钩吻生物碱单体对肝癌细胞体外抑制作用机制的初步研究

目的:探讨植物钩吻中生物碱单体对肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用,并探讨其相关机制。方法:MTT法观察3种生物碱单体对HepG2细胞的体外杀伤作用,选取活性最好的单体进一步行时效、量效关系的测定和细胞形态学观察;流式细胞术检测细胞周期和凋亡率的变化;Capspase-3、Capspase-8、Capspase-9活性检测用分光光度法进行。结果:3种单体都显示出对HepG2细胞的增殖抑制活性,其中钩吻素己效果最好,呈时间及剂量依赖性抑制HepG2细胞增殖;经钩吻素己处理48 h后的HepG2细胞变小变圆,正常贴壁细胞随着药物浓度的增加而减少;各浓度组钩吻素己可阻滞细胞于S期,并诱导细胞凋亡,且Capspase-3、Capspase-8、Capspase-9活性随着药物浓度的增高而增高。结论:3种钩吻生物碱单体中钩吻素己能显著抑制HepG2细胞体外增殖且细胞毒性较小,并通过影响细胞周期分布和激活Capspase-8、Capspase-9进而活化Capspase-3发挥抗肿瘤作用。

苦豆子生物碱单体的分离纯化工艺研究

在对苦豆子的酸水浸提液进行了超滤和脱色预分离的基础上，采用不同的有机溶剂萃取和硅胶柱层析对其中主要的生物碱进行分离纯化及条件优化。结果表明合适的生物碱萃取富集条件是用氯仿为溶剂，pH=10．5。该氯仿萃取液用硅胶柱层析分离，洗脱剂为氯仿．甲醇．氨水（5：0．4：0．01，V/V/V），洗脱速度1柱床体积·h^-1，得到峰1～峰3。峰1和峰2中的化合物经丙酮结晶和重结晶分别得到纯度99％以上的氧化槐果碱和氧化苦参碱；峰3对应的组分再经硅胶柱层析，洗脱剂为丙酮．甲醇（10：1，V／V），洗脱速度1柱床体积·h^-1，得到峰4～峰6，峰4中的化合物经石油醚结晶和重结晶，可以得到纯度95．8％的槐定碱。采用了HPLC-MS，IR，熔点测定和薄层色谱等方法进行上述生物碱单体的定性定量及分子结构确定。本研究为深度开发苦豆子生物碱资源和为制备医药工业所需的高纯度生物碱原料提供了依据。

黄连须根总生物碱及单体的联产工艺研究

目的研究从黄连须根中分离纯化黄连生物碱单体和总碱的联产工艺。方法用0.3%硫酸水加热回流提取黄连须中总生物碱,用石灰乳调节提取液pH为5～6,过滤;滤液用JG-101树脂吸附,用不同洗脱剂分步洗脱;重结晶获得药根碱和小檗碱单体,盐析获得黄连总生物碱;用HPLC分析黄连生物碱及总碱含量。结果用2%氢氧化钠洗脱,酸中和后重结晶得药根碱单体;再用70%酸性甲醇(1%H2SO4)溶液洗脱总生物碱;洗脱液中加入2%NaCl沉淀并重结晶得小糪碱单体;上清液加20%NaCl沉淀获得余下总生物碱。结论用JG-101树脂能够很好吸附黄连总生物碱,药根碱和小檗碱单体的纯度均达到95%以上,总生物碱(小檗碱、黄连碱、巴马汀和药根碱之和)的含量为90%左右。

不同天然群体子代家系苦豆子生物碱含量研究

采用高效液相色谱法(HPLC)对23个苦豆子天然群体子代家系植株地上部分(茎、叶)中的生物总碱以及5种生物碱单体(槐定碱、槐果碱、苦参碱、苦豆碱、氧化苦参碱)的含量进行了测定分析,结果显示:23个子代家系植株间的生物总碱及5种生物碱单体含量均有极显著差异(P<0.01);其中,生物总碱含量的均值为27.42 mg·g^(-1),变化范围为13.88~50.83 mg·g^(-1);5种生物碱单体的含量范围为0.0101~6.5932 mg·g^(-1),均值大小为:苦豆碱(3.6603 mg·g^(-1))>苦参碱(1.9303 mg·g^(-1))>氧化苦参碱(1.4124 mg·g^(-1))>槐果碱(0.2582 mg·g^(-1))>槐定碱(0.1278 mg·g^(-1));来自内蒙古乌海市(WH)的天然苦豆子群体子代家系中生物总碱以及苦豆碱等生物碱单体含量均较高。

