L-肉碱对糖尿病大鼠生精细胞凋亡及附睾精子数量和活动率的影响

目的:探讨L-肉碱(LC)对糖尿病(DM)大鼠生精细胞凋亡及附睾精子数量和活动率的影响。方法:24只雄性SD大鼠随机均分为3组,一组作为对照组,剩余两组分别注射链脲佐菌素(STZ,65 mg/kg)建立DM模型。建模成功后,各组大鼠分别给予如下灌胃剂量:对照组:生理盐水;DM模型组:生理盐水;LC组:300 mg/kgLC溶液,连续灌胃6周。末次给药24 h后,麻醉处死所有大鼠,分别进行附睾精子计数并检测精子活动率,流式细胞术检测各组大鼠睾丸生精细胞凋亡情况。结果:用LC治疗后的大鼠附睾头、尾精子活动率(%)分别为53.7±1.8和60.3±1.6,显著高于DM模型大鼠(分别为32.2±2.0和40.5±1.4,P<0.05),但低于对照组大鼠精子活动率63.1±2.4和68.9±1.3。与对照组附睾尾精子相对计数[(37.8±1.1)×106/100 mg]相比,DM组显著减少[(25.5±1.1)×106/100 mg],且具有统计学差异(P<0.05);LC治疗后大鼠附睾尾精子相对计数[(32.0±1.5)×106/100 mg]比DM组显著增加(P<0.05),但仍低于对照组。与对照组生精细胞凋亡率[(3.7±1.3)%]相比,DM组生精细胞凋亡率[(52.5±4.4)%]显著上升(P<0.05);经LC治疗后,LC组大鼠生精细胞凋亡率为(35.3±3.5)%,比DM组显著降低(P<0.05),但仍显著高于对照组。结论:LC(300 mg/kg)灌胃DM大鼠6周,可以减少DM大鼠生精细胞凋亡,增加附睾精子数量,提高精子活动率。

性激素水平对染氟大鼠生精细胞凋亡的调节作用

目的探讨性激素水平对染氟大鼠生精细胞凋亡的调节作用。方法通过腹腔注射氟化钠(NaF)溶液的方法建立大鼠氟中毒模型,采用放射免疫的方法检测血清睾酮和雌二醇水平,采用末端标记法(TUNEL)检测凋亡的生精细胞。结果①NaF10、20mg·kg-1·(2d)-1染毒28d时,睾酮水平为(10.39±0.54)、(8.34±1.29)nmol/L,较对照组降低(P<0.05或0.01);染毒38d时,睾酮水平为(9.82±0.66)、(6.33±0.68)nmol/L,较对照组降低(P<0.01)。②NaF10、20mg·kg-1·(2d)-1染毒28d时,雌二醇水平为(44.24±11.32)、(36.27±3.00)pmol/L,较对照组降低(P<0.01);染毒38d时,雌二醇水平为(42.90±9.81)、(26.02±16.14)pmol/L,较对照组降低(P<0.01)。③与对照组相比,各染氟组生精细胞凋亡率均升高(P<0.01)。④生精细胞凋亡率与血清睾酮水平呈负相关(r值为-0.901～-0.886),与血清雌二醇水平呈负相关(r值为-0.989～-0.936)。结论氟在一定剂量和作用时间内可致大鼠血清性激素水平紊乱,是导致生精细胞凋亡的重要原因之一。

P16蛋白和生精细胞凋亡对热压和11酸睾酮诱导的恒河猴无精子症和少精子症中的作用

探讨了P16蛋白和生精细胞凋亡在热压和 11酸睾酮诱导恒河猴无精子症和少精子症中作用间的关系。3′末端标记分析 (TUNEL)结果显示热应激和超生理剂量睾酮能够诱导生精细胞出现凋亡信号 ,它分别于处理后第 5天和第 30天达到最强。免疫组化结果显示 ,热压或TU主要诱导精原细胞和其它生精细胞以及Sertoli细胞P16的表达。P16蛋白的表达在生精细胞凋亡晚期 ,即隐睾手术第 10天或注射TU第 6 0天后迅速升高并维持高表达 ,该蛋白在生精细胞凋亡晚期可能通过抑制精原细胞的有丝分裂 ,扰乱正常的精子发生。上述结果提示 ,在热压或 11酸睾酮诱导的早期精母细胞和精子细胞的凋亡和在晚期对精原细胞有丝分裂的抑制 ,二者共同作用导致热压或TU诱导的恒河猴无精子症和少精子症。

