海洋生物抗癌肽研究进展

海洋生物抗癌肽研究进展戴秋云１）黄培堂黄翠芬（军事医学科学院生物工程研究所，北京１０００７１）近年来，由于肿瘤分子生物学及肽组合化学的迅速发展，肽及肽的衍生物在肿瘤化疗、免疫治疗研究中得到了广泛应用．然而天然的Ｌ－型肽易被胰酶水解，生物利用度低，随机...

低分子生物抗癌物质结合中药有效成分抗白血病的研究

Ｌ６１５可移植性白血病细胞经冻融，离心处理后，其上清液注入小鼠体内可诱导产生低分子生物抗癌活性物质。当其作用于Ｌ６１５白血病小鼠后，可使３３％的小鼠平均生存期由６ｄ延长到１５０ｄ，平均生命延长率达到２５２７．８％。用ＩＬ─２／ＬＡＫ细胞作用后的白血病小鼠，其平均生存期仅延长到１１ｄ。在上述基础上，分别将中药有效成份小蘖胺、黄芪多糖和当归多糖同低分子抗癌物质有机地配合作用于白血病小鼠后，有７５％的小鼠生存期达到了２７５ｄ，生命延长率提高了２０６１％。外周血及脏器组织未发现典型的白血病细胞侵润，骨髓细胞中１９号染色体上Ｂｊ白血病携带频率由对照组的４７．５％下降到０。此外，小蘖胺，黄芪多糖和当归多糖皆在不同程度上诱导小鼠脾脏细胞活化产生ＬＡＫ细胞。在体外实验中，其ＬＡＫ细胞对￣（１２５）Ｉ标记的白血病细胞的最大杀伤活性与ＩＬ－２在体外诱导产生的ＬＡＫ细胞活性相比较，可达到ＩＬ─２剂量提高２０倍时产生的杀伤效应。同时上述中药有效成分都在不同程度上使小鼠肝胆组织ＳＯＤ活性显著增强，阻遏了环磷酰胺对ＳＯＤ的抑制作用，逆转了环磷酰胺对正常脾脏免疫细胞的抑制和破坏作用。

抗癌生物活性肽作用机制的研究进展

肿瘤已成为目前影响人类预期寿命和生存质量的重大疾病之一。目前关于肿瘤的治疗主要采用手术、放疗、化疗等方法,且已取得一定疗效,但不良反应严重、易产生耐药等问题会影响其临床应用效果。生物活性肽因具有特异性高、不良反应小、抗肿瘤作用明确等优势而成为有效抗肿瘤药物。生物活性肽的抗肿瘤作用主要通过促进细胞坏死和凋亡、靶向破坏异常信号通路、抑制肿瘤血管和淋巴管形成以及诱导免疫反应等机制实现。未来进一步深入研究生物活性肽的作用机制,可以为其临床转化提供帮助。

tuftsin及其衍生物T肽的抗癌作用研究进展

tuftsin是机体脾脏产生的一段生理活性肽,其基本功能是刺激巨噬细胞和粒细胞,提高促吞噬的能力;其对肿瘤细胞并没有直接杀伤效应,但可以通过增强效应细胞的细胞毒功能杀伤肿瘤细胞,在抗感染和抗肿瘤方面具有不可替代的作用。但由于其肽链短、易被水解的特性,至今难以成药而应用于临床。tuftsin的系列衍生物以及与其他药物联用却可提高其抗癌活性,具有广阔的研究前景;尤其是衍生物T肽具有明显的抗肿瘤作用,其作用机制基本明确,可望成为新型抗肿瘤生物反应调节剂。

