离子液体介质中17α-羟基-16β-甲基孕甾-4,9(11)二烯-3,20-二酮微生物脱氢研究

考察了亲水性离子液体/Tris-HCl缓冲液混合溶剂体系中简单节杆菌催化甾类化合物17α-羟基-16β-甲基孕甾-4,9(11)二烯-3,20-二酮(简称HMPDD)的C1,2脱氢生成17α-羟基-16β-甲基孕甾-1,4,9(11)三烯-3,20-二酮(简称HMPTD)的反应过程,通过细胞相容性和对反应影响的研究,选择了[EMIM](L)-Lac作为用于该体系的离子液体,并对离子液体体积分数、初始底物质量浓度、菌体质量浓度和反应时间等条件进行了优化.结果表明,在含体积分数为0.3%的[EMIM](L)-Lac的Tris-HCl缓冲液(0.05mol/L,pH 7.5)体系中,当菌体干重质量浓度为13.1g/L,底物质量浓度为4g/L时,简单节杆菌催化HMPDD脱氢反应16h的转化率可达89.9%,较Tris-HCl缓冲液介质中的脱氢转化率提高10%,且反应时间缩短了8h.

微乳体系中11β-羟基甲羟孕酮的C_(1,2)生物脱氢

为改善过程传质,提高甾类药物中间体11β-羟基甲羟孕酮C1,2生物脱氢转化率,采用简单节杆菌Arthrobacter simplex UR016菌株在Tween-80/乙醇/食油/水构成的微乳体系中进行生物脱氢,并考察了微乳体系组成、转化温度、投料浓度对脱氢反应的影响。结果表明:以菌体培养液作为水相,食油作为油相构建微乳体系,食油最适加量为10g/L,表面活性剂Tween-80加量为4g/L;底物经醇溶后水析投料,乙醇最适加量为发酵液体积的7%(V/V);最适转化温度为33oC;当底物浓度为4g/L时,在构建的微乳体系中转化46h,脱氢转化率达88.6%,与水相转化工艺相比提高了66.2%。在该体系中疏水性11β-羟基甲羟孕酮底物得到了有效的增溶和扩散,生物脱氢转化率明显提高。

脱氢枞胺衍生物DHAA-urea对人肝癌HepG2细胞糖代谢的抑制作用(英文)

探讨脱氢枞胺衍生物DHAA-urea对有氧和乏氧状态的HepG2细胞的生长及糖代谢的影响。150μmol/L浓度氯化钴的无血清DMEM预培养24h致乏氧细胞模型,使用MTT法检测DHAA-urea(1～50μmol/L)分别对常氧和乏氧HepG2细胞的生长抑制情况。分别使用试剂盒检测DHAA-urea作用常氧与乏氧HepG2后细胞内ATP浓度,乳酸脱氢酶(LDH)以及葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)活性的变化。与正常对照组比较,DHAA-urea对常氧乏氧HepG2细胞的生长都具有明显的抑制作用,胞内ATP,LDH和G6PD含量与活性均受到抑制,且与DHAA-urea剂量和作用时间呈依赖性。DHAA-urea对HepG2细胞的生长抑制很可能与其抑制糖代谢导致能量耗竭相关。DHAA-urea是抗肿瘤领域较具发展潜力的新化合物。

水溶性C_(60)-脱氢枞胺衍生物的合成及生物活性

以C60-脱氢枞胺吡咯烷衍生物和C60-脱氢枞胺氮烯加成物为原料,通过两种不同的水性化途径分别合成了两种水溶性的C60-脱氢枞胺富勒醇衍生物和两种水溶性的C60-脱氢枞胺甘氨酸衍生物。产物经TEM、FT-IR、ESI-MS、1H NMR和HPLC等分析方法检测确认为目标产物,且为加成度不同的混合物。对合成出的4种水溶性C60-脱氢枞胺衍生物进行了生物活性测试。结果表明,4种水溶性C60-脱氢枞胺衍生物对rTaq DNA聚合酶和HIV-1反转录酶均表现出一定的抑制作用,对卵巢癌细胞株几乎不表现出抑制活性。

脱氢枞胺及其衍生物的应用研究进展

脱氢枞胺是歧化松香胺的主要成分,具有三环菲骨架结构,是松香重要的改性产品之一。本文综述了脱氢枞胺及其衍生物的应用研究进展,包括脱氢枞胺在手性化合物分离方面的应用和脱氢枞胺衍生物在抑菌、防腐、缓蚀、金属离子浮选、催化、抗癌、抗氧化、抗溃疡、可与雄性激素结合等方面的应用。指出目前脱氢枞胺成盐衍生物及脱氢枞胺N—C衍生物的研究较为广泛,脱氢枞胺B环和C环改性衍生物的研究仍需加强,而且对于B环和C环改性衍生物的深入研究,将进一步促进脱氢枞胺衍生物在生物活性方面的应用。最后对脱氢枞胺衍生物在生物医学工程上的应用前景进行了展望。

