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生物反应器中表达ScFv大肠杆菌细胞自溶的分析 被引量:2
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作者 胡卫国 安展飞 +3 位作者 刘秀霞 戴晓峰 杨艳坤 白仲虎 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期978-986,共9页
表达外源蛋白细菌培养过程中的细胞自溶现象是一个普遍性的过程工程问题。在相同发酵培养条件下,研究生物反应器中大肠杆菌W3110表达全人源化单链抗体片段(Single chain antibody fragments,ScFv)工程菌和野生菌的外源蛋白表达及细胞活... 表达外源蛋白细菌培养过程中的细胞自溶现象是一个普遍性的过程工程问题。在相同发酵培养条件下,研究生物反应器中大肠杆菌W3110表达全人源化单链抗体片段(Single chain antibody fragments,ScFv)工程菌和野生菌的外源蛋白表达及细胞活性的差异,发现外源蛋白高效表达并积累在细胞内,大部分活细胞较野生菌提前6 h进入活着但不可培养(Viable but nonculturable,VBNC)状态,进而发生细胞自溶。分析工程菌与野生菌中胁迫应激和自溶途径基因转录水平表达谱,发现外源蛋白表达过程中热激途径rpo H,dna K,dna J,gro EL,gro ES;酸胁迫途径rpoS,gadE,gadX;氧胁迫途径sodA,katE均出现表达波峰,而发酵罐中细胞自溶过程中外膜蛋白基因ompA,ompC,ompW,ompX表达量显著下降,但rpoE并未出现持续高表达。这些发现为后续ScFv表达宿主细胞抗胁迫和自溶控制策略提供了新思路。 展开更多
关键词 工程菌细胞自溶 活的不可培养状态 cte途径 胁迫应激生物反应
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黄瓜FtsZs基因家族鉴定及分析
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作者 陈琳杰 常婧姝 +3 位作者 张宇 颜爽 任仲海 王丽娜 《山东农业大学学报(自然科学版)》 北大核心 2024年第5期774-781,共8页
FtsZ蛋白作为微管蛋白同源物,常通过自我组装成一个收缩的细胞骨架元素“Z”环,影响质体分裂。但是,黄瓜FtsZ蛋白的研究尚未见报道,其功能尚不明确。本文利用生物信息学方法在黄瓜中鉴定到了3个FtsZ蛋白,并将它们分为2组。序列分析发现... FtsZ蛋白作为微管蛋白同源物,常通过自我组装成一个收缩的细胞骨架元素“Z”环,影响质体分裂。但是,黄瓜FtsZ蛋白的研究尚未见报道,其功能尚不明确。本文利用生物信息学方法在黄瓜中鉴定到了3个FtsZ蛋白,并将它们分为2组。序列分析发现它们的长度在4493~6264bp之间,含有6~7个外显子,氨基酸长度为421~488AA,分布在3号或6号染色体上;亚细胞定位预测结果显示,黄瓜FtsZ定位于叶绿体或细胞质;RNA-seq分析发现黄瓜FtsZs在茎、叶、雌花和子房表达较高,荧光定量PCR结果显示黄瓜CsFtsZ2-1基因在雄花中的表达量也较高,表明黄瓜FtsZs基因在叶、花和子房生长发育中发挥功能;此外,在胁迫响应过程中,CsFtsZ2-1基因可响应盐胁迫,CsFtsZ1、CsFtsZ2-1和CsFtsZ2-2可响应冷胁迫,CsFtsZ1和CsFtsZ2-1可响应白粉病病原菌侵染。本文章结果为进一步研究FtsZs基因在黄瓜中的作用和机制提供了参考和依据。 展开更多
关键词 黄瓜 FtsZs基因 生物信息学分析 生物胁迫反应 生物胁迫反应
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Evidence That the Auxin Signaling Pathway Interacts with Plant Stress Response 被引量:7
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作者 包方 李家洋 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2002年第5期532-536,共5页
Auxin influences a variety of developmental and physiological processes. Early reports, suggested that auxin might affect plant stress response. We have identified a number of auxin responsive genes in Arabidopsis tha... Auxin influences a variety of developmental and physiological processes. Early reports, suggested that auxin might affect plant stress response. We have identified a number of auxin responsive genes in Arabidopsis thaliana (L.) Heynh. by using cDNA an-ay and found that stress responsive genes, such as,Arabidopsis homolog of MEK kinase 1 (ATMEKK1), ReL/SpoT homolog 3 ( At-RSH3), Catalase 1 ( Cat1) and Ferritin 1 (Fer1), were down-regulated by auxin, indicating that auxin regulates ale expression of stress responsive genes. We also demonstrated that nitrilase genes, nitrilase I ( NIT]) and nitrilase 2 (NIT2) involving in indole-3-acetic acid (IAA) biosynthesis, were induced by salinity stress, suggesting that the level of IAA might increase in response to salinity stress. To dissect the signal pathway involved in the interaction, two auxin insensitive mutants, auxin resistant 2 (axr2) and auxin resistant 1-3 (axrl-3) were used. Stress responsive genes were induced by salt stress in wild type and axr2, but not in axr1-3. The result suggests that die interaction between auxin and stress responses may be linked in the ubiquitin pathway. 展开更多
关键词 AUXIN stress-responsive genes auxin insensitive mutants NITRILASE Arabidopsis thaliana
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