克拉霉素的高效液相色谱法与微生物效价测定法分析比较

目的 :比较克拉霉素含量测定的HPLC法和微生物效价测定法两种方法的平行性。方法 :采用HPLC法和微生物法测定 3批样品的标示量。结果 :HPLC法测定的 3批样品的标示量为 97.98% ,99.83 % ,10 1.5 % ,微生物效价测定法为 97.3 % ,97.6% ,98.5 %。结论 :两种结果经t检验分析 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。

HPLC法替代生物效价测定富马酸阿奇霉素的含量

目的：富马酸阿奇霉素现行标准采用生物效价法测定含量,建立HPLC法测定其含量同时进行方法学验证。方法：采用资生堂C18色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）,流动相为0.002mol/L磷酸氢二铵（用氨水调节pH为10.0）-乙腈-异丙醇（15∶60∶25）,检测波长210nm,柱温30℃。结果：在该色谱条件下,阿奇霉素主峰与富马酸峰分离良好,阿奇霉素在浓度为0.3048~0.7112mg/m L范围内线性关系良好,回归方程为Y=1000000X-483.4,r=0.999,精密度试验RSD为0.14%,平均回收率为99.5%（RSD=0.5%）。结论：本法灵敏,简便,准确,重复性好,可作为富马酸阿奇霉素含量的测定方法替代生物效价测定法。

活血通脉胶囊抗凝血酶活性生物效价测定法的建立

目的建立活血通脉胶囊抗凝血酶活性生物效价测定方法,用于评价和控制其质量。方法分别对Markwardt法、纤维蛋白原平板法(沉淀法)测定水蛭和活血通脉胶囊的生物效价进行比较研究;选择琼脂糖-纤维蛋白原平板法(沉淀法)作为活血通脉胶囊生物效价测定方法,考察试验系,并进行了方法学验证。结果琼脂糖-纤维蛋白原平板法(沉淀法)测定水蛭和活血通脉胶囊抗凝血酶生物效价的中间精密度RSD分别为3.5%、5.2%,优于Markwardt法(RSD分别为15.6%、12.9%)。本法的线性范围为5 BP^20 BP(R2=0.994),回收率为98.26%,RSD 2.3%(n=6),中间精密度RSD 3.2%,重复性RSD 4.7%。结论琼脂糖-纤维蛋白原平板法(沉淀法)可用于活血通脉胶囊中抗凝血酶活性生物效价的测定,以评价和控制其生物质量。

高效液相色谱法测定缩宫素注射剂含量及其与生物效价测定法比较和应用

目的：针对缩宫素注射液现行标准中采用生物效价测定法进行含量控制的情况,建立缩宫素注射剂含量的HPLC测定法并进行方法学验证,通过对8个生产企业的414批缩宫素注射剂样品含量的测定,了解HPLC法与生物效价测定法结果的相关性,并对样品长期稳定性进行考察。方法：采用Waters XBridge C18（250 mm×4.6 mm,5!m）色谱柱,以0.1 mol·L-1磷酸盐缓冲液作为流动相A,以水-乙腈（1∶1）作为流动相B,梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1,检测波长220 nm,柱温40℃。结果：在本文色谱条件下,缩宫素主峰和杂质峰分离良好;缩宫素浓度在0.36-23.04 IU·m L-1范围内与峰面积呈良好线性关系,r=0.999 9;平均回收率为99.1%。414批缩宫素注射剂中,缩宫素含量为54.1%-129.5%;HPLC含量测定结果与生物效价测定结果相关性良好,Pearson相关系数为0.683;储存2年后,8批缩宫素注射剂样品HPLC平均含量下降4.5%。结论：该法专属性强,灵敏、准确,可作为缩宫素注射剂的质量控制方法以替代生物效价测定法。现行标准中生物效价测定法,存在动物个体差异和人为测定误差,难以有效控制药品质量,有必要将生物效价测定法修订为HPLC方法,以稳定控制药品质量。缩宫素注射剂储存2年后,主药可能发生部分降解导致含量降低,需注意储存期。

微生物浊度法测定硫酸庆大霉素颗粒的效价

目的建立硫酸庆大霉素颗粒效价的测定方法。方法采用比浊法和管碟法对硫酸庆大霉素颗粒的效价测定进行比较,并对比浊法进行方法学验证。结果用比浊法测定硫酸庆大霉素颗粒效价,浓度的对数与吸收度成良好的线性关系,回收率良好;用比浊法测定与管碟法测定的结果无明显差异,方法学验证说明浊度法测定可行。结论微生物浊度法测定硫酸庆大霉素颗粒效价的方法可行,且快速、简便。

