生物水凝胶激光加工工艺及体外生物相容性研究

针对生物水凝胶增材制造无法实现精细结构打印的问题,采用激光加工对SA水凝胶和GelMA水凝胶进行实验,通过激光切割、激光雕刻等探究了激光加工生物水凝胶的机制及各参数对激光加工效果的影响,通过细胞增殖实验分析HUVECs细胞在激光加工的水凝胶上的生长情况。实验表明,激光功率、进给速度等参数对于激光加工水凝胶的深度和表面质量有较大影响,细胞能够在激光加工的水凝胶上正常增殖,这可为生物医学相关应用提供有益的指导。

趋磁细菌AMB-1对小鼠的生物相容性探究

目的在体外和体内条件下探究趋磁细菌AMB-1对BALB/c小鼠的生物相容性。方法透射电镜观察AMB-1形貌特征;显微镜拍摄AMB-1在血清中的运动,Image J计算运动速度;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)检测AMB-1对小鼠乳腺癌细胞4T1和成纤维细胞L929细胞毒性;流式细胞术评价AMB-1对BALB/c小鼠骨髓来源树突细胞成熟影响;改良寇氏法计算出AMB-1对BALB/c小鼠的半数致死剂量;普鲁士蓝染色BALB/c小鼠心、肝、脾、肺、肾脏器观察AMB-1在小鼠体内的分布情况;流式细胞术检测AMB-1对BALB/c小鼠脾脏树突细胞的影响;检测小鼠BALB/c血生化指标评估其安全性;苏木精-伊红染色BALB/c小鼠心、肝、脾、肺、肾脏器,观察其组织形态变化。结果37℃条件下,AMB-1在血清中可保持运动至少120 min;AMB-1菌量超过3.3×10^(6)个时,对小鼠乳腺癌细胞4T1和成纤维细胞L929具有毒性,随菌量增加,毒性越大;AMB-1可促进骨髓来源树突细胞CD86^(+)、CD80^(+)双阳细胞的比例增大。AMB-1对BALB/c小鼠半数致死剂量为2.59×10^(10)个。AMB-1对小鼠脾脏树突细胞成熟的影响随着时间延长逐渐减弱;血生化指标在正常范围内;小鼠主要脏器无明显组织形态学变化。结论趋磁细菌AMB-1具有良好生物相容性,在体内不会引发严重免疫炎症等不良反应,具有体内应用潜能。

溶剂纯化改善聚苯胺纳米材料生物相容性的研究

目的考察不同有机溶剂纯化对聚苯胺(polyaniline,PANI)纳米材料生物相容性的影响,为开发新型高分子医用材料奠定基础。方法分别利用二甲基甲酰胺(N,N-dimethylformamide,DMF)和二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)对化学氧化法合成的PANI纳米线进行纯化处理,比较纯化前后材料的微观形态变化;将纯化前后的PANI材料配制成100%、50%、25%、10%、5%和1%的浸提液,以BV2细胞为研究对象,采用CCK-8法测定各浸提液组的细胞存活率;将纯化前后的PANI材料配制成100、80、64、51和41 mg·mL^(-1)的混悬液,通过灌胃给药考察材料对小鼠口服急性毒性及对肝肾的损伤。结果所得材料为直径约20 nm的PANI纳米线,经过纯化后其形貌未发生明显改变。未经纯化的100%PANI浸提液具有很强的细胞毒性,但是随着浓度的降低,其毒性逐渐减弱。经DMF和DMSO纯化后,细胞在其浸提液中的存活率均高于同浓度下未纯化材料(P均<0.01)。PANI材料用DMSO纯化后给药,各组小鼠的体质量增长率高于未纯化材料(P<0.05或P<0.01),其最大耐受量(MTD)>3000 mg·kg^(-1)。解剖后,各组小鼠肾脏无明显变化,但是肝细胞受到不同程度的损伤,材料经纯化后的损伤效应低于未纯化材料。结论溶剂处理是一种简便可行的PANI纳米材料纯化策略,可在提高材料生物相容性的同时维持其形貌不变。

