生长分化因子11对软脂酸诱导小鼠主动脉内皮细胞损伤的保护作用

目的探索生长分化因子11 （GDF-11）对软脂酸（PA）诱导的小鼠主动脉内皮细胞（MAECs）的作用及其相关机制。 方法通过加或不加内皮型一氧化氮合酶（eNOS）抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯（L-NAME）或Smad3抑制剂SIS3研究eNOS和Smad通路在GDF-11保护软脂酸诱导的MAECs中的作用，将MAECs分为：（1）对照组；（2）PA组；（3）PA＋GDF-11组；（4）PA＋GDF-11＋L-NAME组；（5）PA＋GDF-11＋SIS3组，培养24 h后，活性氧试剂盒及实时-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测各组细胞氧化应激水平；流式细胞术检测各组细胞凋亡率；Western blotting法检测各组抗凋亡蛋白Bcl-2、凋亡蛋白Bax及Cleaved-caspase3蛋白表达水平。研究GDF-11对MAECs Smad信号通路的影响，MAECs分为：（1）对照组；（2）GDF-11组；（3）GDF-11＋转化生长因子β（TGF-β）受体Ⅰ抑制剂组（GDF-11＋ SB431542组），培养30 min后，免疫荧光染色法检测各组MAECs细胞磷酸化Smad2/3 （P-Smad2/3）表达水平；研究GDF-11对MAECs AMPK/eNOS信号通路的影响，MAECs分为：（1）对照组；（2）GDF-11组；（3） GDF-11＋AMPK抑制剂Compound C组；（4）GDF-11＋L-NAME组；（5）GDF-11＋Compound C＋L-NAME组，培养30 min后，Western blotting法检测各组细胞AMPK、磷酸化AMPK （P-AMPK）、eNOS、磷酸化eNOS （P-eNOS）、蛋白激酶B（Akt）、磷酸化Akt （P-Akt）、蛋白激酶A （PKA）、磷酸化PKA （P-PKA）水平。多组之间比较采用单因素方差分析，组间多重比较用最小显著性差异t检验。 结果与对照组相比，PA组细胞氧化应激和凋亡率显著增加（28.9%±2.2％比7.9%±1.5%），PA＋GDF-11组细胞氧化应激和凋亡率明显低于PA组（12.6%±1.6％比28.9%±2.2%），而PA＋GDF-11＋L-NAME组和PA＋GDF-11＋SIS3组细胞氧化应激和凋亡率又明显低于PA＋GDF-11组（分别为21.8%±2.0%、20.1%±1.8%、12.6%±1.6%，F= 97.89，P〈0.05）。与对照组相比，GDF-11组P-Smad2/3表达水平明显增加，而GDF-11＋SB431542组P-Smad2/3表达水平明显降低（F=325.30 ，P〈0.05）。与对照组相比，GDF-11组P-AMPK/AMPK、P-eNOS/eNOS水平显著提高，P-Akt/Akt、P-PKA/PKA水平无明显差异，分别加入了Compound C、L-NAME或者Compound C联合L-NAME显著抑制了P-AMPK/AMPK、P-eNOS/eNOS表达水平（F=237.65、281.08，均P〈0.05），而对P-Akt/Akt、P-PKA-PKA水平无明显影响（F=1.94、1.48，均P〉0.05）。 结论GDF-11可抗软脂酸诱导的MAECs氧化应激和凋亡，增加Bcl-2表达水平、降低Bax、Cleaved-caspase3表达水平，其保护内皮细胞的机制与激活TGF-β/Smad和AMPK/eNOS信号途径有关。

急性冠状动脉综合征患者血清中生长分化因子-1变化及其临床意义

目的:观察急性冠状动脉综合征(ACS)患者血清中生长分化因子-1(GDF-1)的水平及其变化的临床意义。方法:以2013年5月-2014年5月收治的ACS患者100例为研究对象,其中ST抬高型心肌梗死者(STEMI组)33例、非ST段抬高型心肌梗死者(NSTEMI组)32例、不稳定型心绞痛者(UA组)35例,以同期收治的30例非ACS成年人为对照组。比较四组患者血清中的GDF-1水平,探讨ACS与相关实验室指标的相关性。结果:四组组间的GDF-1水平差异均存在统计学意义,且正常组>UA组>NSTEMI组>STEMI组。肌钙蛋白I(CTnI)和CK-MB水平在四组间也存在显著差异,正常组上述指标水平低于ACS组;吸烟史、CTnI、CK-MB和GDF-1是ACS患者的危险因素;GDF-1水平与患者的年龄、吸烟史、是否合并高血压糖尿病、血脂指标中的TC和LDL以及CTnI、CK-MB显著负相关,与HDL显著正相关(P<0.05)。结论:血清GDF-1水平在正常对照组、UA组、NSTEMI组和STEMI组依次降低,且与患者的不良生活习惯、合并症、血脂指标及心肌坏死标志物相关,提示GDF-1是心肌的保护因子,建立良好的生活习惯,定时检测GDF-1水平,有利于及早发现先兆ACS。

