超高效液相色谱-三重四极杆质谱法测定大鼠海马和大脑皮层中生物胺类及氨基酸类神经化学物质

建立了超高效液相色谱-三重四极杆质谱法检测大鼠海马和大脑皮层中生物胺类及氨基酸类神经化学物质含量的方法。选用Hypercarb(100 mm×2.1 mm,5μm)色谱柱,以0.1%甲酸-甲醇为流动相,梯度洗脱。电喷雾离子源(ESI)在正离子模式下,选择多反应监测模式(MRM)扫描,对检测的6种生物胺类和11种氨基酸类神经化学物质分别选择一个定性离子对和一个定量离子对。测定Wistar大鼠海马和大脑皮层中6种生物胺类和11种氨基酸类神经化学物质的含量,对比两种不同脑组织样品前处理方法对神经化学物质含量测定结果的影响。17种神经化学物质在10 min内即可完成同时测定,检测方法线性关系良好,日内和日间精密度、加标回收率和重复性满足分析要求。本方法准确、灵敏度高、专属性强、重复性好,适用于脑组织中生物胺类及氨基酸类神经化学物质的含量测定,可为生物胺类及氨基酸类神经化学物质提供有效的样品前处理方法和检测手段。

生物胺类神经递质的电化学检测研究进展

就1993-2005年生物胺类神经递质包括多巴胺、肾上腺素、去甲肾上腺素、5-羟色胺的各种电化学检测方法的应用研究和发展方向进行了评述。引用文献58篇。

先天性长期缺碘对大鼠脑中生物胺类的影响

本文观察了先天性严重缺碘大鼠四个脑区中某些神经递质及其有关代谢产物含量的变化。HPLC-ECD测定发现所有低碘组(L)的大脑皮质、下丘脑、尾状核以及嗅球四个脑区中的多巴胺含量比供碘组(N)显著下降(P<0.05或0.001)。低碘组的大脑皮质及尾状核中的去甲肾上腺素也显示急剧下降(P<0.001,P<0.01),下丘脑中的含量两组间差异无显著性,而在嗅球则有增加(P<0.01)。L组的尾状核和下丘脑中5-羟色胺含量降低(P<0.05,P<0.001);在大脑皮质和嗅球中的含量又有增高(P<0.05)。5-羟吲哚乙酸在L组各脑区变化趋势与5-羟色胺一致,仅变动幅度不同。

蟾酥中吲哚烷胺类生物碱的分离与结构鉴定

目的对蟾酥(Venenum Bufonis)中吲哚烷胺类生物碱进行提取分离和结构鉴定。方法蟾酥水溶性部分经HP 20树脂柱,制备薄层色谱,高效液相色谱分离和精制,得到6个吲哚烷胺生物碱,通过理化常数和光谱数据,分析鉴定了其化学结构。结果蟾酥水提取物中分离得到6个生物碱,分别鉴定为蟾毒色胺(bufotenine,Ⅰ)、蟾毒色胺内盐(bufotenidine,Ⅱ)b、ufobutanoic acid(Ⅲ)、5羟色胺(serotonin,Ⅳ)b、ufotenine N oxide(Ⅴ)、N甲基5羟色胺(Ⅵ)。结论化合物Ⅴ和Ⅵ为首次从蟾酥中分离得到。首次对蟾酥色胺内盐及bufotenine N oxide的1H1、3C NMR数据进行归属。

冬凌草甲素芳胺类衍生物的合成及其抗肿瘤活性

目的:对冬凌草甲素进行结构改造,合成其芳胺衍生物,并初步评价其抗肿瘤活性。方法:冬凌草甲素分别与4种芳胺发生迈克尔反应,所获产物采用IR、1H-NMR、MS和元素分析确证结构,以冬凌草甲素为阳性对照,采用MTT法观察不同浓度的产物对KB细胞增殖的抑制作用。结果与结论:合成了4个冬凌草甲素的芳胺类衍生物,初步药理试验表明该类化合物对KB细胞株有显著的增殖抑制作用。