人工气管材料体外细胞毒性和生物相容性研究

目的 :对自行研制的人工气管材料进行体外细胞毒性和生物相容性研究 ,以便为该植入材料应用于临床提供实验依据。方法 :参照 ISO10 993- 1:1992医疗器械生物学评价标准和要求 ,对人工气管材料进行了体外细胞与材料共培养试验、细胞毒性试验、溶血试验、急性全身毒性试验、致敏和热源试验。 结果 :(1)人工气管材料表面的细胞黏附生长良好 ,该材料对体外培养的细胞形态不构成损害 ,对细胞的生长和增殖均无明显抑制作用 ,细胞增殖指数和增殖指数百分率与空白对照组比较无显著性差异 (P>0 .0 5 ) ,而与阳性参照材料组比较差异具有显著性 (P<0 .0 1) ;(2 )溶血率均低于 5 %的国家标准 ,在体外不引起溶血反应 ;(3)该组分材料也无急性全身毒性反应、致敏和热源作用。结论 :该人工气管材料无细胞毒性和热源作用 ,不引起溶血反应和急性全身毒性反应 ,对细胞形态、生长和增殖不构成损害 ,具有良好的生物相容性。

多西环素纳米脂质体缓释凝胶生物相容性及细胞毒性

目的评价自制多西环素纳米脂质体缓释凝胶的生物相容性,及对体外培养小鼠成纤维细胞的毒性。方法选取体外培养的小鼠成纤维细胞L-929,采用琼脂覆盖试验,根据倒置显微镜下观察和计算的培养不同时间点L-929细胞的平均褪色指数和溶解指数,评价样品的细胞毒性分级情况。以最大剂量法,于白色豚鼠背部对称部位分别进行注射诱导和敷贴激发致敏,观察激发后48h内皮肤红斑和水肿反应程度。SD大鼠用20%样品水溶液连续灌胃7d,观察临床症状并计算食物利用率。结果L-929细胞环素纳米脂质体缓释凝胶培养不同时间点的细胞毒性分级为1(阴性对照为0)。致敏试验显示,48h内白色豚鼠背部皮肤无明显红斑和水肿反应。SD大鼠经样品灌胃7d后,无毒性反应表现;与等量蒸馏水灌胃的对照组比较,体质量和食物利用率无明显差异。结论多西环素纳米脂质体缓释凝胶无潜在细胞毒性及致敏作用,是一生物相容性良好的牙周缓释制剂。

纳米羟基磷灰石根管充填材料的生物相容性及细胞毒性实验

背景:传统的根管充填材料主要有氧化锌类、树脂类、磷灰石类和氢氧化钙类等,它们分别存在组织刺激性强、成形困难、根管封闭性较差及易降解等缺点。目的:测试牙科纳米羟基磷灰石根充材料的细胞毒性和细胞增殖性,评价其作为新型根充材料的可行性。设计、时间及地点:细胞毒理学体外对比观察,于2008-01/03在湖州师范学院细胞工程研究所完成。材料:采用DMEM培养液配制80,40g/L纳米羟基磷灰石根充糊剂浸提液。方法:体外培养成骨细胞,培养至70%～80%贴壁、生长良好,然后分为4组:80,40g/L浸提液组在培养基中添加80,40g/L的纳米羟基磷灰石根充糊剂浸提液,阳性对照组添加60g/L根管充填剂(充填用复方麝香草酚散甲醛甲酚复合制剂)糊剂浸提液,以无添加物的浸提液为阴性对照组。4组均置于37℃、体积分数为0.05的CO2细胞培养箱中培养。主要观察指标:倒置相差显微镜观察各组细胞形态变化和生长状况;培养后1,3,5,7dMTT法测试各组细胞吸光度,并计算细胞增殖度,评价细胞毒性。结果:80,40g/L浸提液组的A值比较差异无显著性意义(P>0.05),随培养时间延长,A值都逐渐增高,2组各时间点A值与阴性对照组比较差异均无显著性意义(P>0.05);阳性对照组各时间点A值均低于其他3组(P<0.05)。80,40g/L浸提液组的细胞增殖都与阴性对照组走势相似,与阳性对照组差别明显。纳米羟基磷灰石根充材料细胞毒性分级与阴性对照同为0～1级,阳性对照毒级为4级。结论:纳米羟基磷灰石根充材料体外细胞毒性实验阴性,有很好的安全性和良好的生物相容性,将可能取代传统的根管充填剂糊剂,作为根充材料具有可行性。

