基于下丘脑-垂体-性腺轴探析补肾法治疗2型糖尿病生精障碍的思路

糖尿病(DM)高血糖病理状态是导致男性生精障碍的重要因素之一,下丘脑-垂体-性腺(HPG)轴是人体全身植物性功能、神经内分泌网络的重要枢纽,生理上主导人类生殖及生长发育,病理上又可受到DM高血糖病理状态的影响,是2型糖尿病(T2DM)生精障碍发生、发展过程中的关键机制之一,肾虚是生精障碍和T2DM共同的病因病机。肾藏精所体现的“主生殖、生髓充脑”功能与HPG轴功能相似,补肾法对HPG轴功能具有调节改善作用,为补肾法治疗T2DM生精障碍奠定理论基础。补肾经典方剂在治疗DM与生精障碍上相得益彰,为临床以补肾法防治T2DM生精障碍之不育症提供了思路和方法。

环磷酰胺诱导生精障碍小鼠模型不同恢复期的比较研究

目的比较并评价环磷酰胺造模后不同恢复期小鼠生精障碍的改善程度。方法将48只4~5周龄体质量为18~20 g的ICR雄性小鼠随机分为3个对照组和3个模型组,每组8只。3个模型组的每只小鼠于实验第1~7天连续腹腔注射环磷酰胺60 mg/kg,处理结束后分别继续饲养7 d、14 d和21 d。每个模型组均设相应的对照组,3个对照组小鼠腹腔注射对应体积的生理盐水。各组小鼠在相应时间点通过眼眶静脉采血后处死,取睾丸、附睾和精囊,称重后计算其生殖器官指数。HE染色后比较睾丸和附睾组织病理学变化,精子质量分析测定精子相关指标。ELISA法及相关试剂盒检测血清生殖激素含量、睾丸氧化应激水平和睾丸标志性酶活性变化。结果与对照组相比,环磷酰胺处理结束后7 d、14 d和21 d的模型组小鼠睾丸指数均明显下降(P<0.01),7 d、14 d的附睾指数和7 d、21 d的精囊指数明显下降(P<0.05);且随着时间延长,模型组睾丸和附睾组织病理学损伤逐渐减轻。环磷酰胺处理结束后7 d、14 d的模型组精子数量明显减少(P<0.01),血清睾酮水平降低(P<0.05),睾丸中丙二醛含量明显增多(P<0.01),还原型谷胱甘肽含量和超氧化物歧化酶含量明显降低(P<0.05),睾丸标志性酶乳酸脱氢酶活力明显下降(P<0.05),γ-谷氨酰转肽酶活力明显上升(P<0.05);其中7 d的模型组小鼠精子活力明显下降(P<0.001),精子畸形率明显上升(P<0.05),血清促卵泡素和促黄体生成素明显增加(P<0.01)。21 d的模型组小鼠精子相关指标、血清生殖激素水平、睾丸氧化应激水平和睾丸标志性酶活性变化均不明显(均P>0.05)。结论环磷酰胺60 mg/kg连续腹腔注射7 d,注射结束后7 d所致小鼠生殖毒性较为明显,能够构建较理想的小鼠生精障碍模型;而随着恢复期的延长,至环磷酰胺处理结束后21 d小鼠生精障碍各项指标逐渐恢复,接近正常水平。

五味子多糖对环磷酰胺致生精障碍大鼠的治疗作用及对生殖激素的影响

目的探讨五味子多糖对环磷酰胺(CTX)致生精障碍大鼠的治疗作用及其对生殖激素的影响。方法醇碱法提取五味子多糖。50只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组以及五味子多糖低、中、高剂量组。除正常组外,其余4组均给予腹腔注射CTX80mg/(kg·d)连续5天,制备生精障碍大鼠模型。造模后,五味子多糖低、中、高剂量组分别给予五味子多糖100、200、400mg/(kg·d)灌胃,正常组和模型组给予等体积生理盐水灌胃,均每天1次,连续60天。末次灌胃后24h,取大鼠血清和睾丸组织。酶联免疫法测定大鼠血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和睾丸组织匀浆睾酮(T)水平;比较各组大鼠精子密度、活率及精子畸形率;HE染色观察睾丸组织形态。结果与正常组比较,模型组精子密度和精子活率降低,精子畸形率升高,血清FSH和LH水平升高,睾丸组织匀浆中T含量降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,五味子多糖各剂量组精子密度、精子活率升高,精子畸形率降低,血清FSH和LH水平降低,睾丸组织匀浆中T含量升高,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05),且五味子多糖各剂量组呈剂量依赖性。组织学观察显示,五味子多糖各剂量组大鼠睾丸组织病理性损害均得到改善。结论五味子多糖对CTX所致大鼠生精障碍具有明显的治疗作用,其机制可能与恢复下丘脑-垂体-性腺轴的调控功能有关。

