补肾生血药对顺铂损伤的小鼠骨髓间充质干细胞的影响

目的:观察补肾生血药对顺铂损伤的骨髓间充质干细胞(BMSC)的影响,探讨补肾生血改善化疗后骨髓抑制的机制。方法:将50只SD雄性大鼠随机分为空白对照组、补肾生血药组,每组25只,分别制备补肾生血血清和空白血清,原代培养BALB/c小鼠BMSC,随机分组,CCK-8法确定顺铂和补肾生血血清干预浓度。干预48 h后,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期,酶联免疫吸附试验法检测培养液中造血调控因子含量。结果:干预48 h后,骨髓细胞凋亡率明显增高(P<0.01),补肾生血血清组G_(1)期细胞比例显著降低(P<0.05),S期细胞比例显著增加(P<0.05),增殖期细胞比例明显增加(P<0.05)。补肾生血血清组骨髓细胞凋亡率明显降低(P<0.001),G_(1)期细胞比例显著降低(P<0.05),增殖期细胞比例显著增加(P<0.05),IL-3含量明显升高(P<0.01),TNF-α、TGF-β、IFN-γ含量显著降低(均P<0.05)。结论:补肾生血药能减轻顺铂造成的BMSC凋亡,促进细胞进入增殖期,促进造血生长因子分泌,减少造血抑制因子分泌,提示该药对化疗后骨髓抑制具有一定的改善作用。

补肾生血药对衰老小鼠Bcl—2mRNA表达的影响

"肾生骨髓"是中医肾生理功能的重要组成部分.因此,肾生髓理论的现代研究在肾本质研究中占有重要的地位.我们实验室自20世纪70年代末以来一直致力于肾生髓理论的现代研究,研究的重要成果之一是补肾生血药的研制成功.该药由熟地黄、何首乌、山茱萸、枸杞子、阿胶等11味中药组成,具有滋阴补肾,益髓生血等功能.20多年来,我们通过对补肾生血药的药效机理的研究,来阐述中医经典理论肾生髓的现代内涵.基因是决定生命结构和功能的最根本物质,与作为"先天之本"、"主生殖、生长发育、生髓等"的中医肾的概念可能存在着某些必然的联系.Bcl-2基因(B细胞淋巴瘤/白血病-2基因)是最初发现的与细胞凋亡相关的原癌基因,其表达产物Bcl-2主要作用是抑制细胞凋亡.本课题采用老年小鼠和目前应用较成熟的D-半乳糖致衰老小鼠模型,通过观察补肾生血药对其骨髓有核细胞Bcl-2 mRNA表达的影响,来探讨肾生髓的本质相关基因.

从补肾生血药对衰老小鼠骨髓GM-CSF基因转录水平的影响探讨肾生髓的分子基础

目的 :为探讨肾生髓的分子基础 ,阐述肾生髓的本质相关基因 ,我们观察了补肾生血药对衰老小鼠骨髓粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)基因转录水平的影响。方法 :采用老年小鼠和D 半乳糖致衰老小鼠两种衰老肾虚动物模型 ,分别连续灌服补肾生血药 2个月和 1个月 ,应用半定量逆转录 聚合酶链式反应技术 (RT PCR)检测小鼠骨髓有核细胞GM CSF基因转录水平的变化。结果 :老年小鼠和D 半乳糖致衰老小鼠骨髓有核细胞GM CSF基因转录水平明显低于青年小鼠和正常对照小鼠 ,给药后则可明显得到提高。结论 :补肾生血药起到滋阴补肾、益髓生血作用的分子机理之一 ,是促进骨髓GM CSF基因的转录 ,GM CSF是肾生髓的分子基础之一 ,GM CSF基因是肾生髓的本质相关基因之一。

采用细胞CT分析技术研究补肾生血药保护骨髓作用的分子基础

采用细胞ＣＴ技术，分析了补肾生血药对经致死剂量（６０Ｃｏ７５０ｒａｄ）照射的小鼠骨有核细胞的保护和抗辐射作用。采用激光扫描、光学切片０．６ 、三维重组、动态旋转１２０度，ＤＮＡ荧光强度分布图象分析。结果发现，经６０Ｃｏ致死剂量照射后，小鼠骨髓原红细胞严重破坏，从ＰＩ荧光染色、实时激光扫描。

补肾生血药对衰老小鼠原癌基因c-myc表达的影响

目的 探讨补肾生血药抗衰老的分子机制。 方法 采用老年小鼠和D 半乳糖致衰老小鼠 2种衰老动物模型 ,分别连续灌服补肾生血药 2月和 1月 ,应用半定量逆转录 聚合酶链式反应技术 (RT PCR)检测小鼠骨髓原癌基因c myc表达的变化。 结果 老年小鼠和D 半乳糖致衰老小鼠骨髓原癌基因c myc表达量明显高于青年小鼠和正常对照小鼠 (P <0 0 0 1) ,给药后则可明显得到抑制 (P <0 0 5～ 0 0 1)。 结论 抑制原癌基因c myc表达是补肾生血药抗衰老分子机制之一。