猪脱细胞软骨基质生物相容性及细胞毒性评价系统的建立

背景:相对于其他用于支架材料的高分子化合物,脱软骨细胞基质能够模拟出更接近原生理状态下的细胞外环境,由其制备的椎间盘支架弹性模量也更加接近软骨组织。目的:制备脱细胞软骨基质,并从细胞和活体两方面评价其生物相容性。方法:将猪软骨粉碎后,经胰酶、核酶及TritonX-100处理得到脱细胞软骨基质。(1)细胞毒性实验:将脱细胞基质溶于醋酸,制备成脱细胞基质膜。将SD大鼠腰椎终板软骨干细胞接种于脱细胞基质膜上,培养1-5 d,采用CCK-8检测软骨干细胞在基质膜上的增殖情况,评价细胞毒性分级;(2)动物体内毒性实验:将含有脱细胞基质的醋酸(实验组)与醋酸(对照组)分别注射至SD大鼠背部皮下,形成皮丘,注射后36 h内观察大鼠体温与皮丘直径变化。结果与结论:(1)细胞毒性实验:倒置显微镜下可见,腰椎终板软骨干细胞接种于脱细胞基质膜2 d即贴壁,呈梭形生长,接种5 d内的细胞相对增殖率均在80%以上,细胞毒性分级为0至1级;(2)动物体内毒性实验:注射后即刻,两组大鼠背部均可见皮丘形成,注射36 h内皮丘内溶液被完全吸收,并且对照组吸收速度快于实验组,两组皮丘边缘均无红肿现象;注射36 h内,实验组与对照组大鼠体温均未超过37.5℃;(3)结果表明:脱细胞软骨基质具有很好的生物相容性,符合生物支架选材标准。

TiO_2纳米材料对前成骨细胞MC3T3-E1增殖分化及免疫毒性影响

研究不同晶型、不同浓度纳米TiO_2对成骨细胞MC3T3-E1的增殖和分化能力及免疫毒性的影响。采用CCK-8法检测发现,锐钛矿和金红石在不同浓度下(20、50、100μg/mL)均抑制了细胞的增殖能力。相比于金红石材料,锐钛矿材料对细胞增殖有一定的抑制效果,但是不存在显著性差异。共培养7d和14d时,锐钛矿和金红石均导致细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)含量显著下降。酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法测定细胞培养上清液中白介素1(interleukin-1,IL-1)、白介素6(interleukin-6,IL-6)水平,发现纳米TiO_2刺激细胞分泌IL-1,同时大量分泌IL-6。并且,在培养24h和48h时,20μg/mL的锐钛矿相比于金红石纳米TiO_2,引起细胞分泌IL-6的水平更高。因此,纳米TiO_2能够影响MC3T3-E1细胞的增殖、分化能力,并引起免疫毒性。

T-1型脱细胞异体组织补片生物相容性评价研究

T-1型脱细胞异体组织补片主要用于口腔软组织损伤、疝气等修补的新型生物材料。为了确保产品在临床使用的安全有效性,我们对其进行了细胞毒性、皮肤致敏、口腔粘膜刺激以及动物体内的肌肉植入等一系列生物相容性评价试验。结果表明该补片具有细胞毒性小、无致敏、无口腔粘膜刺激反应,具有良好的生物相容性以及较好的体内组织化作用。

壳聚糖支架与神经干细胞生物相容性的研究

为探讨壳聚糖多孔支架与神经干细胞(NSCs)的生物相容性,应用冷冻干燥技术制备壳聚糖多孔支架,将神经干细胞克隆球接种于壳聚糖支架载体上,分为NSCs+支架组和NSCs+支架+NGF组。培养2周后冰冻切片,行Nissl染色及微管相关蛋白-2(MAP-2)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和2,3-环核苷酸磷酸二酯酶(CNP)免疫组化染色来检测NSCs的分化,并进行MAP-2阳性细胞计数、胞体面积、细胞周长的图像处理和统计分析。结果显示:壳聚糖支架孔隙率为90%,支架孔径为50～350μm。NSCs可以在壳聚糖支架上存活、迁移并分化成神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。NSCs+支架+NGF组的MAP-2阳性细胞数明显多于NSCs+支架组,且胞体较大,突起较多且长。上述结果提示,壳聚糖支架与NSCs具有良好的生物相容性,外源性的NGF能够促进壳聚糖支架中的NSCs向神经元分化。