抗癌生物活性肽对人乳腺癌nm231细胞的增殖抑制作用

目的探讨抗癌生物活性肽(ACBP)对人乳腺癌nm231细胞的作用及其机制。方法nm231细胞经不同浓度(0.05、0.10、0.20、0.25μg/ml)ACBP作用72h,以噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖活性。以0.25μg/ml的ACBP分别作用于nm231细胞4、6、24、48、72h,行光镜和透射电镜(作用48h细胞)观察。应用DNA凝胶电泳和磷脂结合蛋白V(AnnexinV,AV)/碘化丙啶(PI)双标记染色流式细胞术等方法,观察0.25μg/ml的ACBP作用不同时间对nm231细胞凋亡发生及作用48h对细胞周期的影响。以上各项检测均设以RPMI1640培养液取代ACBP的对照组。结果浓度为0.1μg/ml的ACBP即对nm231细胞的增殖有明显抑制作用,抑制率为10.3%,抑制作用具有浓度依赖性,ACBP浓度为0.25μg/ml时抑制率达35.1%。光镜观察显示,经0.25μg/ml的ACBP作用24h,细胞出现凋亡特征;作用48h,光镜及电镜下均可见大量的典型凋亡细胞。DNA凝胶电泳显示,经0.25μg/ml的ACBP作用24h的细胞出现DNA断裂;作用48h的细胞出现典型的梯形电泳图谱。流式细胞术分析显示,ACBP作用后AV(+)/PI(-)细胞和AV(+)/PI(+)细胞比例均随培养时间延长而增大;作用48h的nm231细胞G0/1期细胞比例高于对照组(P<0.01),而细胞增殖指数低于对照组(P<0.01)。结论ACBP可抑制nm231细胞的增殖,其机制与抑制nm231细胞的DNA合成和诱导细胞凋亡相关。

抗癌生物活性肽对实验性胃癌PCNA、caspase-8基因表达的影响

目的:探讨抗癌生物活性肽作用于荷胃癌裸鼠后,对其增殖及凋亡相关基因表达变化的影响。方法:将裸鼠接种胃癌MGC-803细胞后使之致瘤。实验随机分为3组,对照组11只,脾肽实验组12只,肝肽实验组11只;分别尾静脉注射生理盐水0.4mL、脾肽0.4mL(0.15mg/mL)、肝肽0.4mL(0.05mg/mL)。连续处理35d,停药4d后处死裸鼠,取肿瘤,以4%多聚甲醛固定,常规石蜡包埋,4μm切片。应用免疫组化SABC法检测PCNA、caspase-8蛋白在实验组与对照组中的表达情况。结果:PCNA蛋白在对照组(NS组)肿瘤中阳性表达较强,在P组、G组裸鼠肿瘤中PCNA蛋白的表达均比对照组的表达弱,且有显著性差异(P<0.01);caspas-8蛋白在对照组(NS组)肿瘤中阳性表达较弱,P、G组裸鼠肿瘤中caspas-8蛋白的表达均比对照组表达强,且有显著性差异(P<0.01)。结论:抗癌生物活性肽能降低胃癌移植瘤细胞的增殖活性,并能促进其凋亡。

抗癌生物活性肽对人胃癌BGC-823细胞周期相关蛋白CDC2、CDK4表达的影响

目的:探讨抗癌生物活性肽对人胃癌细胞周期相关蛋白CDC2、CDK4的影响及其作用机制。方法:实验分为活性肽组及对照组,将不同浓度的抗癌生物活性肽按不同时间作用于培养的人胃癌细胞株(BGC-823),应用MTT法检测增殖抑制率。建立荷胃癌裸鼠模型,给予生理盐水作为阴性对照组,应用免疫组化技术对抗癌生物活性肽作用前后的胃癌裸鼠肿瘤中CDK4、CDC2的表达进行检测。结果:不同浓度的抗癌生物活性肽对胃癌细胞均有增殖抑制作用;抗癌活性肽S-2作用后人胃癌组织中的CDK4表达明显低于对照组(P<0.01),而CDC2表达高于对照组(P<0.01)。结论:抗癌生物活性肽具有抗胃癌细胞增殖作用,其抗肿瘤作用机制可能是通过下调CDK4和上调CDC2的表达实现。