肉苁蓉苯乙醇苷对环磷酰胺致小鼠生精障碍的治疗作用及其机制

目的:探讨肉苁蓉苯乙醇苷对环磷酰胺致生精障碍小鼠的治疗作用,并初步阐明其作用机制。方法:乙醇浸提法提取肉苁蓉苯乙醇苷。40只BALB/C小鼠随机分为对照组、模型组、肉苁蓉苯乙醇苷低剂量组(50mg·kg-1)和高剂量组(100 mg·kg-1),每组10只。除对照组外,其余各组小鼠每天注射环磷酰胺(80mg·kg-1)连续5d,制备生精障碍小鼠模型。末次给药后,肉苁蓉苯乙醇苷低剂量组和高剂量组小鼠分别给予相应剂量灌胃,对照组和模型组小鼠给予等体积生理盐水灌胃,每天1次,连续30d。末次灌胃后24h,取小鼠睾丸组织。酶联免疫法测定小鼠睾丸组织匀浆中睾酮水平,比较各组小鼠精子密度、精子活率及精子畸形率,HE染色观察睾丸组织形态学变化。结果:与对照组比较,模型组小鼠精子密度和精子活率降低(P<0.01),精子畸形率升高(P<0.01),睾丸组织匀浆中睾酮水平降低(P<0.01);与模型组比较,肉苁蓉苯乙醇苷各剂量组小鼠精子密度和精子活率明显升高(P<0.01),精子畸形率降低(P<0.01),睾丸组织匀浆中睾酮水平升高(P<0.05或P<0.01)。组织学观察,模型组小鼠睾丸生精小管萎缩、退化,生精上皮明显变薄、生精细胞排列紊乱,腔内精子数目减少;肉苁蓉苯乙醇苷组小鼠睾丸生精上皮层数明显增多,层次分明,生精细胞排列整齐、紧密、规则,管腔内可见精子。结论:肉苁蓉苯乙醇苷对环磷酰胺所致小鼠生精障碍具有明显的治疗作用,其机制可能与改善睾丸组织中睾酮水平有关。

淫羊藿总黄酮对环磷酰胺致小鼠生精障碍保护作用的研究

目的:研究淫羊藿总黄酮对环磷酰胺所致小鼠生精障碍的治疗作用。方法:腹腔注射环磷酰胺建立小鼠生精障碍模型,检测小鼠的睾丸及附睾重量、精子密度、活率,流式细胞术分析睾丸生精细胞周期,光、电镜观察睾丸组织学和超微结构的变化。结果:淫羊藿总黄酮能够显著增加模型小鼠的睾丸、附睾重量,提高精子密度、精子活率,恢复各级生精细胞百分比;并能改善环磷酰胺所致模型小鼠睾丸组织的病理性损害。结论:淫羊藿总黄酮可以显著改善环磷酰胺致生精障碍小鼠生殖功能。

五子衍宗汤对环磷酰胺致小鼠生精障碍保护作用的研究

目的:研究五子衍宗汤对环磷酰胺(CY)所致小鼠生精障碍的保护作用。方法:腹腔注射环磷酰胺建立小鼠生精障碍模型,检测小鼠的睾丸及附睾重量、精子密度、活率,流式细胞术分析睾丸各级生精细胞细胞周期,光、电镜观察睾丸组织学和超微结构的变化。结果:五子衍宗汤能够显著增加模型小鼠的睾丸及附睾重量,增加精子密度,提高精子活率,恢复各级生精细胞百分比;改善环磷酰胺所致模型小鼠睾丸组织的病理性变化。结论:五子衍宗汤可以显著改善环磷酰胺所致的小鼠生殖功能损害。