细胞培养法评价生物材料生物相容性研究进展

细胞培养法检测材料生物相容性是一种快速、简便、重复性好又价廉的方法，在材料生物相容性评价中起着越来越重要的作用。由于新材料不断涌现、材料植入体内的部位及使用目的日趋繁杂、材料毒性作用的强弱以及材料与机体反应的复杂性等因素决定了细胞毒性试验中实验方法及实验细胞的多样性。根据生物材料本身的理化特性、植入体内的部位及使用目的选择适当的实验方法和实验细胞至关重要。以往对材料生物相容性的评价往往着眼于细胞的形态与数量的变化，近几年来研究材料对细胞生长、附着、增殖及代谢方面影响的报道日趋增多，并提出了以有活力的细胞数和细胞生长作为材料生物相容性评价标准的观点。通过结合免疫、化学、放射及影像学等多学科的技术发展，使人们进一步深入了解细胞结构和功能的变化关系，进而阐明材料对细胞的作用机制，是今后细胞培养法评价材料生物相容性的发展方向。

细胞内转运载体超支化聚砜胺及其生物相容性

通过制备超支化聚砜胺-异硫氰酸荧光素聚合物(PSA-FITC),研究其生物相容性、肿瘤细胞对其内吞作用和在正常小鼠体内的生物分布,以探讨PSA作为载体进行药物和基因体内输送的可行性.在碱性条件下共价结合PSA与FITC,形成荧光标记聚合物(PSA-FITC)后测定聚合物中FITC含量.在不同时间点,通过流式细胞术检测细胞对聚合物的内吞作用;正常balb/c裸鼠尾静脉注射PSA-FITC 24 h后,用小动物活体荧光成像系统研究各脏器聚合物分布.不同浓度PSA与3T3小鼠成纤维细胞及KB人口腔上皮肿瘤细胞分别孵育24,48,72 h后,通过MTT法测得其生物相容性.结果表明,PSA生物相容性良好,72 h的细胞半抑制浓度大于1 mg/mL.细胞摄入PSA-FITC高效快速,3 h阳性细胞百分含量为99.24%±1.03%,且具有时间依赖性.在正常小鼠体内,PSA在各主要脏器或组织中无明显特异性浓聚.超支化聚砜胺具有明显生物低毒性和高效细胞内转运特点.由于其表面功能基团容易改性,作为载体,通过连接结合配体或抗体,在肿瘤的主动靶向治疗中具有广阔的应用前景.

聚羟基丁酸/戊酸酯共聚物膜与人骨髓间充质干细胞的体外生物相容性

背景:聚羟基丁酸/戊酸酯共聚物是近年来受到重视的聚羟基脂肪酸族组织工程支架材料,具有免疫排斥反应低、生物相容性好和降解产物无毒副作用的优点。目的:观察聚羟基丁酸/戊酸酯共聚物膜材料与人骨髓间充质干细胞的体外生物相容性。方法:将第3代人骨髓间充质干细胞种植于聚羟基丁酸/戊酸酯共聚物膜上作为实验组,培养板单纯培养细胞作为对照组,计算1,2,4 h两组贴壁细胞的数量,得出细胞贴壁率。MTT比色法观察2,4,6,8 d两组细胞的增殖情况。采用Hoechst33258荧光法,检测3,6,9,12 d两组细胞内的DNA含量。将人骨髓间充质干细胞接种聚羟基丁酸/戊酸酯共聚物膜材料上5 d后,电镜扫描观察细胞在材料上的生长情况。结果与结论:共培养1 h时,实验组的细胞贴壁率低于对照组;其他时间段两组之间细胞贴壁率差异无显著意义。两组各时点间的细胞增殖差异无显著意义。两组各时间点细胞内DNA含量差异无显著意义。扫描电镜观察人骨髓间充质干细胞在聚羟基丁酸/戊酸酯共聚物膜上生长良好,形态呈梭形,细胞间连接紧密,分泌较多细胞基质。证明聚羟基丁酸/戊酸酯共聚物膜材料与人骨髓间充质干细胞有良好的生物相容性。

