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过表达MyoD1基因山羊胎儿成纤维细胞系的建立及其成肌诱导分化 被引量:8
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作者 李伟 郑蒙蒙 +4 位作者 张亚妮 朱才业 邱峰龙 韦光辉 李碧春 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第14期3032-3039,共8页
【目的】通过建立过表达MyoD1基因山羊胎儿成纤维细胞系研究MyoD1基因的异位表达研究其在成肌分化中的生物作用。【方法】采用RT-PCR从激活的骨骼肌卫星细胞中克隆MyoD1基因,并将其cDNA终止密码子TGA定向突变为GGA,定向克隆至带有增强... 【目的】通过建立过表达MyoD1基因山羊胎儿成纤维细胞系研究MyoD1基因的异位表达研究其在成肌分化中的生物作用。【方法】采用RT-PCR从激活的骨骼肌卫星细胞中克隆MyoD1基因,并将其cDNA终止密码子TGA定向突变为GGA,定向克隆至带有增强型水母绿色荧光蛋白(ehanced green fluorescent protein,eGFP)报告基因的真核表达载体pEGFP-N1中,构建融合蛋白表达载体pEGFP-MyoD1,经过酶切、测序鉴定后,采用LipofectiminTMLTX转染山羊胎儿成纤维细胞(goat embryonic fibroblast,GEF)以建立MyoD1异位表达细胞株并采用成肌诱导分化培养液进行成肌诱导分化,探究MyoD1在成肌过程中的生物学功能。【结果】成功克隆山羊MyoD1基因,并在MyoD1的开放阅读框(ORF)两端引入XhoⅠ/EcoRⅠ酶切位点,将其终止密码子TGA定点突变为GGA,定向克隆至pEGFP-N1真核表达载体,获得融合蛋白表达载体pEGFP-MyoD1;经G418(400μg.mL-1)筛选2周后,获得MyoD1异位表达的GEF细胞株;间接免疫荧光(indirect immunofluorescence assay,IFA)检测结果显示该细胞株能够表达Myf-5等成肌相关免疫学标志;采用成肌分化培养基分化培养处理2—3 d可见少量肌管产生,并表达MyoG、Desmin和MyHC等早期成肌分化标志,处理5 d可见大量肌管形成。【结论】成功克隆出山羊MyoD1基因,构建了pEGFP-MyoD1真核表达载体并建立过表达MyoD1 GEF细胞系,过表达MyoD1 GEF系能够在成肌诱导培养液诱导形成肌管。 展开更多
关键词 myod1基因 基因克隆 异位表达 分化
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中华鳖MyoD1基因SNP鉴定及其与生长性状的关联分析 被引量:2
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作者 黄龙 吴本丽 +5 位作者 何吉祥 陈静 宋光同 汪翔 张烨 武松 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期76-81,共6页
为了研究生肌决定因子1(MyoD1)基因多态性与中华鳖生长性状的相关性,采用直接测序法在MyoD1基因上共检测到6个SNP位点(T-49G、A-38G、C91T、A187T、C880T和T1522A),其中C880T位于外显子上,属于错义突变。对从同批繁殖、同块稻田养殖的2... 为了研究生肌决定因子1(MyoD1)基因多态性与中华鳖生长性状的相关性,采用直接测序法在MyoD1基因上共检测到6个SNP位点(T-49G、A-38G、C91T、A187T、C880T和T1522A),其中C880T位于外显子上,属于错义突变。对从同批繁殖、同块稻田养殖的2冬龄中华鳖群体中随机选取的178只个体中各位点的基因型进行检测。结果显示,所有位点在中华鳖群体中的平均有效等位基因数、平均观测杂合度和平均期望杂合度分别为1.636 5、0.349 3和0.375 4,除A187T位点外,其余5个位点的基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg定律。采用一般线性模型分析各位点与中华鳖生长性状之间的相关性,研究发现,T-49G位点GG基因型个体的背甲宽显著大于TT基因型,A-38G位点AG基因型个体的背甲宽显著大于AA基因型,A187T位点TT基因型个体的体高显著大于AA基因型,T1522A位点AA基因型个体的体质量显著大于TT、TA基因型,其余位点不同基因型个体间的生长性状均不存在显著差异。T-49G、A-38G、A187T和T1522A位点与生长性状显著相关,可作为中华鳖分子标记辅助育种的候选标记。 展开更多
关键词 中华鳖 决定因子1基因 单核苷酸多态性标记 长性状 关联分析
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动物肌肉生长发育调控的功能基因研究进展 被引量:27
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作者 刘丑生 赵兴波 +1 位作者 李宁 赵有璋 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2003年第5期48-49,共2页
成肌细胞的增殖和分化是受生肌决定因子 (MyoD)调控 ,生肌决定因子包括 4个基因 ,MyoDl(myf3)、Myogenin(MyoG)、Myf5、Myf 6 (herculin或MRF4 )。MyoD家族基因属于碱性螺旋 环 螺旋 (bHLH)转录因子 ,它能激活肌肉生成的特定基因。肌细... 成肌细胞的增殖和分化是受生肌决定因子 (MyoD)调控 ,生肌决定因子包括 4个基因 ,MyoDl(myf3)、Myogenin(MyoG)、Myf5、Myf 6 (herculin或MRF4 )。MyoD家族基因属于碱性螺旋 环 螺旋 (bHLH)转录因子 ,它能激活肌肉生成的特定基因。肌细胞生长抑制素 (MSTN ,Myostatin ,又称GDF 8) ,属于转化生长因子超家族 ,它通过负向控制肌细胞的生长发育 ,GDF 8基因缺失的小鼠表现出比正常小鼠具有“双肌现象”。 展开更多
关键词 动物 长发育 调控技术 功能基因 细胞 决定因子 转录因子
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32例小儿横纹肌肉瘤生肌因子的表达 被引量:4
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作者 奚政君 张忠德 +3 位作者 祝明洁 信明军 成宇帆 王燕 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2002年第3期263-265,共3页
