生物表面活性素分离纯化技术进展

阐述了沉淀法、萃取法、色谱法、超滤、吸附、泡沫分离法、液膜分离法在生物表面活性素(surfactin)分离纯化中的应用进展,并强调了各分离纯化方法的选择与综合应用。原位分离技术(ISPR)是将分离纯化与生产发酵过程相耦合的技术之一,代表了生物表面活性素工业规模生产的发展方向。

生物表面活性素体外抗猪细小病毒活性研究

研究了生物表面活性素(surfactin)体外抗猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)效果。观察生物表面活性素的细胞毒性,对PPV直接灭活作用,抗PPV吸附作用及对PPV生物合成抑制作用。结果表明,生物表面活性素对猪肾(porcine kidney,PK-15)细胞的TD50和TD0分别为31.25,4.03μg/mL;具有直接灭活PPV效果,不具有抗PPV吸附作用,对PPV生物合成无显著影响。

枯草芽孢杆菌ATCC2233产生表面活性素的研究

薄层层析定性分析结果表明枯草芽孢杆菌ATCC2 2 33能够产生Surfactin ,生长曲线表明菌体生长和产Surfactin的过程不同步。透明圈测定结果表明产Surfactin的最适温度为 37℃ ,最适pH为 7 0。Surfactin能够显著降低水 -空气之间的表面张力。

肽类生物表面活性剂中消泡剂的分离研究

本研究首次建立硅胶柱层析两步法以去除抗菌脂肽粗品中所含有的大豆油消泡剂成分,实验中采用高效液相色谱（HPLC）检测抗菌脂肽的含量,薄层色谱-可见光分光光度法定量分析消泡剂中甘油三酯含量,TLC法筛选大豆油的洗脱流动相。研究结果表明：使用200～300目的硅胶作为层析材料,硅胶的总负载量为12.5mg/g时,采取混合液（石油醚∶乙酸乙酯∶乙酸=20∶2∶1,体积比）为流动相,以1mL/min流速进行洗脱,可将97.97%的大豆油成分去除;第二阶段采用流动相为100%的乙醇以1mL/min流速进行洗脱可将抗菌脂肽解吸,抗菌脂肽的总回收率达到91.52%,纯度从34.07%提高到93.12%。本研究为肽类生物表面活性剂工业化生产和应用提供实验依据。

复合生物防腐剂杀菌效果优化及草莓保鲜效果研究

为研究复合生物防腐剂(ε-聚赖氨酸、乳酸链球菌素、生物表面活性素质量百分比1:1:1混合)能否代替化学性食品防腐剂,通过敏感性测定、杀菌优化实验,草莓防腐应用试验,研究了其对指示菌点青霉的抑制效果。结果表明,点青霉对复合生物防腐剂较为敏感,其抑菌圈直径为18.73mm。利用响应曲面法对复合防腐剂杀灭点青霉孢子作用优化后,在温度为4.40℃、作用时间为9.95h、浓度为0.96mg/mL的情况下可以将基质中的点青霉孢子降低4个数量级。草莓防腐试验表明在自然贮藏10d其最高防效可达85.2%,防腐效果显著。

枯草芽孢杆菌G3菌株的抗菌物质及其特性

产几丁质酶枯草芽孢杆菌G3菌株的固体培养物在黄瓜灰霉病菌和番茄叶霉病菌抑菌试验中证实,抑菌活性物质存在于过滤上清液中,它们是从酸沉淀物中提取出的伊枯草菌素、生物表面活性素和存在于盐析粗蛋白中的几丁质酶。在叶霉孢子萌发试验中,伊枯草菌素微弱地抑制孢子萌发但强烈破坏芽管和新生菌丝;生物表面活性素和几丁质酶则强烈抑制孢子萌发并长久性地抑制芽管伸长。在PDA平板上的灰霉菌丝抑菌试验中,伊枯草菌素抑制菌丝生长,引发菌丝顶端膨大,形成泡囊,泡囊破裂后原生质外泄;几丁质酶抑制菌丝生长,引发产生不规则的菌丝团;生物表面活性素在平皿上对菌丝则不显示出抑菌活性。