新型吲哚醌类生物还原活性物629的细胞毒性和辐射增敏作用的研究

研究丝裂霉素C(MitomycinC,MMC)的衍生物-新型吲哚醌类生物还原活性物629的细胞毒性和辐射增敏作用。采用四氮甲基唑蓝(Methylthiazolyltetrazolium,MMT)比色法研究MMC和629对HepG2细胞的细胞毒性以及629对肝原代细胞的细胞毒性,结果表明629对肝原代细胞无毒性作用,而其对HepG2肝癌细胞的毒性要高于其母体化合物MMC;此外,采用体外细胞克隆培养法观察MMC和629对HepG2细胞的辐射增敏作用,结果显示629的辐射增敏效果强于MMC。上述研究提示,629具有低毒的增敏效果,在临床上将具有广泛的应用远景。

生物还原活性物的研究进展

生物还原活性物是一类通过在生物体内还原而产生活性的化合物，这是放射增敏研究领域中较为活跃的内容。本文就国内外研究较多的几种生物还原活性物及其它醌类化合物的化学结构、生物学活性、作用机理等进行综述，并介绍ＳＲ－４２３３的临床研究结果。

人肝微粒体CYP亚型在新型吲哚醌类化合物629代谢中的作用

目的研究人肝微粒体重组体系中不同CYP亚型在丝裂霉素C(MMC)的衍生物5-氮丙啶-3-羟甲基-1-甲基吲哚-4,7-二酮[5-(aziridin-1-yl)-3-hydroxymethyl-1-methylin-dole-4,7-dione,简称629]代谢中的作用。方法不同浓度629与人肝脏微粒体共孵育,给予细胞不同CYP亚型特异性抑制剂的处理,用高压液相色谱法(high pressure liquid chro-matography,HPLC)分离、检测629的消失情况。结果HPLC检测到629在肝脏微粒体中的代谢遵循酶动力学剂量效应关系,Km值为336μmol·L-1。P450酶系中CYP1A2、CYP2B6和CYP2A6被抑制后,可影响629的代谢(P<0.05),并且3者中CYP1A2的影响较大,但三者间差异无显著性(P>0.05);而CYP3A4、CYP2C19、CYP2C9、CYP2E1和CYP2D6对629的代谢无影响(P>0.05)。结论新型吲哚醌类生物还原物629可在肝脏代谢,其中CYP1A2、CYP2B6和CYP2A6可参与629的代谢,这为新型生物还原活性物设计、开发及临床上的合理用药具有重大的意义。

转染结构性雄烷受体对丝裂霉素C和5-氮丙啶-3-羟甲基-1-甲基吲哚-4,7-二酮的细胞毒性的影响

研究丝裂霉素C(MMC)及其衍生物5-氮丙啶-3-羟甲基-1-甲基吲哚-4,7-二酮[5-(aziridin-1-yl)-3-hydroxymethyl-1-methylindole-4,7-dione,629]的细胞毒性,以及结构性雄烷受体(constitutive androstane receptor,CAR)转染对其生物学效应的影响。将质粒mCAR/pCR3转染HepG2细胞,经G418耐药性筛选获得转染CAR的g2car细胞,以转染空载体pCR3(HepG2/pCR3)作为对照。用RT-PCR检测质粒和CYP2B6 mRNA的表达,用MTT法评价MMC和629对g2car细胞和HepG2细胞在有氧和乏氧条件下的细胞毒性。RT-PCR检测到CAR和CYP2B6 mRNA在g2car细胞中有表达,在HepG2细胞中无表达;此外,在乏氧情况下,MMC和629的细胞毒性比在有氧情况下均有所增加(P<0.05),并且转染CAR以后,两者的细胞毒性均增加,但对MMC的影响较明显(P<0.05),对629的影响不明显(P>0.05)。提示CAR可在转录水平调节药物的代谢,提高药物的毒性;CYP2B6可以主要代谢MMC,但不主要代谢629。转染CAR基因可以增加细胞CYP2B6 mRNA的表达,并可引起MMC和629毒性的改变。

细胞色素P-450与电离辐射的关系

电离辐射可以改变细胞色素P-450(主要有CYP1B1、CYP1A1、CYP4A11、CYP2E1等)的活性和(或)mRNA、蛋白含量,从而影响药物代谢和有毒化学物的生物转化过程及其生物学作用。细胞色素P-450参与了生物还原活性物TMQ、AQ4N在机体内的还原。动物实验和已有的临床研究表明,调节P-450可以提高生物还原活性物的辐射增敏作用和抗肿瘤作用。

629Ac的乏氧细胞毒性

目的研究丝裂霉素C(MMC)衍生物629Ac(5-吖丙啶-3-羟甲基乙酸酯基-1-甲基吲哚-4,7-二酮)的乏氧细胞毒性,为629Ac作为新型辐射增敏剂的应用提供实验和理论依据。方法在有氧和乏氧条件下用MTT法研究MMC和629Ac的IC50(半数抑制浓度)及C1.6(增敏比达1.6的化合物浓度)。结果乏氧条件下629Ac对HepG2细胞的IC50比有氧条件下低;乏氧和有氧条件下,629Ac的IC50比MMC的IC50都小;对于HepG2细胞,MMC具有乏氧选择性辐射增敏作用,其C1.6比629Ac大,且629Ac在有氧条件下也有辐射增敏效应。结论初步研究结果表明,对于HepG2细胞629Ac具有乏氧细胞毒性和辐射增敏效应,并且这些效应都强于MMC。

化学修饰剂的研究现状

化学修饰剂对肿瘤细胞具有增敏作用，近期的研究显示其中的生物还原活性物在恶性肿瘤治疗中有放射增敏和化学增敏作用，因此引起广泛的重视。本文综述化学修饰剂中研究较多的生物还原活性物的主要作用机理及其临床Ⅰ、Ⅱ期的试验结果，展示其可喜的临床应用前景。