草问荆总生物碱对大鼠脑内单胺类神经递质含量的影响(英文)

背景:从天然药物中寻求安全有效的镇静安定类药物是逐年增加的神经精神类疾病治疗的需要。前期实验发现草问荆总生物碱具有良好的镇静安定作用。目的:分析草问荆总生物碱对中枢神经系统的抑制作用。设计:以实验动物为观察对象的随机对照实验。单位:哈尔滨商业大学药物研究所博士后科研工作站。材料:实验于2002-03/2003-01在黑龙江中医药大学药理研究室完成。实验药物为草问荆总生物碱;实验动物选用Wister大鼠24只。方法:24只大鼠随机分为3组,分别为草问荆总生物碱组(60mg/kg)、利血平组(30mg/kg)、生理盐水组(同体积),腹腔一次性给药上述剂量药物后,采用高效液相色谱-电化学检测法及紫外线检测法测定大鼠脑内单胺类神经递质含量。主要观察指标:大鼠纹状体和脑边缘区单胺类递质去甲肾上腺素、肾上腺素、多巴胺和5-羟色胺及其代谢产物3,4-二羟苯乙二醇、5-羟吲哚乙酸、高香草酸的含量。结果:实验前和实验后动物数均为每组8只,无异常或死亡现象。草问荆总生物碱对大鼠纹状体的单胺类神经递质的含量具显著的降低作用,同时升高纹状体单胺递质中性及酸性代谢产物的含量。对大鼠前脑边缘区的单胺类递质具有显著的降低作用,同时显著升高边缘区单胺代谢物5-羟吲哚乙酸,高香草酸的含量,但对于3,4-二羟苯乙二醇的升高作用无统计学意义(P>0.05)。结论:草问荆总生物碱的镇静、安定作用与中枢的单胺类神经递质的含量下降有关。草问荆总生物碱具有与利血平相似的单胺排空作用,是草问荆总生物碱对中枢神经系统镇静安定作用的作用机制。

含杂环胺类衍生物在加氢基础油中的摩擦磨损和抗氧化性能

将杂环化合物引入二苯胺分子中制成的添加剂具有多种功能。合成了一种分子中含有杂环的胺类衍生物添加剂BTPA,采用红外光谱、元素分析等对其结构进行了表征,并用热重(TG)曲线分析其热稳定性。将BTPA加入HVIW H150加氢基础油中制成润滑油,考察了其摩擦磨损性、抗氧化性及耐蚀性。结果表明:BTPA不能提高加氢基础油的PB,PD值,但其在加氢油中具有良好的抗氧化及抗磨性能,且可较好地抑制铜片腐蚀,是一类具有潜在应用前景的多功能添加剂。

生物分配胶束色谱中胺类和酚类衍生物的定量构效关系研究

运用启发式方法和RBFNN方法分别建立了描述65个胺类和酚类衍生物的结构与其生物分配胶束色谱保留值之间的线性和非线性QSRR模型.RBFNN模型的训练集、预测集的判定系数(R2)分别为0.9301和0.9046.结果表明,RBFNN模型性能要优于HM.用这两种方法建立起来的模型,可以用来尝试预测更多的有机污染物在模拟的生物环境——生物分配胶束色谱中的保留值.如果预测的污染物的保留值越小,初步可以判断出该化合物越容易透过生物膜,对生物就具有更强的毒性.