微生物比浊法测定硫酸链霉素的效价

目的建立测定硫酸链霉素效价的方法。方法采用比浊法,并与管碟法比较。结果比浊法线性范围为0.5-8.0U.ml-1,线性方程：A=0.3908-0.3970 logC（r=0.998 9）,平均回收率为97.11%（n=4）;RSD=1.43%（n=15）。结论比浊法与管碟法的测定结果无显著性差异,可以作为硫酸链霉素效价测定方法之一,且更快捷、方便。

垂体后叶注射液含量HPLC法和生物效价测定法等效性研究

目的:建立HPLC法测定垂体后叶注射液中赖氨酸升压素及缩宫素的含量,并研究《中华人民共和国药典》2015年版生物效价测定法与本文的HPLC测定法的相关性与等效性。方法:采用C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以磷酸盐缓冲液(pH 6.0)为流动相A,水-乙腈(1∶1)为流动相B,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),检测波长220 nm,柱温40℃。结果:在上述色谱条件下,赖氨酸升压素峰与缩宫素峰以及相邻杂质峰之间分离度符合要求;赖氨酸升压素与缩宫素浓度分别在0.42～13.33 IU·mL^(-1)和0.33～21.00 IU·m L^(-1)范围内线性关系良好,r=0.999 9;平均回收率(n=9)分别为100.5%和99.7%。6批样品中上述2个成分含量范围分别为6.10～6.40 IU·mL^(-1)和5.63～5.93 IU·mL^(-1)。用SPSS软件进行相关性分析,结果表明,生物效价法与HPLC法含量测定呈正相关,Pearson系数分别为0.897和0.947。SAS软件等效性分析表明:升压素生物效价法与HPLC法的测定结果具有等效性,而缩宫素的两法测定结果不具有等效性。结论:本法专属性良好,准确度高,重复性好,与生物效价测定法相关性较好,可用于垂体后叶注射液中赖氨酸升压素含量测定。

微生物浊度法测定吉他霉素的效价

目的:建立测定吉他霉素效价的方法。方法:采用比浊法和管碟法对吉他霉素的效价进行测定并比较。结果:吉他霉素浓度在0.8～2.4 u·mL^(-1)的范围内,浓度的对数与吸收度成良好的线性关系,回归方程:A=608.1-725.7 lg C(r=0.9995),平均回收率为100.9%。结论:微生物浊度法测定吉他霉素的效价简便、精确、快速。

基于生物抑菌活性的金银花颗粒效价测定方法

目的:探讨符合中医药特点的中药固体制剂质量控制与评价的化学-生物联合评价模式。方法:以金银花颗粒为模型药,采用菌敏试验(最小抑菌浓度和最小杀菌浓度的测定)考察金银花提取液对4种标准菌株(金黄色葡萄球菌、变形链球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌)的抑菌性。建立敏感菌抑菌圈直径与不同浓度金银花提取液之间的相关曲线,计算不同厂家金银花颗粒的生物效价,并将测定结果与HPLC法测定(以绿原酸计)的结果相比较。结果:抑菌实验表明,金银花对金黄色葡萄球菌、变形链球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌敏感,其中金黄色葡萄球菌的抑菌圈边缘清晰、敏感度较高。当金银花的质量浓度在0.0142~0.0680 g·ml^(-1)范围内时,对数浓度与反应效应呈线性关系,且相关性好(r=0.990 9)。结论:以生物活性为导向的效价评价方法有望成为评价中药固体制剂有效成分含量的手段之一,可配合传统检验方法对中药材及其制剂进行质量监控。

生物制品生物活性/效价测定方法验证指导原则浅析

《中国药典》2020年版三部“生物制品生物活性/效价测定方法验证指导原则”(通则9401)是国内首个适用于生物制品生物活性/效价测定方法验证的指导原则,弥补了国内缺少针对生物活性方法验证指导原则的空白。为正确理解和执行该指导原则,推动国内生物活性/效价测定方法验证工作的规范化,本文从该指导原则的新增背景、起草过程、国内外药典比较和主要内容解读等几方面进行了阐述,并对未来该通则内容的完善进行了初步展望,旨在为广大从业人员提供指导性建议及参考。