水飞蓟素及其脱氢衍生物的抗氧化活性研究

目的:建立DPPH·清除法测定水飞蓟素及其脱氢衍生物的抗氧化活性。方法:在紫外517nm处测定不同浓度的水飞蓟素及其脱氢衍生物溶液的吸光度。结果:水飞蓟素脱氢衍生物的抗氧化活性明显大于脱氢前的药物。结论:水飞蓟素的脱氢化衍生物均具有较强的抗氧化活性,值得进一步研究开发。

ESI-MS法研究N-苯甲酰基-脱氢枞胺衍生物与血管紧张肽Ⅲ的相互作用

采用电喷雾质谱法研究了4种新合成的N-苯甲酰基-脱氢枞胺衍生物(NBDD)———N-苯甲酰基-脱氢枞胺(NBD)、N-邻氯苯甲酰基-脱氢枞胺(NClBD)、N-苯甲酰基-脱氢枞胺-7-酮(NBDO)和N-邻氯苯甲酰基-脱氢枞胺-7-酮(NClBDO)与血管紧张肽Ⅲ(AngⅢ)的相互作用.结果表明,这4种化合物分别与AngⅢ以摩尔比1∶1,3∶1和5∶1混合时,均可形成化学结合计量比为1∶1和2∶1的非共价复合物,这些复合物主要电离为+2价离子[NBDD-AngⅢ+2H]2+和[(NBDD)2-AngⅢ+2H]2+.化学结合计量比为1∶1的NBDD-AngⅢ复合物+2价离子的稳定性顺序为:NBDO-AngⅢ>NClBDO-AngⅢ>NClBD-AngⅢ>NBD-AngⅢ;在化学结合计量比为2∶1的(NBDD)2-AngⅢ复合物中,2个NBDD分子与AngⅢ的结合形式为NBDD-AngⅢ-NBDD.

简单节杆菌17α-羟基-16β-甲基-孕甾-4,9(11)二烯-3,20-二酮脱氢酶产酶条件研究

目的优化简单节杆菌17α-羟基-16β-甲基孕甾-4,9(11)-二烯-3,20-二酮(简称HMPDD)脱氢酶产酶条件。方法采用摇瓶培养方法,考察培养基组成及发酵条件对HMPDD转化率的影响。结果较佳产酶培养基为:葡萄糖0.4%、玉米浆1.2%、KH2PO40.2%、蛋白胨0.3%。较佳产酶条件为:培养基初始pH7.0;接种量20%;摇瓶装量100mL/250mL三角瓶;接种后4h内添加0.05g/L底物作为诱导物对产酶有利;添加10-4mol/LCo2+和Mg2+,可使酶活分别较对照提高12.9%和6.1%;菌体培养12h时酶活达最大值,为24.46μmol/g·min。结论通过培养基组成及产酶条件的优化,酶活力有较大幅度的提高。

简单节杆菌催化17α-羟基-16β-甲基孕甾-4,9(11)二烯-3,20-二酮脱氢动力学研究

作为倍他米松合成的重要环节,本文研究了简单节杆菌催化17α 羟基 16β 甲基孕甾 4,9(11)二烯 3,20 二酮的C1,2微生物脱氢生成17α 羟基 16β 甲基孕甾 1,4,9(11)三烯 3,20 二酮的反应.考察了不同菌体量和底物质量浓度对反应初速度的影响,结果表明,提高菌体质量浓度有利于提高反应速率,反应初速度与底物质量浓度的关系符合米氏方程.考虑底物及产物的固液平衡以及产物抑制,建立了相应的动力学模型,并对不同初始底物质量浓度下的格氏物间歇脱氢反应过程曲线进行了拟合,模型计算值与实验值吻合较好.

新型N-苯甲酰基-脱氢枞胺衍生物的电喷雾离子阱质谱行为研究

利用电喷雾离子阱质谱(ESI-IT-MS)技术,对8个具有潜在杀菌、抗癌生物活性的三类新型N-苯甲酰基-脱氢枞胺衍生物进行了ESI质谱行为研究。结果表明,由于7位、12位及苯甲酰基上取代基的不同,三类衍生物呈现出一定的电离及碎裂特性。在(±)-ESI-MS过程中,7-肟基类衍生物(A)和12-硝基类衍生物(C)比7-羟基类衍生物(B)更易产生二聚体;A易产生[M-H_2O+H]^+,C则更易负离子化。在(+)-ESIMS/MS过程中,A中7-肟基的存在使其易产生特征离子碎裂峰[M-35+H]^+和[M-H_2O+H]^+;A的18位酰基脱水离子峰[M-H_2O+H]^+失去一分子取代苯甲腈产生系列偶数碎裂离子峰;A的7-肟基脱水离子峰[M-H_2O+H]^+失去一分子取代苯甲醛产生系列奇数碎裂离子峰。在(-)-ESI-MS/MS过程中,B比C更稳定,在较高的碰撞能作用下获得的碎裂片段较少;均可通过丢失中性分子N-取代苯甲酰基亚甲胺、取代苯甲醛或取代苯产生系列碎裂离子片段;C的强吸电子基团12-硝基及4'-硝基的存在使其丢失的中性分子易捕获电子而离子化。