从补肾生血药对衰老小鼠IL-2、IL-2R的效应探讨肾生髓与免疫调节的关系

目的 探讨肾生髓与免疫调节的关系。方法 采用老年小鼠和D -半乳糖致衰老小鼠两种衰老肾虚动物模型 ,分别连续灌服补肾生血药两个月和 1个月 ,应用MTT法检测脾淋巴细胞增殖 ,放射免疫技术测定IL - 2的含量 ,流式细胞技术分析IL - 2R的表达情况。结果 老年小鼠和D -半乳糖致衰老小鼠脾淋巴细胞增殖能力、IL - 2含量、IL - 2R表达明显低于青年小鼠和正常对照小鼠 (P <0 .0 0 1) ,给药后则可明显得到提高 (P <0 .0 5～ 0 .0 1)。结论 肾生髓与免疫调节密切相关 。

补肾生血药干预不同时间对环磷酰胺所致骨髓抑制小鼠细胞周期与细胞增殖的影响

目的观察补肾生血药干预不同时间对环磷酰胺诱发骨髓抑制小鼠骨髓细胞周期及细胞增殖的影响。方法52只雄性BALB/c小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组、补肾生血药低剂量组、补肾生血药高剂量组。先预防用药3 d,补肾生血药低剂量组、高剂量组灌胃不同剂量补肾生血药,其余组灌胃蒸馏水。第4~6天造模,除空白对照组腹腔注射生理盐水外,其余组均腹腔注射环磷酰胺。造模同时进行干预,阳性对照组皮下注射重组人粒细胞刺激因子,其余组给药同预防用药,分别持续到造模后第10天、第12天、第14天。收集小鼠骨髓细胞,流式细胞仪检测10 d、12 d、14 d骨髓细胞周期,12 d、14 d骨髓细胞CD34+率;造血祖细胞培养法观察10 d、14 d红细胞集落形成单位(CFU-E)、爆式红细胞集落形成单位(BFU-E)、粒细胞-巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)数量。结果细胞周期分析,10 d时造模各组明显阻滞在G_(0)/G_(1)期、S期、G_(2)/M期(P<0.01),补肾生血药低剂量组则明显阻滞在G_(0)/G_(1)期、G_(2)/M期(P<0.05,P<0.01);12 d时细胞周期阻滞解除,各组间比较差异无统计学意义(P>0.05);14 d时补肾生血药高剂量组明显由G_(0)/G_(1)期进入到G_(2)/M期(P<0.05)。CD34+率,12 d时各组间比较差异无统计学意义(P>0.05),14 d时补肾生血药高剂量组明显升高(P<0.01)。集落计数,10 d时补肾生血药高剂量组BFU-E数量明显增加(P<0.01);14 d时补肾生血药高剂量组CFU-E、BFU-E数量明显增加(P<0.01),补肾生血药低剂量组CFU-E、BFU-E、CFU-GM数量明显增加(P<0.001,P<0.01)。结论对于环磷酰胺所致骨髓抑制小鼠,应用补肾生血药干预14 d时能发挥较明显的促骨髓细胞增殖作用,表现为促进骨髓细胞进入增殖周期,刺激红系、粒-巨系造血祖细胞增殖,提升造血干/祖细胞比例。

孕妇需要服用补血生血药吗

妊娠以后,为了胎儿生长发育,母体有一系列适应性的变化.如孕期血容量增加约50%,其中血浆增加45%,红细胞容量只增加30%,血液相对稀释,表现出生理性贫血.

