固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定菊花中15种吡咯里西啶生物碱毒素

目的建立超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)测定菊花中15种吡咯里西啶生物碱毒素含量的分析方法。方法样品中吡咯里西啶生物碱毒素采用0.1 mol/L硫酸水溶液提取,通过Oasis PRiME MCX固相萃取小柱净化,采用UPLC-MS/MS进行分析。采用Acquity UPLC BEH C18色谱柱分离,以0.1%甲酸水-甲醇溶液为流动相进行梯度洗脱,电喷雾离子源正离子电离,多反应离子监测模式监测,外标法定量。结果15种吡咯里西啶生物碱毒素在一定浓度范围内线性关系良好,相关系数(r2)均大于0.999;定量限为0.50~10.00μg/kg,检出限为0.15~3.00μg/kg;阴性样品的加标回收率为82.8%~92.4%,相对标准偏差为2.1%~4.9%(n=5)。结论该方法准确度和精密度高,耗时短,能同时测定多种菊花样品中的多种吡咯里西啶生物碱毒素含量。

超高效液相色谱-串联质谱法测定菊花15种吡咯里西啶生物碱毒素

建立菊花15种吡咯里西啶生物碱毒素(天芥菜碱、天芥菜碱-N-氧化物、倒千里光碱、倒千里光碱-N-氧化物、千里光宁碱、千里光宁碱-N-氧化物、千里光碱、千里光碱-N-氧化物、促黑激素、促黑激素-N-氧化物、千里光菲灵碱、千里光菲灵碱-N-氧化物、欧天芥菜碱、欧天芥菜碱-N-氧化物、克氏千里光碱)含量的液相色谱-串联质谱测定方法。采用硫酸溶液提取菊花样品中吡咯里西啶生物碱毒素,离心后将上清液过Oasis MCX固相萃取小柱净化,氮气吹干后复溶,采用超高效液相色谱-串联质谱法进行分析。采用Acquity UPLC BEH C18色谱柱,流动相以0.1%(V/V)甲酸水溶液-甲醇体系进行梯度洗脱,采用ESI源正离子电离模式,通过多反应离子监测模式进行检测,采用基质校准外标法进行定量。15种吡咯里西啶生物碱毒素在相关浓度范围内相关系数均大于0.999,线性关系好;其中,检出限为0.5~9.0μg·kg^(-1),定量限为1.7~30.0μg·kg^(-1);阴性菊花添加样品的回收率为82.6%~94.2%,相对标准偏差为2.3%~5.0%(n=5)。该方法检测耗时短,具有较高精密度和准确度,具备同时测定菊花样品中多种吡咯里西啶生物碱毒素的能力。

作用于肌肉型乙酰胆碱受体的生物毒素研究进展

目的近几十年,肌肉型乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptors,nAChRs)成为神经生理学、药理学、药物设计及相关疾病研究的重要靶点。包括横纹肌肉瘤、小儿软组织瘤、肌源性紊乱等疾病都与肌肉型nAChRs的异常有关。因此寻找针对肌肉型nAChRs的特异性探针,对于研究受体的结构、功能及相关疾病发病机理与治疗药物研发至关重要。方法通过查阅相关文献对近年来发现的特异作用于肌肉型nAChRs的生物毒素进行了综述。结果与结论自然界中存在许多天然生物毒素,能特异作用于肌肉型nAChRs,这些毒素对于研究肌肉型nAChRs的结构和功能,以及相关疾病的诊断和治疗有着非常重要的应用价值。