嘧啶吡唑胺类衍生物的合成及除草活性评价

为设计筛选出具有高除草活性化合物,本研究以前期发现的高除草活性化合物4u为先导,设计合成8个结构新颖的嘧啶吡唑胺类衍生物,即3-(噻吩-2-基)-1-嘧啶-1H-吡唑-5-胺衍生物。所有结构均经过氢谱、碳谱和高分辨质谱确证。利用小杯法对上述化合物进行除草活性测定,分别以4u和莠去津作阳性对照。结果显示,在200 mg/L浓度下,化合物5a、5d、5f、5g和5h表现出较好的除草活性;其中,化合物5g和5d对油菜根长的抑制率分别为82%和77%,显著优于对照药4u(60%);化合物5d对反枝苋根长的抑制率为64%,显著高于对照药剂莠去津(32%);同时,5d对反枝苋茎长的抑制率为64%,优于对照药4u(59%)。由此可知,5d表现出较好的除草活性。

新型萘酰亚胺类衍生物8c诱导结肠癌耐药细胞HCT116/L-OHP凋亡作用研究

背景与目的:细胞凋亡受阻是肿瘤细胞产生耐药的重要因素,从细胞凋亡的研究入手,将为肿瘤的治疗和耐药性的逆转开辟新的途径。本研究观察一种新型萘酰亚胺类衍生物8c对结肠癌HCT116/L-OHP耐药细胞的作用,探讨诱导HCT116/L-OHP耐药细胞凋亡的分子机制。方法:采用CCK-8法检测8c对HCT116/L-OHP细胞的增殖抑制作用;采用流式细胞术观察8c对HCT116/L-OHP细胞凋亡的影响;采用实时定量PCR(realtime PCR)检测p53 m RNA、Bax m RNA及Bcl-2 m RNA水平变化;蛋白[质]印迹法(Western blot)检测p-p53、Bax、Bcl-2及细胞色素c(Cyt-c)的蛋白表达水平。结果:8c抑制HCT116/L-OHP细胞增殖的半数抑制浓度(IC50=8.16μmol/L)低于阳性对照氨奈菲特(IC50=28.37μmol/L);药物作用后,8c诱导耐药细胞产生凋亡,凋亡通路中p53(Ser15)磷酸化水平上升,但p53 m RNA水平不受影响;Bax蛋白水平及m RNA水平明显上升,Bcl-2蛋白及m RNA水平下降,使得Bax/Bcl-2比例增加,同时8c又引起细胞色素c的释放。结论:8c通过磷酸化p53 Ser-15位点激活p53,随即激活细胞凋亡通路相关蛋白的表达,这可能是8c抑制结肠癌HCT116/L-OHP耐药细胞增殖的重要机制之一。8c具有良好的抗肿瘤及抗耐药潜力和开发应用前景。

丙炔苯丙胺类结构衍生物的合成与初步活性分析

目的设计合成丙炔苯丙胺类化合物。方法以3-甲基苯甲酸为原料,经过NBS溴代、氨解与缩合三步反应得到目标终产物。采用时间分辨荧光法对合成的3个目标化合物进行体外分子水平的活性评价。结果得到3个丙炔苯丙胺类衍生物,结构均经过1H NMR和LC-MS表征。结论合成的化合物未见文献报道,探索的合成路线稳定可靠,操作简单。3个化合物对β-分泌酶没有明显的抑制活性。

壳聚糖絮凝沉降法对麻黄水提取液仲胺类生物碱成分影响的研究

目的:研究壳聚糖絮凝沉降法对麻黄水提液中仲胺类生物碱的影响。方法 :选用含有仲胺类生物碱成分的中药麻黄,壳聚糖絮凝沉降法对麻黄水提液进行沉淀澄清,以水提液中盐酸麻黄碱和浸膏率为观察指标,同乙醇沉淀法、高速离心法比较,研究壳聚糖絮凝沉降法对仲胺类生物碱成分的影响情况。结果:壳聚糖絮凝沉降法同乙醇沉淀法、高速离心法比较,该法造成的盐酸麻黄碱的损失最多,对原药液的成分及成分组成比例改变较大;该法和高速离心法的浸膏率高,精制效果差。结论:壳聚糖絮凝沉降法造成生物碱类成分损失较大,对原药液中成分及成分组成影响较大且精致效果较差,因此该法能否在生物碱类的澄清工艺中使用,有待于进一步研究。

含手性的胺类冰片衍生物的合成

The asymmetric Michael addition-elimination reaction of chiral 5-(1S)-bornyloxy-3,4-dibromo-2(5H)furanones and some amines are investigated.Four new chiral bornyl amine derivatives 6a～6d are obtained.they are identified by IR,1H NMR,13C NMR,HRMS and so on.It offer a new way to synthetize more chiral bornyl amine derivatives.

