细菌生物被膜形成的影响因素及检测方法的研究进展

细菌生物被膜(BBF)的存在大大增加了生物被膜(BF)内细菌的存活率和耐药性,生物被膜的研究已经成为研究细菌耐药机制及致病性的重要方向,了解细菌生物被膜形成中的影响因素及生物被膜的检测方法,对生物被膜的研究有重要意义。文章重点综述了细菌生物被膜形成的影响因素及常用的实验室检测方法。

丁香叶干预猪链球菌体外生物被膜形成有效部位的筛选

为了研究丁香叶水提取物的不同有机溶剂萃取物对猪链球菌体外生物被膜(BF)的干预作用,确定丁香叶发挥作用的有效部位,试验采用结晶紫染色(CV)的方法对其进行了研究。结果表明:乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物对猪链球菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为6.25μg/μL、12.5μg/μL;3.125,1.562 5,0.781 25μg/μL乙酸乙酯萃取物对猪链球菌生物被膜干预作用的影响极显著(P<0.01)。说明抑制猪链球菌生物被膜形成的有效部分为乙酸乙酯部分。

大环内酯类抗生素对细菌生物被膜作用的研究进展

细菌生物被膜(BBF)是一类由生物大分子包裹细菌而形成的具有特殊复杂结构的微克隆多细胞群体,由其感染所引起的疾病具有迁延不愈、反复发作等特点,在临床上有较大危害性。当前临床上用于治疗细菌生物被膜疾病的药物主要集中于大环内酯类抗生素,文章综述了细菌生物被膜结构特点和大环内酯类抗生素的药效动力学,并将大环内酯类抗生素清除、抑制细菌生物被膜的主要机理归纳为阻碍细菌黏附过程、破坏细菌生物被膜基础结构和干扰细菌的群体感应系统。

慢性阻塞性肺疾病细菌生物膜检测及耐药性分析

目的研究慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者细菌生物膜检测及耐药机制。方法100例慢性阻塞性肺疾病（c0PD）住院患者痰液标本采用刚果红培养法，检测细菌生物膜形成，K—B琼脂扩散法进行抗菌药敏试验。结果检测到G＋细菌中14株产生生物膜（阳性率58．3％），其中金黄色葡萄球菌9株，表皮葡萄球菌5株；G-细菌中10株产生生物膜（阳性率17．3％），其中普通变形杆菌6株，铜绿假单孢菌4株；产生生物膜的葡萄球菌呈多重耐药，对复方新诺明耐药明显较重，且高于无生物膜葡萄球菌（x2=4．03，P〈o．05）；有生物膜的铜绿假单孢菌／普通变形杆菌对哌拉西林和阿米卡星的耐药率明显比无生物膜的高（x2=6．43，P〈0．05）。结论细菌生物膜形成的实验室检查对COPD患者临床抗生素的使用有极大帮助。

猪胸膜肺炎放线杆菌生物被膜形成与抑制机制的研究

猪胸膜肺炎放线杆菌(App)引起猪的慢性呼吸道感染,给养猪业造成重大的经济损失。细菌生物被膜(BBF)是细菌为适应自然环境,吸附于生物材料或机体腔道表面保护细菌逃逸形成的细菌群落,由此引起的相关感染性疾病及慢性感染的反复发作称为细菌生物被膜病。App生物被膜(BF)属于菌体外具有空间结构的聚合物,其形成受多种基因调控,其中多药耐药外排泵和Ⅰ型分泌系统关键成分TolC基因缺失导致AppBF黏附减弱;Clp蛋白水解复合物的催化核心ClpP基因缺失引起BF形成受到抑制;App外膜脂蛋白VacJ促进BF的形成;活性酶LuxS基因缺失显示增强AppBF的形成,并减少细菌黏附能力;Adh基因缺失明显降低细菌的积聚、BF形成和对宿主细胞黏附。文章从分子水平上阐述AppBF形成或抑制机制,为探讨防制其生物被膜病提供参考依据。

穿心莲内酯对铜绿假单胞菌PAO1生物被膜形成的影响及对lasR/rhlR表达的调控机制

目的:研究穿心莲内酯对铜绿假单胞菌PAO1生物被膜(BF)形成的影响及对群体感应系统(QS)相关基因lasR/rhlR mRNA表达的调控作用。方法:利用扫描电镜(SEM)和透射电镜(TEM)直接观察在不同浓度穿心莲内酯(3μg/ml和30μg/ml)作用下,培养72 h的PAO1 BF的生长状态;采用结晶紫定量测定法定量检测穿心莲内酯在300、250、200、150、100、50、25、15、10、5μg/ml剂量下,对72 h内PAO1形成BF厚度的影响;采用实时定量荧光PCR(Real-Time PCR)法考察穿心莲内酯对PAO1 BF形成相关基因lasR/rhlR mRNA表达的影响。结果:空白对照组PAO1在培养72 h后可形成分化成熟、较厚、密布有孔状通道,并在PAO1菌体周围呈团块、形态似"塔状"或"蘑菇状"的不规则BF结构,穿心莲内酯低剂量(3μg/ml)下,BF明显稀薄且平整,高剂量(30μg/ml)下,PAO1分散附着,均未见明显的BF结构。穿心莲内酯在300、250、200、150、100、50、25、20、10、5μg/ml剂量下,72 h内均可影响PAO1 BF的生长,在20μg/ml以上剂量,12、24、36、48、60、72 h时BF厚度明显变薄。与空白组比较,穿心莲内酯在37.5、75μg/ml剂量下均可下调lasR和rhlR基因mRNA的表达。结论:穿心莲内酯可以抑制PAO1 BF形成,该作用机制与下调细菌QS系统中lasR/rhlR基因mRNA表达相关。

白芍总苷对细菌生物膜影响的研究

目的研究白芍总苷对金黄色葡萄球菌及大肠杆菌体外培养生物膜（biofilm,BF）形成及清除作用的影响,为中药白芍总苷开发利用及临床辅助治疗提供实验依据.方法：通过微孔板改良法构建金黄色葡萄球菌及大肠杆菌BF 体外模型,采用试管二倍稀释法测定白芍总苷最低抑菌浓度（MIC）,研究其对两种细菌BF 形成的影响;同时通过检测对成熟BF 中活菌数的影响,评价白芍总苷对BF 的清除作用. 结果：白芍总苷对金黄色葡萄球菌及大肠杆菌的MIC 分别为4.48mg/ml 和9.38mg/ml.白芍总苷可在早期阶段干扰细菌BF 的形成;白芍总苷还可以抑制并有效清除成熟BF,其高浓度抗菌活性与青霉素/庆大霉素相比无显著性差异. 结论：白芍总苷在体外具有抑制细菌BF 形成的作用,并能通过破坏已形成的BF 起到杀灭相应细菌的作用,为临床辅助治疗耐药性感染,提供实验依据.