弓形虫感染与生精细胞凋亡关系的研究

目的 探讨弓形虫感染与生精细胞凋亡的关系。方法 采用瑞-姬染色和末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的脱氧核苷酸原位末端标记法(TUNEL)检测弓形虫感染小鼠精子悬液的凋亡生精细胞。结果 弓形虫感染组生精细胞凋亡率明显高于正常对照组(P<0.05)。结论 弓形虫感染可能有促进生精细胞凋亡的作用。

天年饮对亚急性衰老大鼠睾丸组织SOD活性及生精细胞凋亡的影响

目的 :观察天年饮 (Tiannianyin ,TNY)对亚急性衰老大鼠睾丸组织超氧化物歧化酶(Superoxidedismutase ,SOD)的活性及对睾丸生精细胞凋亡的影响。方法 :采用D -半乳糖连续腹腔注射制作亚急性衰老大鼠模型 ,检测TNY灌胃前后大鼠血清睾酮含量、睾丸组织SOD的活性及睾丸生精细胞凋亡的情况。结果 :D -半乳糖致亚急性衰老大鼠血清睾酮含量及睾丸组织SOD的活性均明显下降 ,与正常大鼠比较差异显著 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ;经TNY灌胃后二者均升高接近正常水平 ,与模型大鼠相比有明显差异 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。D -半乳糖致亚急性衰老大鼠睾丸曲细精管凋亡百分率及凋亡细胞阳性率均升高 ,与正常组比较差异显著 (P <0 0 5 ) ;经TNY灌胃后 ,二者均降低 ,与模型大鼠比较有明显差异 (P <0 0 5 )。结论 :TNY可提高亚急性衰老大鼠血清睾酮含量、睾丸组织SOD的活性及降低衰老大鼠睾丸生精细胞的凋亡指数 ,具有一定延缓性腺衰老的作用。

HSF2 mRNA在热应激和大剂量11酸睾酮诱导恒河猴生精细胞凋亡中的表达变化

为了探讨HSF2mRNA在热应激和超生理剂量睾酮诱导恒河猴生精细胞凋亡中的表达变化 ,我们建立了手术诱导单侧隐睾和注射大剂量 11酸睾酮 (TU)恒河猴动物模型 ,应用 3′末端标记分析 (TUNEL)和原位杂交方法 ,检测睾丸细胞的凋亡信号和HSF2的表达变化。TUNEL结果显示热应激和超生理剂量睾酮能够诱导生精细胞出现凋亡信号 ,它分别于处理后第 5天和第 30天达到最强 ,表明热应激和睾酮干扰精子发生可能是通过生精细胞凋亡的方式来实现的。HSF2mRNA水平在生精细胞凋亡早期 (凋亡信号达到最强以前 )略有降低 ,而在凋亡高峰期之后其表达急剧下降。Hsf2基因与我们以前研究的Hsp70 2基因的表达具有时间上的相关性 ,表明HSF2蛋白可能调控Hsp70 2基因的表达 ,而且HSF2可能通过多种方式影响精子的发生以及抑制生精细胞的凋亡。