镁合金材料与人内皮细胞的生物相容性

背景:镁合金是一种易降解且具有良好力学性能的材料。目的:研究AM50和WE43铸造镁合金对人脐静脉血管内皮细胞增殖及生长形态的影响。方法:取对数生长期的人脐静脉血管内皮细胞,直接接种于AM50铸造镁合金或WE43铸造镁合金表面,培养24 h后,免疫荧光染色观察细胞形态。取对数生长期的人脐静脉血管内皮细胞,分别以100%、50%、10%浓度的AM50铸造镁合金或WE43铸造镁合金浸提液培养,以常规培养的细胞为阴性对照组,培养12,24,48 h后,检测细胞相对增殖率;培养24 h后,免疫荧光染色观察细胞形态,同时检测细胞上清液pH值与元素水平。结果与结论:(1)细胞相对增殖率:与对照组相比,不同浓度的AM50和WE43镁合金浸提液对人脐静脉内皮细胞增殖无影响;(2)免疫荧光染色观察结果:接种于AM50和WE43镁合金表面的人脐静脉血管内皮细胞面积较阴性对照组缩小,伸展不足,胞浆内细胞骨架结构模糊;分别以10%、50%、100%AM50铸造镁合金浸提液或WE43铸造镁合金浸提液处理人脐静脉血管内皮细胞24 h,细胞形态与阴性对照组细胞较一致,胞浆内细胞骨架结构清楚;(3)细胞上清液pH值与元素含量:与阴性对照组相比,100%浓度AM50和WE43镁合金浸提液组细胞上清p H明显上升(P<0.001),镁元素质量浓度明显升高;(4)结果表明:AM50和WE43铸造镁合金对人脐静脉血管内皮细胞增殖及生长无明显影响,具有良好的细胞相容性。

兔纤维环干细胞与猪脱细胞纤维环基质的生物相容性

背景:脱细胞纤维环基质和纤维环干细胞均来源于纤维环组织,二者复合构建的组织工程复合物可能具有更好的生物相容性。目的:将兔的纤维环干细胞和猪的脱细胞纤维环基质进行体外共培养,观察细胞在脱细胞基质支架上的生长状态。方法:制备猪脱细胞纤维环基质,通过扫描电镜和DAPI染色观察材料制备效果,傅里叶红外光谱仪鉴定基质的成分;分离和培养兔纤维环干细胞,将第1代纤维环干细胞种植于脱细胞纤维环基质表面,行细胞骨架染色,倒置免疫荧光显微镜和扫描电镜下观察细胞形态,并绘制细胞生长曲线。结果与结论:制备成的猪脱细胞纤维环基质呈白色半透明状,扫描电镜下为纤维网状结构,DAPI染色显示无细胞残留,红外光谱分析显示脱细胞纤维环基质主要成分是胶原蛋白。细胞在支架材料上生长第1,3,7天的细胞骨架染色显示细胞很好的黏附于支架表面,生长状态良好,表明脱细胞纤维环基质有着良好的生物相容性,纤维环干细胞在其表面生长良好。

灌注法制备全肾脏脱细胞基质支架的体内生物相容性

背景:应用灌注法制备的大鼠全肾脏脱细胞基质支架具有良好的体外细胞相容性,但其体内生物相容性尚不明确。目的:应用灌注法制备大鼠全肾脏脱细胞基质支架,检测其体内生物相容性。方法:应用灌注法制备Wistar大鼠全肾脏脱细胞基质支架,进行以下实验:1急性毒性实验:在小鼠腹腔分别注射全肾脏脱细胞基质支架浸提液、生理盐水及苯酚。2溶血实验:将抗凝新西兰兔血分别与全肾脏脱细胞基质支架浸提液、生理盐水及蒸馏水混合。3热源实验:向新西兰兔耳缘静脉注射全肾脏脱细胞基质支架浸提液。4内皮刺激实验:在新西兰兔皮下注射全肾脏脱细胞基质支架浸提液,观察有无皮肤刺激反应。5皮下植入实验:将全肾脏脱细胞基质支架埋入新西兰兔背部皮下。结果与结论:全灌注法制备的Wistar大鼠全肾脏脱细胞基质支架无细胞残留,未引起全身毒性反应、急性溶血反应、热源反应及皮肤刺激反应,植入兔体内具有良好的组织相容性。说明大鼠全肾脏脱细胞基质材料在动物体内具有很好的生物相容性。