中药在治疗哺乳动物生精障碍中的应用及其研究

生精障碍所致无精、少精、弱精是造成男性不育的主要原因,中药在治疗生精障碍方面有着举足轻重的作用。常用的中药药物包括单味中药和复方中药。为促进中药在临床上的使用,提高中药的治疗效果,文章就不同的中药在治疗生精障碍中的应用及其相关研究进行详细的分析与综述,旨在为其临床应用提供理论依据。

五子衍宗丸对生精障碍大鼠生精功能的保护作用研究

目的:考察五子衍宗丸对实验性生精障碍大鼠的保护作用。方法:取90只雄性SD大鼠随机分为6组:正常对照组、模型组、克罗米芬阳性对照组及五子衍宗丸低、中、高剂量组。除正常对照组外,其他各组灌服雷公藤多苷40 mg/(kg·d)连续4 w建立生精障碍模型。从第4 w开始,各组按剂量灌胃给药,给药4 w后计算睾丸、附睾、精囊腺脏器指数,检测精子数量、活率和血清生殖激素水平,HE染色观察大鼠睾丸病理组织学改变,TUNEL染色观察睾丸细胞凋亡情况,免疫组化及qRT⁃PCR检测凋亡相关蛋白的表达。结果:生精障碍模型大鼠经高剂量五子衍宗丸治疗后,睾丸脏器指数、精子数量和活率及血清血清T水平显著升高,血清FSH、LH的水平显著降低;睾丸组织病理学损伤明显改善,并能抑制生精细胞的凋亡,促进睾丸组织中抑凋亡相关蛋白Bcl⁃2表达,抑制促凋亡相关蛋白Bax、Caspase⁃3、Caspase⁃9的表达。结论:五子衍宗丸对生精功能障碍大鼠具有保护作用,其机制可能与改善生精并抑制生精细胞凋亡相关。

不育症睾丸生精障碍与生殖激素、免疫反应关系的研究

本文对６４例不育症睾丸活检标本进行生精障碍分级，用放免法测定血清ＦＳＨ、ＬＨ、Ｔ、ＰＲＬ的水平，用ＡＢＣ法检测睾丸ＩｇＧ 和ＩｇＡ免疫复合物。结果显示重度、不可逆性生精障碍组与对照组比较，血清ＦＳＨ、ＬＨ、Ｔ、ＰＲＬ水平存在显著差异。ＦＳＨ水平分别升高至对照组的３．０１、３．５０倍，ＬＨ水平分别升高至对照组的２．５９、２．８７倍，Ｔ水平明显下降，分别为１６．２５ ｎｍｏｌ／Ｌ、１４．８８ ｎｍｏｌ／Ｌ（Ｐ＜０．０１），Ｔ／ＬＨ水平明显下降，分别降至１．０６和 ０．８７。高 ＰＲＬ血症１０例，增高幅度为 ０．２１～１．４７ ｎｍｏｌ／Ｌ。提示不育症血清生殖激素水平能反映睾丸生精障碍程度，可作为确定是否进行睾丸活检的一项重要指标。重度、不可逆性生精障碍组ＩｇＧ＋分别为７１％、８２％。ＩｇＮ＋分别为６５％、７５％。表明ＩｇＧ、ＩｇＡ免疫复合物在睾丸中的沉积可能与睾丸生精障碍有关，其阳性率与生精障碍程度密切相关。

六味地黄汤对肾阴虚型生精障碍大鼠生殖系统的影响

目的:研究六味地黄汤对肾阴虚型生精障碍大鼠生殖系统的作用。方法:通过建造肾阴虚型生精障碍大鼠模型,以六味地黄汤灌胃治疗,以市售品成药为对照,考察实验组大鼠的精子数量、质量,睾丸曲细精管的组织结构,检测血清T、FSH、LH、NO、NOS水平。结果:六味地黄汤治疗组大鼠的精子数量、T、FSH、LH、NO、NOS水平与模型组有显著性差异(P<0.01),精子质量也显著优于模型组。结论:六味地黄汤可显著促进肾阴虚型生精障碍大鼠睾丸精子的发生,同时显著提高精子的质量,对损伤的睾丸曲细精管有很好的修复作用,可提高模型组大鼠血清的T、FSH、LH、NO、和NOS水平。