砷对大鼠生精细胞凋亡的影响

砷是已肯定的生殖毒物之一，但关于砷对雄（男）性生殖系统的毒性作用的分子机制尚不清楚。本实验通过检测慢性砷中毒大鼠睾丸脏器系数、精子头数、每日精子生成量（DSP）及生精细胞凋亡情况，探讨砷对精子发生的影响，为进一步探讨砷致雄（男）性生殖毒性机制提供基础资料。结果显示，随染砷剂量的增加，大鼠出现睾丸生精上皮结构变疏松，生精上皮细胞层次紊乱，甚至部分生精小管基膜溶解、管腔中成熟精子减少、小管间隙增宽、细胞体积缩小、间质出现水肿、渗出等病理改变；睾丸精子头计数及DSP逐渐减少，中、高剂量组变化尤其明显。

生精细胞凋亡及相关中医药治疗概述

生精细胞凋亡在精子的发育、成熟过程中起着重要的作用,而过度凋亡则可能是男性不育的病理环节。目前针对生精细胞凋亡并无特效治疗方法,中医药在此方面有一定优势。就生精细胞凋亡与不育症的关系及相关中医药干预情况做一综述。

通精灵对精索静脉曲张模型大鼠生精细胞凋亡及凋亡因子Cyt C、caspase-9的影响

[目的]探讨通精灵对精索静脉曲张模型大鼠睾丸组织的保护作用及与凋亡因子细胞色素C(cytochrome C,Cyt C)、半胱氨酸蛋白酶-9(cysteine aspartic acid specific protease-9,caspase-9)表达的关系。[方法]72只SPF级Wistar大鼠,随机分成假手术组、模型组、通精灵低、中、高剂量组及左卡尼汀组。采用左肾静脉部分结扎法联合"夹尾激怒法"建立实验性精索静脉曲张合并中医肝气郁结证候复合大鼠模型。模型建立后,通精灵低、中、高剂量组分别给予浓度为1.6、3.2、6.4g·m L-1通精灵生药水煎液灌胃,假手术组和模型组予以0.9%氯化钠溶液灌胃,左卡尼汀组则予0.021g·mL-1左卡尼汀口服液灌胃,以上各组灌胃体积均为1mL/100g体质量,1次/d,持续8周。以HE染色观察睾丸组织结构;TUNEL染色和Annexin V-FITC法检测生精细胞凋亡情况;Western blot检测睾丸组织中Cyt C、caspase-9的表达。[结果]模型组中睾丸组织发生明显病理损伤,而通精灵各剂量组及左卡尼汀组中睾丸的病理损伤有不同程度改善。模型组中睾丸生精细胞凋亡率明显高于假手术组,差异有统计学意义(P<0.05),通精灵中、高剂量组及左卡尼汀剂量组中生精细胞凋亡率明显低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。Western blot提示,模型组大鼠睾丸组织中Cyt C、caspase-9蛋白表达显著高于假手术组(P<0.01);通精灵中、高剂量组及左卡尼汀组中Cyt C、caspase-9表达低于模型组(P<0.05或P<0.01);高剂量组中Cyt C、caspase-9蛋白表达明显低于左卡尼汀组(P<0.05,P<0.01)。[结论]通精灵可以有效改善精索静脉曲张大鼠睾丸组织损伤,降低Cyt C和caspase-9的表达,从而调控生精细胞的凋亡。这可能是通精灵改善精索静脉曲张患者生育能力的机制之一。

大鼠单侧隐睾对侧睾丸生精细胞凋亡与T-AOC、MDA和Bcl-2基因表达的关系

目的探讨大鼠单侧隐睾对侧睾丸生精细胞凋亡发生机制。方法将SD雄性大鼠20只随机分为实验组(10只)和对照组(10只),建立单侧隐睾大鼠模型。术后90d取手术对侧睾丸,采用TUNEL法检测生精细胞凋亡,免疫组化SP法检测Bcl-2基因表达,化学比色法测定睾丸组织中总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)的含量。结果实验组手术对侧睾丸重量减轻,生精细胞凋亡指数(AI)增高,Bcl-2基因表达降低,总抗氧化能力下降,丙二醛含量增高,与对照组相比,两组差别具有显著性(P<0.01)。结论大鼠单侧隐睾可导致对侧睾丸生精细胞过度凋亡,生精功能严重受损,致使生育能力下降。

