支持系统是国外近年来发展起来为肝衰竭患者提供体外肝功能支持的装置,这一技术的出现与发展为肝衰竭的治疗开辟了新途径。生物型人工肝支持系统（Bioartificial Liver Support System．BALSS）是80年代后期出现的新技术。

非生物型人工肝支持系统治疗HBV相关慢加急性肝衰竭研究进展

慢加急性肝衰竭(ACLF)是我国最常见的肝衰竭类型之一,其中乙型肝炎病毒(HBV)是ACLF最常见的病因,在其治疗中,非生物型人工肝支持系统(NBALSS)是HBV相关ACLF(HBV-ACLF)重要治疗方式之一。本文通过对NBALSS治疗HBV-ACLF的疗效及预后进行总结,为临床上HBV-ACLF预后判断和有效治疗提供依据。

非生物型人工肝对重型肝炎支持效果对比研究

目的探讨非生物型人工肝支持系统对重型肝炎的支持疗效。方法采用非生物型人工肝治疗48例患者。观察重型肝炎的病死率、总胆红素(TIBL)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶原活动度(PTA)。结果人工肝支持后患者血清总胆红素明显下降、凝血酶原时间缩短、凝血酶原活动度显著提高。结论非生物型人工肝支持系统能明显改善重型肝炎患者的一般状态,对于降低胆红素及提高凝血酶原活动度有显著作用。

人工肝血浆置换术治疗慢性重症肝炎的临床研究

目的探讨人工肝血浆置换术(PE)治疗慢性重症肝炎的疗效。方法121例慢性重症肝炎患者在内科综合治疗基础上配合血浆置换,共183例次,观察其治疗前后的临床症状、肝功能、PT及HBV血清标志物,HBV-DNA改变情况,探讨其与预后的内在关联。结果121例慢性重型肝炎患者经血浆置换治疗后,临床症状都得到一定程度的改善,肝功能明显好转。临床好转率为64.46%(78/121),其中早期83.78%,中期46.87%,晚期6.66%,同时1次与多次人工肝治疗临床好转率比较后者明显高于前者,二者比较有较显著性差异。结论血浆置换对于慢性重型肝炎是一种安全有效的治疗方法,早期及无严重并发症的治疗疗效好。

非生物型人工肝治疗急性肝衰竭患儿的护理

儿童急性肝衰竭是慢性肝病患儿出现严重急性肝功能受损的多系统紊乱，伴或不伴与肝细胞坏死相关的脑病。儿童急性肝衰竭病因复杂、病死率高，内科治疗效果不理想。非生物型人工肝支持系统是一种能替代或模拟正常肝脏的部分或全部功能的体外装置，可以使因肝功能衰竭所产生的各种有害物质得以清除，并替代肝脏的部分代谢功能，以维持生命，为肝脏自身恢复或接受肝移植争取时间。

血浆置换治疗儿童肝衰竭16例分析

肝功能衰竭是儿科常见危重症之一，病死率高。儿童主要病因包括病毒感染、遗传代谢性疾病、药物性肝损伤、中毒、脓毒症或低氧血症等[1]。肝功能衰竭分为急性肝衰竭、亚急性肝衰竭、慢加急性（亚急性）肝衰竭和慢性肝衰竭。目前临床对肝衰竭的治疗主要包括内科综合治疗，人工肝支持治疗及肝移植[2]。在成人，人工肝支持系统已广泛应用；在儿科，近年亦不断开展并逐步发展，血浆置换（plasma exchange，PE）即为非生物型人工肝支持系统之一。本文总结分析了近年我院行PE治疗肝功能衰竭16例患儿情况，现报道如下。

非生物型人工肝对高原地区慢性重型肝炎支持效果对比分析

目的:观察非生物型人工肝支持系统血浆置换治疗高原地区慢性重型肝炎支持疗效。方法:分析2006年9月—2007年8月我科行人工肝血浆置换治疗的16例慢性重型肝炎(来自我省不同海拔高度地区2000m^3680m),共治疗38人次,平均每例患者(1~4)次。观察治疗前后肝功谷丙转氨酶(ALT)、血清总胆红素(TBIL)、血清白蛋白(ALB)、凝血酶原时间及活动度(PT、PTA),血氨(NH3)等生化指标及临床症状。结果:每次治疗后患者的谷丙转氨酶、血清总胆红素、血氨均明显下降,凝血酶原时间缩短,血清白蛋白及凝血酶原活动度显著提高,患者的临床症状有不同程度改善。结论:非生物型人工肝支持系统能有效改善高原地区慢性重型肝炎患者的临床症状及生化指标,防止因高原低氧环境导致的肝细胞坏死进一步加重,为肝细胞的再生修复及肝移植赢得了时间,是高原地区治疗重型肝炎的一种有效方法。