壳聚糖膜与兔角膜内皮细胞生物相容性的研究

背景 目前对角膜内皮移植载体的研究较多,但究竟何种载体更适合作为角膜内皮移植载体并无明确定论. 目的 观察壳聚糖的细胞相容性及组织相容性,探讨该材料作为角膜内皮移植载体的可能性.方法 10只新西兰白兔用过量麻醉法处死后摘取新鲜眼球,用组织块培养法培养角膜内皮细胞（CECs）,将壳聚糖膜片置于无菌48孔板中,每孔加入200 μl细胞悬液进行孵育,观察细胞的形态和密度.采用扫描和透射电子显微镜观察细胞表面和超微形态结构.用免疫荧光法检测壳聚糖膜片上培养的CECs中纤维连接蛋白（FN）、Ⅰ型胶原（Coll-Ⅰ）、连接黏附分子-1（ZO-1）的表达.健康新西兰白兔10只,左眼经前房植入壳聚糖膜片,右眼仅做前房穿刺作为对照组,术后裂隙灯显微镜下观察术眼眼前节炎症反应及角膜水肿情况.于术后1、4、8周分别测量术眼角膜厚度,术后2周用角膜内皮镜观察兔眼的CECs形态,测定CECs密度,术后1个月、3个月时摘除兔眼眼球,角膜组织行苏木精-伊红染色,观察角膜炎症反应情况.采用配对t检验对实验组和对照组间各测量指标的数据资料进行统计学分析. 结果 CECs在壳聚糖膜片孵育5d后形成完整的单层多角形细胞,形态规则,7d后达到90％融合,细胞40％呈六角形,细胞间连接紧密.扫描电子显微镜下可见兔CECs为近圆形或多边形,以桥粒紧密连接,细胞表面有微绒毛；透射电子显微镜下可见细胞膜表面的突起、伪足和微绒毛,细胞质内可见空泡和其上有核糖核蛋白体的扩张内质网,染色质丰富.免疫荧光检测显示,壳聚糖膜片上培养的CECs中FN、Coll-Ⅰ、ZO-1呈阳性表达.兔活体前房内植入含CECs的壳聚糖膜片后3d,裂隙灯显微镜下可见前房内渗出物和角膜水肿；术后14d左右,前房内渗出完全吸收,角膜恢复透明.术后1、4、8周,实验组与对照组间角膜厚度的差异均无统计学意义（t=1.377,P=0.265；t=1.795,P=0.165；t=0.390,P=0.760）；两组间CECs密度和六角形细胞率的差异均无统计学意义（P=0.365、0.062）；术后3个月时实验兔角膜组织病理学检查发现,壳聚糖膜片周围炎性细胞浸润消失,角膜内皮结构良好.结论壳聚糖载体膜片与体外培养的兔CECs生物相容性好,是CECs移植的潜在良好载体.

脱细胞膀胱基质补片的生物相容性研究

目的：评价脱细胞膀胱基质作为盆底修复替代材料的生物相容性。方法通过细胞毒性试验、溶血试验、阴道埋植试验等体内外生物学实验相结合的方法评价该材料的生物相容性。结果在细胞毒性试验中，材料毒性级别0～1级。材料浸提液的溶血率为1．5％。大体和组织学观察示材料未引起宿主免疫排斥反应，植入后引起轻度的异物反应，移植12周后基本降解。结论该材料具有良好的生物相容性，但需调整其降解率，以适应盆底修复手术要求。

骨髓间充质干细胞诱导胆管内皮细胞与电纺纳米纤维的生物相容性

背景:胆管损伤修复是腹部外科手术的难题,组织工程胆管是解决这一难题的理想方法,而构建性能优异的组织工程胆管支架是这一研究的关键。目的:观察猪骨髓间充质干细胞诱导分化的胆管内皮细胞与电纺纳米纤维的生物相容性。方法:将猪骨髓间充质干细胞于体外定向分化为肝干细胞,再进一步分化为胆管内皮细胞,并通过形态学及RT-PCR对分化完成的细胞加以鉴定。用静电纺丝方法制备聚乳酸-羟基乙酸纳米纤维膜,通过扫描电镜观察其形态,并测定其短期(2周)内体外降解率。将分化的胆管内皮细胞与纳米纤维复合培养,观察细胞在纳米纤维表面的黏附、增殖能力,荧光染色观察细胞形态及在材料表面的分布情况,扫描电镜观察细胞在纳米纤维表面生长形貌。结果与结论:骨髓间充质干细胞体外定向分化4周后,细胞呈现典型树枝状胆管内皮细胞形态学改变,并且有CK19的表达。扫描电镜照片显示电纺材料为连续的纳米纤维,纤维直径均分布在200-500 nm范围内,在2周内聚乳酸-羟基乙酸纳米纤维没有发生明显的降解。通过细胞黏附率计算、MTT法检测、荧光染色及扫描电镜观察证明猪骨髓间充质干细胞诱导分化后的胆管内皮细胞与聚乳酸-羟基乙酸纳米纤维具有良好的生物相容性。