新型手性胺类衍生物的合成

胺类化合物作为亲核试剂,与手性5-(S)-5-(L-孟氧基)-3,4-二溴-2(5H)呋喃酮通过不对称Michael加成-消除反应得到4个含手性中心的胺类衍生物,产率80%～93%。所有化合物均经IR、1HNMR、13CNMR、HRMS得到确证,为室温下方便地制备含多手性中心的胺类衍生物提供了一条可能的新途径。

食品中生物胺研究进展

生物胺的过量摄入会对人和动物机体造成严重毒害作用,为了解食品中生物胺对人体健康的影响,对食品中生物胺来源与影响因素以及生物胺代谢和毒性作用进行简要综述。

中枢神经系统感染患儿脑脊液单胺类物质改变及其机制探讨

应用ＨＰＬＣ法测定了结脑、化脑、病脑和对照组患儿脑脊液中单胺类物质。结果发现化脑患者５－ＨＩＡＡ，ＨＶＡ显著高于其它患者；结脑患儿脑脊液中５－ＨＩＡ，ＨＶＡ，ＭＨＰＧ和病脑组患儿Ｔｒｐ，ＨＶＡ浓度与其神经系统功能障碍程度呈正相关。提示脑脊液中单胺物质测定有助于化脑诊断及神经系统损害程度的评估。

抑制多胺生物合成对A549细胞生长及端粒酶激活的抑制作用

目的 :研究抑制多胺生物合成对肿瘤细胞生长及端粒酶活性的作用。方法 :以人肺腺癌A5 49细胞系为模型 ,MTT法观察细胞生长 ;流式细胞分析法、Mary Grnemrold法和DNALadder电泳法检测细胞凋亡 ;端粒酶重复扩增法测定端粒酶活性。结果 :经二氟甲基鸟氨酸 (DFMO)处理的A5 49细胞 ,其生长受到抑制 ,部分细胞发生凋亡 ,端粒酶活性被明显抑制 ,如同时加入外源性腐胺 ,上述现象消失。结论 :DFMO对多胺生物合成的抑制所引起的肿瘤细胞生长抑制及凋亡诱导 ,可能与其对端粒酶激活的抑制有关。

电化学检测器的研制及用以测定生物胺的初步实验

研制一种用于高压液相色谱(HPLC)的电化学检测器(ECD)。用该检测器检测了从色谱柱分离出的4种生物胺:肾上腺素(EA)、去甲肾上腺索(NE)、多巴胺(DA)和5-羟色胺(5HT)。结果显示:在0.25～2.25ng范围内线性响应良好;峰高重复性相对偏差2.3％(对1.0ng NE)。EA、NE、DA和5-HT的检测限分别为0.06、0.06,0.07,0.10 ng(信噪比为2.5:1)。

HPLC同时测定沙棘中的6种色胺类生物碱

目的采用HPLC法同时测定6种沙棘中的色胺类生物碱。方法采用Xcharge-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.15%三氟乙酸水溶液,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),检测波长280 nm,柱温30℃,进样量10μL。结果6种色胺类生物碱的线性范围分别为6.28~251.40、5.71~228.60、1.14~457.10、0.80~32.00、0.31~12.60、0.46~18.30μg·mL^(-1)(r^(2)>0.9993);其中,供试品中共检测到4种色胺类生物碱,分别是5-羟色胺、6-hydroxy-l-methyltetrahydro-β-carboline-1-carboxylic acid、shepherdine、L-色氨酸;平均加样回收率分别为93.63%、89.86%、91.58%、90.91%,RSD均<3.00%。结论所用方法简便、可靠、重复性好、结果准确。