淫羊藿苷对环磷酰胺诱导生精障碍大鼠下丘脑-垂体-睾丸轴的影响

目的:探讨淫羊藿苷在环磷酰胺诱导的大鼠睾丸生精障碍动物模型中的作用,研究淫羊藿苷对下丘脑-垂体-睾丸轴的影响。方法:大鼠分为空白对照组、阴性对照组、模型组、淫羊藿苷治疗组;H-E染色观察睾丸组织结构变化,TUNEL检测睾丸生殖细胞凋亡,放射免疫法检测血清睾酮、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH),SABC免疫组织化学研究下丘脑正中隆起促性腺激素释放激素(GnRH)神经纤维。结果:睾丸H-E染色切片观察显示模型组睾丸生精小管直径缩小,间距增宽,生精上皮变薄,生殖细胞数量减少,生精小管多未见精子形成,与空白对照组比较其生精小管结构变化显著;治疗组与模型组比较生精小管壁增厚,含有精子的生精小管明显增多。模型组与空白对照组比较,睾丸生精小管中生殖细胞凋亡显著增多;治疗组与模型组比较生精小管中生殖细胞凋亡数量明显减少。血清睾酮检测结果显示模型组与空白对照组比较血清睾酮明显降低;治疗组与模型组比较其血清睾酮明显增加;血清FSH、LH水平各组间无差异。与空白对照组比较,模型组正中隆起GnRH阳性纤维增多,染色深,光密度显著增高;治疗组与模型组比较其GnRH阳性纤维明显减少,染色浅。结论:淫羊藿苷具有改善睾丸生精小管结构、减少生殖细胞凋亡、促进精子发生和间质细胞分泌睾酮的功能,降低GnRH在正中隆起的蓄集。

六味地黄汤对生精障碍模型大鼠精子及其血清NO的影响

目的:观察六味地黄汤对生精障碍模型大鼠促进生精的作用及其对大鼠血清一氧化氮(NO)的影响。方法:用醋酸棉酚建造Wistar雄性大鼠生精障碍模型后,用分煎和合煎的六味地黄汤灌胃给药治疗,以市售六味地黄丸和甲基睾酮为对照,计数各组精子数量,观察各组精子的活力,测定大鼠血清NO水平。结果:模型组大鼠的精子数量与六味地黄汤分煎组、六味地黄汤合煎组、市售六味地黄丸对照组、西药对照组比较,差异有非常显著性意义(P<0.01);各治疗组、对照组的精子活力也显著优于模型组。模型组大鼠血清NO水平与各组比较,差异有非常显著性意义(P<0.01);血清NO水平和精子数量、精子质量基本成正相关。结论:六味地黄汤对生精障碍大鼠有显著的促生精作用,同时可升高大鼠血清NO水平,显著提高大鼠精子的质量。

严重生精障碍患者精子DNA碎片指数与血清Hcy水平的相关性研究

目的探讨严重生精障碍患者精子DNA碎片指数与血清Hcy水平的相关性研究。方法 2015年12月~2017年2月期间就诊的严重生精障碍男性患者56例,按WHO标准分为严重无、少精子症组25例和弱精子症组31例,对照组为无生育障碍的男性27例。对所有纳入研究者运用全自动精液分析仪进行精子参数分析,精子DNA碎片指数和血清Hcy水平的检测分别运用精子染色质扩散法和酶比色法。结果对照组人群中精子DNA碎片指数和Hcy水平的中位数分别为33%[95%CI(29.0%~34.4%)]和13.2μmol/L[95%CI(12.4μmol/L^14.2μmol/L)],而在严重生精障碍组中这两个指标分别为21%[95%CI(19.0%~24.0%)]和8.9μmol/L[95%CI(8.4μmol/L^9.4μmol/L)],这两个项目的检测结果对照组均高于严重生精障碍组,差异有统计学意义(t=6.793~7.543,P=0.000)。精子存活率正常对照组和严重生精障碍组分别为71%[95%CI(67.8%~75.1%)]和57%[95%CI(52.3%~58.0%)],差异有统计学意义(t=-8.475,P=0.000)。精子DNA碎片指数与血清Hcy水平、精子浓度呈正相关,Passing-Bablok回归方程分别为:Y=10.705+0.053X,Y=21.071+0.286X,而Hcy水平和精子浓度呈负相关趋势。结论 Hcy水平和精子DNA碎片指数的升高,可能是严重生精障碍男性的重要病因,但其具体机制有待进一步研究。