比浊法测定硫酸卡那霉素注射液的效价

目的 建立测定硫酸卡那霉素效价的方法。方法 采用比浊法,并与管碟法相比较。结果 比浊法线性范围为2～1 0U·ml-1 ,线性方程:A =1 .1 0 4 0 - 1 .2 6 5 9logC(r=0 .992 5 ) ;平均回收率为97.1 1 %(n =4 )。结论 比浊法与管碟法的测定结果无显著性差异,可作为硫酸卡那霉素的效价测定方法之一,且更快捷、方便。

复方卡那霉素可溶性粉组分含量的测定

通过实验筛选,采用分光光度法测定复方卡那霉素可性粉盐酸多西环素含量,采用微生物效价测定法测定复方卡那霉素可溶性粉卡那霉素的含量,回收率分别为98.3%和98.4%,相关系数达到0.9993。方法简便,结果准确可靠。

肝素结合力法测定硫酸鱼精蛋白生物效价的可行性研究

目的:考察肝素结合力法是否可用于测定硫酸鱼精蛋白生物效价。方法:考察肝素结合力法测定硫酸鱼精蛋白生物效价的精密度、准确度、耐用性,以及肝素结合力法与血凝法的一致性。结果:肝素结合力法测定硫酸鱼精蛋白效价的精密度及准确度均较高:重复性为1.2%,中间精密度为1.8%,加样回收率为99.1%。2种方法测定的硫酸鱼精蛋白效价结果无显著性差异(p>0.05),且具有显著相关性(p<0.000 1)。结论:肝素结合力法可用于测定硫酸鱼精蛋白生物效价,与血凝法相比具有更强的客观性和简便性,更高的精密度和准确度,因此可以成为现有血凝法的替代方法。

RFP乙基纤维素微球在小鼠肺组织的靶向分布

以有机相分散、溶媒扩散二步法制备了RFP乙基纤维素微球,粒径范围2.5～12.5 m,其中粒径2.5～5 m约占63%。采用微生物效价测定法研究了RFP乙基纤维素微球静脉给药后RFP在小鼠肺组织的分布,且与游离RFP在小鼠体内组织分布进行了比较。结果表明:小鼠单剂量静脉注射10 mg/Kg游离的或乙基纤维素微球RFP,测定0.5 h、1 h、3 h、7 h、12 h、24 h、48 h、72 h、120 h、168 h共10个时间点肺组织中药物浓度, 游离RFP给药组在1 h达最高峰(6.13 g/g ),随后平缓下降,24 h略有回升,48 h已降至3.09 g/g ,120 h游离RFP给药组已不能检出RFP。RFP微球给药组在0.5 h即接近高峰,7 h、48 h分别有两个最低点,至72 h出现最高峰8.875 g/g,168 h RFP浓度仍高达5.44 g/g。RFP微球给药组各个时间点在肺脏的RFP浓度均高于游离RFP给药组,平均约为2倍以上。由于在12 h出现一个小高峰,72 h出现一个大高峰,使肺脏的药物浓度长时间保持较高水平,直到168 h RFP的浓度仍相当于游离给药组的最高浓度。RFP微球明显提高了肺脏中的药物分布,并显著延缓了药物代谢,说明RFP微球具有长效、靶向的双重作用。

強心药紅花夹竹桃的使用經驗

紅花夹竹桃系夾竹桃科植物,其叶似竹,开紅花似桃,向供观赏之用。此植物虽早被發現有强心作用,但由于誤认毒性反应大,未被用于临床。我院通过整風后,解放思想,破除迷信,經內科和药剂室的密切合作,將紅花夾竹桃叶制成片剂和注射剂,試用于心力衰竭患者,截至目前止已达数百余例,收到了显著疗效。且对洋地黄效果不好的心臟病如併冠狀动脉机能不全或高輸出性心力衰竭,亦有疗效。注射剂效力显得更快。有数例严重心臟病患者,入院时經注射夾竹桃素液二次(上下午各一針),症狀即获得显著改善,次日尿量多,下肢浮肿消退,睡眠食慾均佳,心力衰竭已能基本控制,疗效較洋地黄出現为快。根据我院內科試用数百例所得印象,認为蓄积作用很少,毒性反应亦較洋地黄为少,因此值得推荐試用。