抗癌生物活性肽对实验性裸鼠肿瘤组织中p53和Bcl-2表达的影响

目的探讨抗癌生物活性肽(ACBP)作用于荷胃癌裸鼠后对肿瘤中p53和Bcl-2蛋白表达的影响,探讨ACBP可能的作用机制。方法成功建立荷胃癌裸鼠模型后将鼠随机分为2组,各组10只。对照组给予生理盐水;实验组腹腔注射活性肽0.4 mL(50 mg/L)。连续处理35 d,停药4 d后处死裸鼠,取肿瘤,应用免疫组化链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物法检测突变型p53蛋白及Bcl-2蛋白的表达情况。结果 p53和Bcl-2蛋白在对照组肿瘤中阳性表达较强,在活性肽组中的表达均比对照组的表达弱,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 ACBP对荷瘤裸鼠肿瘤生长有明显的抑制作用,可能是通过影响p53和Bcl-2的表达实现的。

抗癌生物活性肽对BGC-823细胞基因表达的影响

目的:利用基因芯片技术分析一种新型抗癌生物制剂-抗癌生物活性肽对人胃癌BGC-823细胞的基因表达谱调控的影响,并对部分差异表达基因进行RT-PCR检测,从而验证芯片的有效性。方法:订制表达谱芯片,分别将400条和648条人类基因的PCR产物点样于特殊处理后的玻璃片上制备基因表达谱芯片。以加入不同浓度抗癌生物活性肽及处理不同时间的BGC-823细胞为实验组,以生理盐水处理的BGC-823细胞作为对照组,当确定最佳作用时间及抗癌生物活性肽有效作用浓度后,分别提取实验组与对照组细胞的总RNA,反转录成cDNA,以两种荧光素Cy5和Cy3标记后作为探针,与制备好的表达谱芯片进行杂交,以生物信息学方法进行数据的处理和分析,并将其中的差异表达基因p15和HSP701B进行RT-PCR的验证。结果:两张芯片上差异表达的基因共47个,其中上调27个,下调20个。这些基因按照功能分类涉及细胞周期、代谢酶、免疫相关、细胞凋亡、抑癌基因等类别,包括HSP701B、HSP75、HSP90、磷脂酶D2(PLD2)、凋亡抑制基因(IEX-1L)、人类杆状病毒IAP重复序列3、E2泛素耦联酶Ubch5c、人类缺氧诱导因子1α亚基、γ-干扰素、TNF诱导因子、人类黑色素瘤抗原p15基因等。同时RT-pCR结果验证了芯片的检测的有效性。结论:抗癌生物活性肽具有调控人胃癌BGC-823细胞基因表达的作用,其中对抑癌基因、热休克蛋白家族基因等有较明显的影响;基因芯片可以为阐明抗癌药物的作用机制提供有力的分子基础。

关注肿瘤患者的康复 姬松茸多糖体:杰出的抗癌生物制剂

多糖体不仅能够有效预防癌肿瘤,更可帮助癌症病患的康复,同时能缓解放化疗所带来的副作用,甚至还可以用来治疗癌症,使病患无需再忍受具有伤害性的疗程。—陈昭妃(营养免疫学创立者)

中国抗癌协会肿瘤生物治疗专业研究会简介

中国抗癌协会肿瘤生物治疗专业研究会(简称研究会)于1994年1月开始筹备，于同年7月2日在北京由中国抗癌协会副理事长徐光炜教授代表中国抗癌协会宣布批准成立并决定召开了第一届委员会会议，选举张友会为主任委员，唐佩弦、顾建人、董志伟、毛慧生为副主任委员，钱振超、樊代明、田志刚、李殿俊、叶胜龙、曹雪涛为常委、秘书由林本耀担任，委员包括徐光炜、田竞生、巴德年、吴皇、