补肾生血药对化疗早期骨髓细胞的影响

目的 观察补肾生血药对化疗早期骨髓细胞的影响。方法 选取65只SPF级6~8周龄体重(20±2)g雄性BALB/c小鼠,按随机数字表法将其分为空白组、模型组、阳性对照组、补肾生血药高剂量组、补肾生血药低剂量组,每组13只。预防给药5 d,补肾生血药高(47.0 g/kg)、低(23.5 g/kg)剂量组采用补肾生血药灌胃,其余组灌胃等量蒸馏水。预防给药结束后,模型组、阳性对照组、补肾生血药高及低剂量组均腹腔注射环磷酰胺(100 mg/kg),空白组腹腔注射等量生理盐水,连续3 d。同时进行干预用药,阳性对照组皮下注射重组人粒细胞集落刺激因子(30μg/kg),其余组与预防给药阶段相同,连续5 d。干预结束后,收集各组骨髓细胞,观察细胞超微结构,检测骨髓中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β(TGF-β)、γ干扰素(IFN-γ)含量,检测骨髓细胞JAK激酶2(JAK2)、信号转导及转录激活因子5 (STAT5)的mRNA及JAK2、STAT5及磷酸化STAT5 (P-STAT5)蛋白表达情况。结果 空白组骨髓有核细胞分布密集,核膜、胞膜完整,细胞器结构清晰。模型组有核细胞稀少,见大量细胞碎片,其余各组有核细胞数不同程度增多,胞体减小,细胞器尚好。模型组TNF-α、TGF-β、IFN-γ含量高于空白组,补肾生血药高、低剂量组TNF-α、TGF-β、IFN-γ含量低于模型组,补肾生血药高剂量组TGF-β、IFN-γ含量低于补肾生血药低剂量组,差异均有统计学意义(P <0.05或P <0.01)。与空白组比较,模型组JAK2、STAT5 m RNA表达下调;与模型组比较,补肾生血药高、低剂量组STAT5 mRNA表达上调;与补肾生血药低剂量组比较,补肾生血药高剂量组JAK2 mRNA表达下调,差异均有统计学意义(P <0.05或P <0.01)。模型组JAK2、P-STAT5、STAT5蛋白表达水平低于空白组,补肾生血药高、低剂量组JAK2、P-STAT5蛋白表达水平高于模型组,补肾生血药高剂量组P-STAT5蛋白表达水平低于补肾生血药低剂量组,差异均有统计学意义(P <0.05或P <0.01)。结论 补肾生血药可减轻化疗早期骨髓细胞损伤,其机制与降低造血负调控因子含量,正调控JAK2-STAT5通路有关。

从中药治疗β-地中海贫血症机理探讨肾生髓的分子基础

β-地中海贫血症是一种严重危害人类健康的遗传性溶血性贫血。本课题根据中医肾生髓的理论,用补肾生血药治疗β-地贫,从基因、分子水平研究疗效作用。主要研究内容及结果: 1.高发区现场临床研究取得了肯定的疗效我们在广西南宁地区,利用补肾生血药治疗β-地贫20例,15例有效,5例无效。

使用生血药可减少输血次数

来自美国新罕布什尔州Dartmouth-Hitchcock医学中心的Howard L.Corwin博士及其同事在2002年的《美国医学杂志》上发表文章称,使用生血药阿法依泊汀(epoetin alfa)冶疗危重病人贫血,可以减少输血的次数。 加强监护病房的重症病人常常因为贫血而需要输血,但是输血有一定的危险性。尽管血制品都经过严格的检测。

“复方生血灵”生血效果及对骨髓细胞中RNA、DNA合成影响的研究

应用“复方生血灵”对实验动物的生血效果进行观察,并与已知补血药“益血生”作药效学比较,结果表明,连续应用“复方生血灵”对失血性贫血、缺铁性贫血等具有生血作用。对实验动物骨髓细胞中RNA的合成具有促进作用。

益源生治疗血液透析患者贫血的临床观察

目的观察硫酸亚铁复方生血药(益源生)治疗慢性肾功能衰竭血液透析患者贫血的临床疗效。方法将60例患者分为治疗组30例,对照组30例。两组均采用血液透析法治疗。另外治疗组加用硫酸亚铁复方生血药口服,对照组加用多糖铁复合物胶原(力蜚能)口服。结果治疗组对提高患者的血红素及红细胞比容水平方面,效果明显优于对照组。结论硫酸亚铁复方生血药是采用中西医结合治疗的方法。方中的中西药取长补短,相辅相成。既直接补充了铁元素,又结合了中医治疗贫血起到了良好的治疗作用。

活血生肌油纱条治疗糖尿病足溃疡40例

目的:观察益气活血药物治疗糖尿病足溃疡的疗效。方法:降糖、改善血液循环,营养神经,消炎综合治疗基础上。清洁创面后用活血生肌油纱条覆盖观察疗效。结果:总有效率95%。提示:益气活血药物外用对糖尿病足溃疡有效。

抗衰老药物对大鼠脑DNA甲基化酶的影响

以￣３Ｈ－甲基掺入法测定大鼠脑中ＤＮＡ甲基化酶活性，发现在长期服用神方补肾生血药后，大鼠脑ＤＮＡ甲基化酶比活力增高，酶的热稳定性和对ＮａＣｌ的耐受力略有增强，最适ｐＨ改变。用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测酶粗提物的蛋白成分，发现给药组电泳行为有所改变。说明神方补肾生血药改变大鼠脑ＤＮＡ甲基化酶活性和酶学性质，从而影响其ＤＮＡ甲基化水平，可能是该药物抗衰老作用的途径之一。