高锌引起生精细胞凋亡的动物实验研究

目的探讨高锌对雄性小鼠生精细胞凋亡的影响 ,为临床补锌提供指导。方法将雄性小鼠随机分为四组 ,对照组用普通饲料喂养 ,实验组分为3组 :分别用含不同剂量的高锌饲料喂养 ,用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法(TUNEL)检测睾丸生精细胞凋亡。结果实验组的细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05)。结论高锌引起雄性小鼠生精细胞凋亡增加。

巨细胞病毒感染、包涵体形成与生精细胞凋亡及不育症

本文就巨细胞病毒感染的病原学、流行病学、传播途径、发病机制、细胞病变效应和包涵体侵入细胞过程进行了介绍。对血管内皮细胞脂质体的形成,多发性骨髓瘤浆细胞内包涵体类型,精液中生精细胞内检出的6种包涵体类型和形态特征进行了描述。由病毒感染对精子运动的影响和生精细胞凋亡与男性不育,进行报道。

生精细胞凋亡与P53

精子发生始于精原细胞的克隆扩增,经细胞的分化、有丝分裂、减数分裂、变态,最终形成精子.精子发生受到许多因素的调节,其中最主要受激素控制,促性腺激素释放激素(gonadotropin releasing hormone,GnRH)、卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)、黄体生成素(luteinising hormone,LH)、雄激素等是生精细胞的存活因子[1].细胞内分子对精子发生的调节也不容忽视,如cAMP反应元素调节子(cyclin AMP-responsive element modulator,CREM)在减数分裂后精子细胞中高表达,是一种转录因子,CREM基因突变致精子缺失可引起不育;c-myc基因可促进生精细胞的凋亡.生精细胞的存亡还与周围的支持细胞以及间质细胞所形成的微环境有关[2].各种生长因子对精子发生也有直接或间接的调节作用,如表皮生长因子(epidermalgrowth factor,EGF)、转化生长因子(transforming growth factor,TGF),胰岛素样生长因子( insulin-like growth factor,IGF)等.在精子发生过程中,各级生精细胞都会发生凋亡.在生理条件下,凋亡是机体清除过量或异常生精细胞的一种方式.

支持细胞在生精细胞凋亡过程中的重要作用

精子的生成过程是一个连续的周期性的过程,这包括二倍体的精原细胞进行一系列的有丝分裂,减数分裂最后分化成为成熟的单倍体精子的过程.

睾丸内生精细胞凋亡与激素调控

生精过程中细胞凋亡一方面是维持正常精子数量和质量的重要机制 ,另一方面又是导致少精或无精症的重要原因之一。凋亡的诱发及调控因素很多 ,其中 ,雌二醇、睾酮、卵泡刺激素、促黄体生成素、催乳素、绒毛膜促性腺激素等激素在生精细胞的凋亡过程中发挥着重要的作用。本文就睾丸内生精细胞凋亡与激素调控之间的关系作一综述。

硝普钠（SNP）和L-硝基-精氨酸甲酯（L-NAME）对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响

男性和女性性腺发育过程中均有细胞凋亡发生。为了观察硝普钠(SNP)和L-硝基-精氨酸甲酯(Nw-nitro-l-arginine-mythel-ester，L-NAME)对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响。本研究将雄性SD大鼠分为四组：分别于腹腔内注射SNP、L-NAME、SNP+L-NAME与生理盐水，每天一次，共12天。用流式细胞术(FCM)结合TUNEL法检测生精细胞的凋亡。

L-NAME对实验性大鼠隐睾生精细胞凋亡的抑制作用

目的：研究N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)对实验性大鼠隐睾生精细胞凋亡的影响及其作用机制。方法：36只雄性SD大鼠戊巴比妥钠(50mg／kg)腹腔内注射麻醉，下腹正中切口切断左侧睾丸引带，用5-0尼龙线将左侧睾丸固定于腹后壁，切断右侧睾丸引带后将右侧睾丸还纳入阴囊后关腹，术后第一天将大鼠随机分为两组，