生物素夹心法对小分子蛋白质胰岛素样生长因子1在自组装短肽水凝胶中的缓释

蛋白质在自组装短肽水凝胶中的缓释速度与蛋白质大小和凝胶孔径直接相关,如何提高小分子蛋白质的缓释效果一直是个问题。本研究采用生物素夹心法研究胰岛素样生长因子1(IGF-1)在N端带有RGD序列的自组装短肽(P3)水凝胶中的释放效果。紫外分光光度计检测每个时间点所释放的IGF-1浓度,结果显示IGF-1的释放速度明显降低。水凝胶培养实验表明用生物素夹心法延长IGF-1释放时间能够有效地促进小鼠成软骨细胞ATDC5的增殖。

嗜水气单胞菌BA-ELISA的建立及其在病原检测中的应用

从中华鳖中分离的嗜水气单胞菌致病株T0608经福尔马林灭活后,注射免疫新西兰兔,制备了高价免疫血清,血清的菌体凝集效价可达1/1 280;G蛋白亲和层析纯化兔IgG,将IgG用生物素标记,建立了生物素-亲和素双抗体夹心酶联免疫吸附法(BA-ELISA);其最低检出限为2.5×103cfu,相当于0.5 ng菌体蛋白,其检测灵敏度为ABC-ELISA(4.0×104cfu)和间接ELISA(4.0×104cfu)的16倍;特异性试验结果表明,本法与鱼类气单胞菌、拟态弧菌、海豚链球菌、大肠杆菌等无交叉反应。BA-ELISA可不经细菌培养直接检测人工感染48 h中华鳖的肝、肠道组织中的嗜水气单胞菌。用该方法对湖州市龟鳖养殖场的水样、中华鳖和巴西龟肝、肠道内容物进行检测,结果表明该方法可较好地应用于发病中华鳖的病原早期诊断及养殖中华鳖的病原检测。