归芪三七口服液治疗老年气、血虚证的临床研究

目的：观察归芪三七口服液对老年气、血虚证的疗效。方法：用归芪三七口服液对74例老年气、血虚证患者进行治疗，观察用药前后患者的相关中医证候与Hb、WBC、PC、IgG、IgA、C3以及NK、LAK、IL-2、LTT、CD3、CD4、CD8、cAMP、cGMP等血液学、免疫学与生物化学指标的变化：另设68例贞芪口服液对照组，对治疗前后两组上述指标进行组间比较。结果：归芪三七口服液对于升高老年气、血虚证患者的Hb、WBC与PC具有显著疗效：对细胞免疫和体液免疫指标具有明显的升高作用，总体疗效优于贞芪口服液。结论：归芪三七口服液是一种理想的免疫增强剂与补血生血药。

干姜治疗血证的规律刍议

历代医家对干姜功效的认识多集中于温中散寒、温肺化饮、回阳通脉,但对干姜在血证中之妙用的论述却相对较少,认识并不全面。笔者在查阅相关文献的基础上,系统梳理医家对干姜止血、生血、行血功用之认识。干姜在血证中之妙用的核心在于“温”,其通过温脾安中、温胃降气、温阳涩肠、温经散寒达到止血之功,又可引药生血以治血虚发热,还可辛温助血行以治血瘀诸证。但是肯定干姜治疗血证的基础上,临证运用还需注意炮制和配伍,方能更好的把握其治疗功用。本文归纳和总结了干姜血证治疗规律,为临床运用干姜治疗血证提供新的治疗思路,拓宽干姜临证运用范围。

益髓生血颗粒对辐射损伤小鼠骨髓细胞周期的影响

目的:观察补肾生血药益髓生血颗粒对骨髓细胞周期的影响,探讨其可能的造血调控机制。方法:将78只雄性昆明种小鼠随机分为正常组(A组)、模型组(B组)、G-CSF组(C组)、益髓生血颗粒高剂量组(D组)、益髓生血颗粒中剂量组(E组)、益髓生血颗粒低剂量组(F组),每组13只。采用60Co-γ射线全身一次性照射造成小鼠骨髓急性损伤模型。造模前,先预防给药2 d,D-F组分别按12,6,3 g.kg-1.d-1灌胃益髓生血颗粒,A～C组给予等量蒸馏水。造模第2天,C组按30μg.kg-1.d-1皮下注射G-CSF注射液,其余各组给药方法同预防给药,连续14 d。收集各组小鼠骨髓有核细胞,采用流式细胞仪检测骨髓细胞周期的分布情况。结果:与正常组相比,模型组G0/G1期细胞比例为(67.6±7.1)%,明显降低;S期细胞比例为(25.3±5.7)%,G2/M期细胞比例为(7.1±1.8)%,均明显增加(均P<0.001);细胞增殖指数为(32.4±7.1)%,明显升高(P<0.001)。与模型组相比,益髓生血颗粒高剂量组G0/G1期细胞比例为(62.2±3.6)%,明显降低(P<0.05);细胞增殖指数为(37.8±3.6)%,明显升高(P<0.05);益髓生血颗粒各剂量组处于S期的细胞比例分别为(29.1±2.7)%,(29.2±4.8)%,(29.5±3.9)%,均明显升高(均P<0.05)。结论:补肾生血药益髓生血颗粒可通过促进骨髓细胞由G0/G1期进入S期而明显促进细胞增殖。

Effects of Traditional Chinese Herbal Medicines on Blood Ions and Enzymes of Egg-laying Hens Under Heat Stress

[Objective] This study was conducted to investigate the effects of tradi- tional Chinese herbal medicines on blood biochemical indices of egg-laying hens under heat stress and to provide theoretical basis for clinical application of the medicines. [Method] One hundred of 88-day-old ISA-Brown hens were randomly di- vided into five groups. The hens in four groups were administrated with Prescription I herbal medicines, Prescription II herbal medicines, Vc and blank control under ar- tificially simulated heat stress, respectively. The last group was raised under normal temperature condition. Blood samples of the hens were collected on 1, 4, 8 and 10 d later and detected for their biochemical indices. [Result] The blood sodium （Na）, phosphorus （P）, potassium （K） and chlorine （CI） concentrations in hens under heat stress were decreased, while the activities of alanine aminotransferase （ALT）, lactate dehydrogenase （LDH） and creatine kinase （CK） were increased. These indices grad- ually returned to normal levels after the use of traditional Chinese herbal medicines. [Conclusion] The herbal medicines can relieve the adverse effects caused by heat stress to blood biochemical indices via different metabolic pathways of ions and en- zymes.