BC_(369)抗肿瘤作用的初步研究

BC_(369)是一种生物物质。本文采用多种小鼠移植性肿瘤研究了BC_(369)的抗肿瘤作用。通过多项指标的体内实验证实BC_(369)经腹腔或皮下给药,对Ehrlich腹水癌、小鼠原发性肝癌、S_(180)肉瘤、Lewis肺癌、L_(1210)淋巴细胞白血病、LA-795肺腺癌、MA-737乳腺癌均有不同程度的抑制生长和杀伤作用,其生存时间、瘤重生长抑制率、肿瘤再生长延缓均优于生理盐水对照组和环磷酰胺组。作者认为BC_(369)是一种新型的、有一定疗效的生物抗癌剂,有进一步研究的价值。

黄秋葵多糖组分对人体肿瘤细胞增殖的抑制作用

近年来多糖的抗肿瘤生物活性日益受到关注,本研究探讨黄秋葵多糖对人体卵巢癌细胞(OVCAR-3)、乳腺癌细胞(MCF-7)、宫颈癌细胞(Hela)、胃腺癌细胞(MCG-803)增殖的抑制作用。通过水提醇沉提取黄秋葵粗多糖(raw polysaccharide,RPS),经DEAE-纤维素阴离子交换层析柱分离得到3种多糖洗脱组分E1、E2和E3;不同质量浓度黄秋葵多糖作用于人体肿瘤细胞72h,采用MTT法对其抗癌活性进行分析。结果显示:RPS和E1组分可抑制OVCAR-3细胞的生长,随质量浓度的增加细胞存活率降低,呈剂量依赖关系,最低可分别降至72.30%和52.31%;E3组分可抑制MCF-7、Hela和MCG-803细胞的生长,抑制作用呈剂量依赖关系,细胞的存活率最低可分别降至63.90%、63.51%和67.71%。故而黄秋葵多糖组分可抑制多种肿瘤细胞生长,有开发成抗癌功能食品的前景。

在Co^(2+)注入修饰电极上米托蒽醌的电化学行为及其应用

米托蒽醌 (MX)在 0 .0 0 5mol·L-1 Tris 0 .0 5mol·L-1 NaCl ( pH7.1)缓冲溶液中 ,在Co离子注入玻碳修饰电极 (Co/GCE)上 ,有一灵敏的伏安还原峰 ,峰电位为 - 0 .6 8V ,峰电流与MX的浓度在 1.8× 10 -7～ 9.0× 10 -6mol·L-1 间呈线性关系 ,检出限为 9 0× 10 -8mol·L-1 .将该法用于病人尿样的测定 ,回收率为 94 6 %～ 10 5 7% .用线性扫描和循环伏安法研究该体系的电化学行为和电催化 .实验表明 ,体系为不可逆过程 .Co/GCE上的电流比GC电极的大 ,扫速对催化效率的影响实验证明 ,存在着催化作用 .X射线光电子能谱 (XPS)和俄歇电子能谱 (AES)实验表明 ,Co确实被注入在GC表面 ,注入的Co催化了MX的还原 .

BC_(369)对白血病造血祖细胞的体外药敏实验研究

目的研究ＢＣ３６９直接抑制或杀伤白血病造血祖细胞的作用。方法采用白血病造血祖细胞体外培养，分别设立ＢＣ３６９实验组和生理盐水对照组，然后同时放入ＣＯ２孵育箱中培养，６天后对比计算ＢＣ３６９的杀伤率。结果急性淋巴细胞白血病平均杀伤率为４９．３５％（Ｐ＜０．０１）；急性粒细胞白血病平均杀伤率为５７．４３％（Ｐ＜０．０１）；慢性粒细胞白血病平均杀伤率为４９．４８％（Ｐ＜０．０１）；多发性骨髓瘤杀伤率为１９．０３％（Ｐ＞０．０５）。结论ＢＣ３６９对１４例白血病患者骨髓造血祖细胞集落形成单位（Ｌ－ＣＦＵ）进行体外药敏实验；ＢＣ３６９对白血病细胞具有直接杀伤作用，其平均杀伤率为５１．２６％（Ｐ＜０．０１）。