低氧对大鼠肾小球内皮细胞TGF-β1和转分化相关蛋白表达的影响

目的:研究低氧对大鼠肾小球内皮细胞(rGENCs)转化生长因子(TGF-β1)和转分化相关蛋白表达的影响。方法:低氧培养箱培养rGENCs,根据低氧培养时间将细胞随机分为5组,检测细胞增殖活性;TGF-β1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和血小板内皮细胞粘附分子-1(CD-31)的表达情况。结果:1.随着低氧培养时间的延长,rGENCs增殖活性增加。72h活性最大(2.040±0.110,F=546.63,P<0.001);2.与常氧组比较,低氧组的TGF-β1(F=16.320,P<0.001)和α-SMA(F=5.032,P=0.009)表达升高,而CD-31(F=9.882,P<0.001)表达降低。结论:1.低氧可致rGENCs增殖活性增加,TGF-β1表达上调,且具有时间依赖性。2.低氧可致rGENCs中的间充质细胞特异性蛋白α-SMA表达上调,同时内皮细胞(ECs)特异性蛋白CD-31表达下调。3.低氧可诱导rGENCs发生内皮细胞-间充质细胞转分化(EndMT),可能是导致肾间质纤维化(RIF)形成的原因。

GDF1基因与先天性心脏病的相关性研究进展

先天性心脏病是最常见的先天性畸形类别,而GDF1是近年来发现的转化因子-β超家族成员之一,其定位于19p13.11,可通过多种信号通路调控心脏发育,在先天性心脏病的发生过程中起到了重要的调控作用,但其具体作用机制并不十分清楚。本文就GDF1基因与先天性心脏病的关联性及可能的作用机制进行综述。

肾疏宁抑制腹膜透析相关性腹膜纤维化的实验研究

目的:观察中药复方肾疏宁对腹膜透析相关性腹膜纤维化大鼠腹膜功能、形态、相关蛋白、细胞因子表达的影响,初步探讨其防治作用及可能机制。方法:腹膜透析液+红霉素注射法诱发SD大鼠腹膜透析腹膜纤维化模型,依体质量随机分为空白对照组、低浓度模型组(1.5%腹膜透析液模型组)、高浓度模型组(4.25%腹膜透析液模型组)、低浓度干预组及高浓度干预组,每组24只。低浓度干预组及高浓度组干预组予肾疏宁[按43.93 g.(kg.d)-1]灌胃,对照组和模型组予等量生理盐水灌胃。检测腹透液葡萄糖浓度,计算超滤量(UF)。观察腹膜厚度改变,酶联免疫法(ELISA)检测腹膜组织转分化生长因子-β1(TGF-β1)表达,Western blot法测量α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。结果:第12周治疗后,低浓度干预组超滤量(-4.21±1.83)mL、腹膜厚度(74.68±15.33)μm、TGF-β1(112.74±22.51)pg.mL-1、α-SMA(0.68±0.39),高浓度组干预组超滤量(-5.83±1.50)mL、腹膜厚度(211.75±58.23)μm、TGF-β1(110.97±16.23)pg.mL-1、α-SMA(0.73±0.24),与同浓度模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:肾疏宁可改善腹膜超滤量,抑制腹膜纤维化的进展,其作用机制可能通过延缓腹膜相关细胞间充质细胞转分化(EMT)进程来实现。

胃癌组织GDF15表达及其临床意义分析

目的:探讨生长分化因子15(GDF15)在118例胃癌组织的表达及其临床意义。方法:应用免疫组化法分别检测118例胃癌组织和96例癌旁正常组织中GDF15的表达。结果:免疫组化法结果显示,GDF15在胃癌组织中的阳性表达率为85.8%(97/113),明显低于癌旁正常组织表达率95.8%(92/96),两者比较差异有统计学意义,P=0.014。GDF15蛋白的表达与胃癌Lauren分型(χ2=7.758,P=0.005)和组织学分级(χ2=4.598,P=0.032)有关,与胃癌患者年龄(χ2=2.906,P=0.088)、性别(χ2=0.125,P=0.723)、肿瘤长径大小(χ2=0.254,P=0.614)、肿瘤临床分期(χ2=0.125,P=0.723)和有无淋巴结转移(χ2=1.139,P=0.286)无关。结论:GDF15在胃癌组织中低表达,并且与胃癌Lauren分型和组织学分级密切有关。