五味子多糖对微波辐射生精障碍小鼠的治疗作用研究

目的探讨五味子多糖对微波辐射致生精障碍小鼠的治疗作用及其对生殖激素的影响。方法 50只雄性BALB/C小鼠随机分为正常组、模型组及五味子多糖低、中、高剂量组。除正常组外,每组小鼠每天给予1 450 MHz、50 m W/cm2的微波照射1 h,连续12天,制备微波致生精障碍小鼠模型。模型制备后,五味子多糖低、中、高剂量组分别给予五味子多糖100、200、400 mg/kg灌胃,正常组和模型组给予等体积0.9%Na Cl溶液灌胃,均每天1次,连续30天。末次灌胃后24 h,取小鼠血清、睾丸和附睾。检测各组小鼠精子密度、活率及畸形率;酶联免疫法测定小鼠血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和睾丸组织匀浆睾酮(T)水平;HE染色观察睾丸形态学变化。结果与正常组比较,模型组精子密度和精子活率降低、精子畸形率升高(P<0.01),血清FSH和LH水平升高、睾丸组织匀浆中T含量降低(P<0.01)。与模型组比较,五味子多糖各剂量组精子密度、精子活率升高,精子畸形率降低,血清FSH和LH水平降低,睾丸组织匀浆中T含量升高,差异均有统计学意义(P<0.01),且作用效果呈剂量依赖性。组织学观察显示,五味子多糖各剂量组小鼠睾丸组织病理性损害均得到改善。结论五味子多糖对微波致生精障碍小鼠生精功能有明显的改善作用,其作用机制可能与调节生殖激素水平,恢复下丘脑-垂体-性腺轴的调控功能有关。

生精障碍患者227例遗传学分析

目的:探讨染色体核型和Y染色体无精子因子(AZF)微缺失与男性生精障碍的关联。方法:对227例生精障碍患者进行外周血淋巴细胞G显带染色体核型分析,采用qRT-PCR扩增进行AZF微缺失检测。结果:在227例生精障碍患者中检出染色体异常49例(21.59%),其中Kleinefelter综合征17例(7.49%),性反转2例(0.88%),Y染色体部分缺失2例(0.88%),常染色体易位5例(2.20%),染色体多态性23例(10.13%)。检出21例(9.25%)存在AZF微缺失,其中AZFa缺失1例,AZFb缺失2例,AZFc缺失7例,AZFd缺失4例,AZFa+b+c+d缺失4例,AZFb+c缺失2例,AZFc+d缺失1例。AZF微缺失可见于染色体核型为47,XXY、46,XX、46,X,del(Y)、46,X,Yqh-、46,XY的生精障碍患者中。在178例正常核型的生精障碍患者中检出10例(5.62%)AZF微缺失。结论:染色体核型联合AZF微缺失检测有助于生精障碍的诊断和治疗方案的选择。

六味地黄汤对生精障碍模型大鼠的促生精作用研究

目的 :观察六味地黄汤对生精障碍模型大鼠的促生精作用。方法 :用醋酸棉酚建造大鼠生精障碍模型后 ,用分煎和合煎的六味地黄汤灌胃治疗 ,以市售六味地黄丸和甲基睾酮分别为对照和阳性对照 ,计数实验各组精子数量 ,考察实验各组精子的质量。结果 :六味地黄汤各治疗组、阳性对照组大鼠的精子数量与模型组有显著性差异 ( P<0 .0 1 ) ,各治疗组大鼠的精子质量 (活力 )也显著优于模型组。结论 :六味地黄汤对生精障碍大鼠有显著的促进生精作用 。