目的探讨小儿横纹肌肉瘤中生肌因子(MyoD1、Myogenin)的表达及意义。方法 应用免疫组化Envision法检测32例小儿横纹肌MyoD1、Myogenin、Des、Sr-A、MG标记物的表达。结果5种标记物在小儿RMS表达的阳性率依次为:Myogenin90.6%、MyoD18... 目的探讨小儿横纹肌肉瘤中生肌因子(MyoD1、Myogenin)的表达及意义。方法 应用免疫组化Envision法检测32例小儿横纹肌MyoD1、Myogenin、Des、Sr-A、MG标记物的表达。结果5种标记物在小儿RMS表达的阳性率依次为:Myogenin90.6%、MyoD181.1%、Des65.5%、Sr-A50.0%、MG46.8%。结论 Myogenin与MyoD1较Des、Sr-A、MG在诊断小儿RMS中灵敏度及特异性方面具有显著的优越性,有很高的诊断价值。Myo-genin特异性略高于MyoD1,是目前诊断小儿RMS的最佳免疫组化标记物。 展开更多
关键词 小儿 横纹肉瘤 因子 MYOGENIN myod1 免疫组织化学
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运动与生肌调节因子研究进展 被引量:5
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作者 苏艳红 王瑞元 周越 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期770-772,共3页
关键词 调节因子 MYOGENIN 球蛋白轻链 运动 球蛋白重链 myod MRF4 调节基因
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肌分化因子MyoD的研究进展 被引量:3
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作者 赵金红 黄勇富 +4 位作者 彭祥伟 王高富 蒋安 高立芳 周鹏 《上海畜牧兽医通讯》 2007年第6期12-13,共2页
关键词 调节因子 分化 细胞转化 myod基因 基因转录调控 细胞 卫星细胞 成纤维细胞
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家兔MyoD1基因多态性与生长和屠宰性能的相关性 被引量:4
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作者 何桦 张文秀 赖松家 《畜牧与兽医》 北大核心 2013年第6期32-35,共4页
采用DNA直接测序法筛选生肌决定基因(MyoD1)5'-UTR及编码区的遗传多态性,采用高分辨率溶解曲线分型技术(HRM)对候选单核苷酸多态性位点(SNP)进行基因分型,并分析其与生长和屠宰性能的相关性(n=190)。结果显示:仅在外显子4上发现一... 采用DNA直接测序法筛选生肌决定基因(MyoD1)5'-UTR及编码区的遗传多态性,采用高分辨率溶解曲线分型技术(HRM)对候选单核苷酸多态性位点(SNP)进行基因分型,并分析其与生长和屠宰性能的相关性(n=190)。结果显示:仅在外显子4上发现一个同义突变SNP(c.783 G>A)。等位基因A和G在3品种中的平均频率为0.216和0.784,基因型GG、GA和AA的平均频率分别为0.674、0.221和0.105。相关性分析表明,无论公母兔,其AA基因型个体的全净膛重和半净膛重都显著高于GA基因型个体(P<0.05),而该SNP位点与生长性状间无显著相关。研究结果支持MyoD1基因可作为家兔屠宰性能的候选基因。 展开更多
关键词 家兔 决定基因(myod1) 单核苷酸多态性位点(SNP) 高分辨率溶解曲线(HRM) 屠宰性状
原文传递
动物脂肪细胞定向和分化因子1的研究进展
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作者 邓正德 连林生 《上海畜牧兽医通讯》 2009年第4期12-13,共2页
关键词 脂肪细胞分化 动物脂肪 决定因子 候选基因 调控作用 ADD1 内脂肪含量 脂肪沉积
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Characterization of flounder (Paralichthys olivaceus) FoxD5 and its function in regulating myogenic regulatory factor
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作者 谭训刚 张玉青 +2 位作者 孙威 张培军 徐永立 《Chinese Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2012年第2期286-294,共9页
As one member of winged helix domain transcription factors, FoxD5 was reported to be a trunk organizer. Recent study showed that zebrafish foxd5 is expressed in the somites. To further understand the function of FoxD5... As one member of winged helix domain transcription factors, FoxD5 was reported to be a trunk organizer. Recent study showed that zebrafish foxd5 is expressed in the somites. To further understand the function of FoxD5 in fish muscle development, the FoxD5 gene was isolated from flounder. Its expression pattern was analyzed by in situ hybridization, while its function in regulating myogenic regulatory factor, MyoD, was analyzed by ectopic expression. It showed that flounder FoxD5 was firstly expressed in the tailbud, adaxial cells, and neural plate of the head. In flounder embryo, FoxD5 is expressed not only in forebrain but also in somite cells that will form muscle in the future. When flounder FoxD5 was over-expressed in zebrafish by microinjection, the expression of zebrafish MyoD in the somites was reduced, suggesting that FoxD5 is involved in myogenesis by regulating the expression of MyoD. 展开更多
关键词 调节因子 牙鲆 调节功能 myod基因 表征 肉发育 转录因子 基因分离
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