小型化生物样品前处理装置的开发及性能研究

为实现生物样品的前处理,设计开发了一台对生物样品进行分离得到小分子、蛋白质、DNA和RNA的自动化和一体化装置。细胞处理单元通过微滤膜进行细胞的清洗和裂解,大分子与小分子分离单元通过超滤膜进行生物大分子和小分子的分离,蛋白与核酸分离单元通过自由流电泳芯片进行蛋白质和和酸的分离,DNA与RNA分离单元通过硼基柱进行DNA和RNA的分离,最后完成电路板和PC上位机软件的设计加工。装置集成后对SH-SY5Y细胞和Jurkat细胞进行生物样品前处理,结果显示生物样品前处理装置能够完成小分子、蛋白质、DNA和RNA的分离。

生物样品前处理的研究进展

合适的生物样品前处理技术可以真实地反映被测组分在机体内的作用规律,将为药物在体内的代谢过程、药效物质基础、作用机制、药理、毒理学等研究提供实验依据。生物样品包括血样、尿液、头发、泪液等,样品处理方法也很多,有直接的沉淀蛋白、液液萃取、固相萃取等,可以单独使用,也可以结合起来使用。

生物样品中天麻素测定方法及药代动力学研究进展

天麻素是从兰科植物天麻的块茎中提取分离而得,现已人工合成。天麻素药理作用广泛,如镇痛、镇静安眠、促智、保护神经元、降血压、抗惊厥、抗癫痫、抗氧化、抗衰老、改善微循环等,且安全、无明显毒副作用,其相关制剂在临床上亦被广泛用于心脑血管及神经精神系统疾病,如头痛、冠心病、高血压、后循环缺血性眩晕、突发性耳聋、癫痫、神经衰弱及脑卒中等。考虑到天麻素临床治疗上述疾病常与其他药物或治疗方法联用,故其体内过程及其药代动力学性质不容忽视。目前,有关天麻素综述多集中于药理作用和临床应用方面,而其药代动力学综述鲜见报道。随着天麻素药代动力学研究日渐深入,本研究将从其样品前处理、测定方法、药物ADME过程及影响体内过程的因素等方面较系统全面地对天麻素近年来的药代动力学研究作一综述,以期对天麻素制剂工艺及临床联合配伍应用有所裨益。

微生物代谢组学的样品前处理

微生物代谢组学是指全面分析(定性和定量)细胞生长或生产周期某一时刻细胞内和细胞周围的所有低分子量代谢物。微生物代谢组学研究需要可靠和重现地分析细胞内较宽动力学浓度范围(nmol^mmol)、化学功能各异的代谢产物,因此,需要对从生物量培养、灭活和代谢产物的提取到代谢物的定量分析这整个实验过程提出耐用、可重现和可靠的实验方案。本文介绍了灭活过程中细胞内代谢产物泄漏的处理方法,较为详细地论述了通过灭活草案捕获代谢反应活性方法和代谢物提取方法的优化,并对微生物代谢组学样品前处理的目前发展趋势提出初步见解。

生物质谱分析法在脂质组学的应用

脂质与许多慢性病(如糖尿病、高血压)和精神系统疾病(如阿尔茨海默病)等有关。脂质组学是以现代生物技术为手段,对生物体中的全脂质进行定性和定量的一门新兴学科。目前,生物质谱分析法是对脂质谱进行分析和定量的最有效方法,国内对脂质组学的系统研究还比较匮乏。综述脂质组学的概念与分类,探究不同的生物样品前处理方法,系统介绍近几年国际上生物质谱分析法在脂质组学的应用,并对脂质组学的发展趋势进行展望。

固相萃取结合HPLC-荧光法测定人血浆中维生素B_2含量

目的:建立固相萃取结合HPLC-荧光法测定人血浆中维生素B2含量的方法。方法:采用SiroccoTM96孔蛋白沉淀板和正压固相萃取装置处理样品,采用SymmetryshieldTMRP-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-5 mmol.L-1乙酸铵(35∶65),流速为0.6 mL.min-1,荧光检测器检测(激发波长:450 nm,发射波长:520 nm)。结果:维生素B2线性范围为0.2～10 ng.mL-1(r=0.9937)。定量下限为0.17 ng.mL1,日内精密度(RSD)为2.0%～4.8%,日间精密度(RSD)为3.8%,方法回收率为101.5%～116.0%(n=3),提取回收率为91.8%～115.1%。结论:所建方法采用96孔蛋白沉淀装置自动处理样品,高效液相色谱-荧光法测定,可用于临床血浆样品中维生素B2含量的测定。