淫羊藿多糖对醋酸铅致生精障碍小鼠的治疗作用

为观察淫羊藿多糖对生精障碍BALB/c小鼠的治疗作用,将印只BALB/c雄性小鼠随机分为空白组、模型组、阳性药物组、淫羊藿多糖高、中、低剂量组,每组10只;除空白组外,其余各组小鼠腹腔注射醋酸铅制备小鼠生精障碍模型。通过灌胃不同浓度淫羊藿多糖及阳性药物维生素E,研究了淫羊藿多糖对生精障碍小鼠精子数量、畸形率、活率,生殖激素水平及睾丸形态的影响。结果:淫羊藿多糖各剂量组能够升高生精障碍小鼠精子密度和精子活率,降低精子畸形率,降低血清卵泡雌激素和黄体生成素水平,升高睾丸组织睾酮含量(P<0.01),且各剂量组对生精功能改善作用呈剂量依赖性。形态学观察,淫羊藿多糖可改善小鼠睾丸组织的病理学损害。表明淫羊藿多糖对醋酸铅所致小鼠生精功能的损伤具有治疗作用,作用机制可能与改善或恢复生殖内分泌激素水平有关。

无精症少弱精症与生精障碍的研究进展

无精少弱精子症是引起男性不育的主要原因,其主要的病因是生精障碍,对生精障碍的病因学研究、从基因水平了解和治疗是目前研究的主要问题,现就这几方面的研究进展情况作一综述。

巴戟天萃取物对环磷酰胺诱导生精障碍大鼠支持细胞的影响

目的探讨巴戟天萃取物对环磷酰胺(CTX)诱导生精障碍大鼠睾丸支持细胞的影响。方法 48只成年雄性SD大鼠,随机分为6组,空白对照组、CTX+NS组、CTX+MO 10 g/kg组、CTX+MO 20 g/kg组、CTX+MO 30 g/kg组、CTX+MO 40 g/kg组。以CTX构建大鼠生精障碍动物模型;巴戟天水提物用乙酸乙酯萃取后取水层成分,分别以10、20、30、40 g/(kg·d)的浓度给予4个剂量实验组灌胃,空白对照组及CTX+NS组予生理盐水灌胃,持续2周。取各组大鼠睾丸组织,荧光定量PCR检测卵泡刺激素受体(FSHR)mRNA和雄激素结合蛋白(ABP)mRNA表达的差异。结果 4个剂量实验组FSHR mRNA和ABP mRNA表达明显高于CTX+NS组及空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论巴戟天萃取物对CTX诱导生精障碍大鼠的睾丸支持细胞具有保护作用,进而修复睾丸的生精功能。

杨梅黄酮对环磷酰胺诱导雄性小鼠生精障碍的试验

为了研究杨梅黄酮对环磷酰胺所致雄性小鼠生精障碍的保护作用及作用机制,采用腹腔注射环磷酰胺(50 mg/kg·bw)连续7 d建立雄性小鼠生精障碍模型,杨梅黄酮组分别灌胃杨梅黄酮(100 mg/kg·bw、200 mg/kg·bw、400 mg/kg·bw),连续30 d。观察雄性小鼠的精子密度、精子畸变率,血清中还原型谷胱甘肽(GSH)的含量,睾丸组织中乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及核因子κB(NF-κB)等指标,并观察睾丸组织的病理改变。结果显示:与模型组比较,杨梅黄酮中、高剂量组的精子密度增加、精子畸变率减少,杨梅黄酮中、高剂量组睾丸组织中TNF-α及NF-κB含量降低,杨梅黄酮中、高剂量组血清中GSH水平增加,杨梅黄酮低、中、高剂量组睾丸组织中MDA含量降低、LDH活性增强。病理可见模型组睾丸组织生精上皮明显变薄,生精细胞层次、数量减少,多数生精小管腔未见精子形成,而杨梅黄酮可改善环磷酰胺所致的生精细胞的损伤。表明杨梅黄酮对环磷酰胺诱导雄性小鼠的生精障碍有一定保护作用,作用机制与抗氧化、抗炎有关。