基于碳纳米管修饰电极的脱氢酶传感器研究进展

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+/NADH)是目前已知300多种脱氢酶的辅酶,通过对NADH的检测,可以间接测定底物浓度或酶活力。如何利用电化学技术实现NADH的准确、快速、稳定检测,一直是电化学及生物传感领域的重要课题。碳纳米管(CNT)的发现为NADH的电化学检测注入新的生机。本文综述了近年来碳纳米管修饰电极在NADH电化学检测及脱氢酶生物传感器构建中的应用进展,并展望了其应用前景。

偶发分枝杆菌MF2和MF96生物转化差异的机理研究

偶发分枝杆菌(Mycobacteriumfortuitum)亲株(MF2)和突变株(MF96)存在生物转化差异,通过静息细胞系统转化研究发现在反应达到平衡后,亲株中产物大部分以雄甾烯二酮(△4-androstenedione,4AD)的形式存在,而突变株中产物大部分为睾酮(testosterone,TS)。为了研究二者的转化差异,采用无细胞系统转化的手段进行了比较研究,结果表明在添加足量的NAD+和NADH后,亲株和突变株的转化产物比例基本相同。由此推测在静息细胞中的转化产物比例不同可能是由于辅酶NAD+与NADH的比例不同引起的。最后通过测定亲株和突变株中辅酶NAD+和NADH的比例证实该推测是正确的。

脱氢枞胺衍生物DHAA-urea对SMMC-7721细胞生长及凋亡影响

目的：探讨脱氢枞胺衍生物DHAA-urea对SMMC-7721细胞的生长及凋亡的影响。方法：MTT法检测DHAA-urea（1~50μmol·L-1）分别对SMMC-7721细胞的生长抑制。分别使用试剂盒检测DHAA-urea作用SMMC-7721后细胞内ATP浓度及凋亡率的变化。结果：与正常对照组比较,DHAA-urea对SMMC-7721细胞的生长具有明显的抑制作用并降低胞内ATP水平,且与DHAA-urea剂量和作用时间呈依赖性。DHAA-urea诱导细胞凋亡并呈现剂量相关性。结论：DHAA-urea可以抑制体外SMMC-7721细胞的生长,可能与其诱导凋亡伴耗竭细胞能量相关。

基于均相时间分辨荧光高通量筛选模型的脱氢枞胺衍生物酪氨酸激酶抑制活性研究(英文)

蛋白酪氨酸激酶已成为引人注目、治疗多种疾病的新靶点。本研究建立了基于均相时间分辨荧光技术的高通量筛选模型,用于筛选脱氢枞胺系列衍生物的酪氨酸激酶抑制活性。构效关系分析发现具有氮侧链的脱氢枞胺衍生物有较好的酪氨酸激酶抑制活性,有卤素取代苯环基的脱氢枞胺衍生物具有较好的表皮生长因子受体抑制活性。该研究结果显示:脱氢枞胺衍生物经结构改造有望开发成为一类新型、多靶点、高效的蛋白酪氨酸激酶抑制剂。

新型基质对生物膜微生物数量和酶活性的影响

为了探究新型人工基质能否对水体微环境起到改善作用,对同一河段中种植植物的新型人工基质、新型人工基质和石头基质上生物膜磷酸酶、脲酶和脱氢酶活性及微生物总数进行测定。结果表明,微生物数量在秋季最高,磷酸酶和脲酶活性在秋季最高,而脱氢酶活性夏季最高、秋季最低。在同一季节,3种酶活性都表现出种植植物的新型人工基质>新型人工基质>石头基质的趋势,微生物数量的变化趋势也与此一致。新型人工基质相对石头基质显著提高了生物膜上的微生物总数和磷酸酶、脲酶和脱氢酶活性。

动物体内共轭亚油酸产生机制及影响含量的因素

共轭亚油酸 (CLA)是一种主要从反刍动物脂肪和牛奶产品中发现的天然活性物质。亚油酸和亚麻酸在反刍动物瘤胃内通过异构化和生物脱氢反应形成CLA ,反式脂肪酸在动物细胞内经Δ9-脱氢酶的脱氢作用也能形成CLA。动物体内CLA含量与食物中的亚油酸、亚麻酸和反式油酸含量呈正相关 ,并受食物成份、季节变化和肠道微生物的影响。

焦化废水处理技术研究进展

重点介绍了国内外处理焦化废水的生物强化技术 。

立体专一性地合成Z-式2-烷氧羰基氨基-4-苯基-2-丁烯酸及酯

通过酸、碱催化异构化不稳定的 E-异构体 ,从 β-苯乙醇出发 ,经 4步反应高度立体选择性地合成了 Z-脱氢氨基酸衍生物 ,Z-式含量可高达 99%以上。