生物碱类成分含量测定分析方法研究进展

生物碱类成分是一类重要的具有多种多样的生物活性的天然含氮有机化合物,其含量测定方法多种多样,关于其定性、定量的方法得到了广泛深入的研究。本文就近年来有关生物碱类成分含量的测定分析方法研究进展作一综述,以期为生物碱类成分含量测定方法的进一步研究提供文献依据和分析思路。

中药单体防治单侧输尿管梗阻肾纤维化实验研究进展

近年来,防治单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)肾纤维化实验的中药单体主要有黄酮类单体、生物碱类单体、皂苷类单体、醌类中药单体、萜类单体、多酚类单体、木脂素类单体等。实验目前仍存在以下问题:某些治疗肾纤维化的中药单体具有不确定性,只停留在实验研究,临床未见报道;某些活血化瘀中药单体的机制探索研究较集中,指标水平重复,研究方法也仅仅停留在常规分子生物学的技术运用,研究深度不够;目前自噬、转染、凋亡机制研究较少,鲜有高效的代谢组学、转录组学等研究。今后,在肾纤维化UUO模型的研究中如何更好地将传统中医药理论与现代医学体系相融合,并充分利用基因芯片技术和蛋白组学等新兴研究方法,进行高效而客观的研究,以期指导临床,都是进一步开展中药单体防治UUO肾纤维化的作用机制研究需要思考的问题。

川芎嗪对2型糖尿病大鼠视网膜的保护作用及机制研究

糖尿病视网膜病变（diabeticretinopathy，DR）是糖尿病微血管并发症中最重要的病变之一。川芎嗪（tetramethylpyrazine，TMP）是从川芎中分离得到的一种活性生物碱单体，对糖尿病大鼠视网膜组织自由基损伤起一定的保护作用，与氨基胍联合应用能明显减轻糖尿病大鼠视网膜组织超微结构的病变。

青藤碱在类风湿关节炎中的作用

传统中药青风藤又名清风藤,为防己科植物青藤和毛青藤的干燥藤茎,味苦,性平,归肝、脾经,具有祛风湿、通经络、镇痛之功效,用于治疗风湿痹痛、关节肿痛等。早在明代,李时珍的《本草纲目》中就有＂青风藤治风湿流注,历节鹤膝,麻痹瘙痒,损伤疮肿＂的记载。盐酸青藤碱是从中药青风藤中提取的生物碱单体,先前实验证明青藤碱具有肯定的镇痛镇静、抗炎、免疫抑制、抑制软骨破坏等作用,

从苦豆子中分离纯化苦参碱和槐定碱的工艺研究

运用稀酸水法从苦豆子种子中提取生物碱,最佳提取条件为料液比1∶30,pH 1.5,提取时间5h。使用大孔树脂吸附法对提取的生物碱进行纯化,考察了SP850、SP825、SP700、SP207、AB-8等5种树脂的吸附效果,其中SP850型树脂吸附量和解析量均最大,分别为27.4 mg/mL和20.4 mg/mL。测定了体积分数为50%、60%、70%的乙醇洗脱效果,确定了60%乙醇为最佳洗脱浓度,洗脱体积为6倍柱体积。经氯仿萃取和旋转蒸发,得到纯度达83.5%的生物碱粗产品。运用硅胶柱层析技术从生物碱粗品中分离生物碱单体,考察了氯仿-甲醇-氨水系统,正己烷-乙醇-氨水系统,丙酮-甲醇-氨水系统在硅胶薄层色谱上对生物碱的分离效果,确定以V正己烷∶V乙醇∶V氨水=8∶2∶0.1作为流动相。收集洗脱液,经过结晶和重结晶,得到苦参碱和槐定碱晶体。经检测,苦参碱纯度为98.3%,槐定碱纯度达96.8%。

青藤碱对类风湿关节炎患者滑膜细胞与炎性细胞黏附作用的研究

类风湿关节炎（RA）是一种以关节慢性滑膜炎症为特征的全身性自身免疫疾病。缓解疼痛，减轻关节病理损害，延缓关节畸形变是治疗的主要目标。青藤碱（sinomenine）是从中药青风藤中提取的生物碱单体，具有显著的镇痛和消炎作用，其盐酸盐制剂临床上用来治疗类风湿关节炎，并取得较好疗效。