白蛋白结合型紫杉醇与多西紫杉醇在人表皮生长因子受体-2阳性乳腺癌患者新辅助化疗中的疗效对比研究

目的:分析曲妥珠单抗+帕妥珠单抗分别联合不同类型紫杉醇应用于人表皮生长因子受体-2(HER2)阳性乳腺癌的疗效。方法:纳入90例拟行新辅助化疗的HER2阳性乳腺癌患者,根据曲妥珠单抗+帕妥珠单抗分别联合不同类型紫杉醇,将患者分为两组,44例采用多西紫杉醇方案化疗分为对照组,46例采用白蛋白结合型紫杉醇方案化疗分为观察组。以21 d为1个周期,治疗6个周期后,比较两组近期疗效、化疗前后Ki-67阳性率、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)相对表达量、组织多肽特异性抗原(TPS)水平、生存情况、不良反应。结果:两组客观缓解率、疾病控制率比较差异无统计学意义(均P>0.05),两组总体病理完全缓解率比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗6个周期后,两组Ki-67阳性率、MMP-9相对表达量、TPS水平均降低,且观察组低于对照组(均P<0.05)。观察组中位生存期长于对照组(P<0.05)。两组不良反应比较差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:相较于多西紫杉醇,白蛋白结合型紫杉醇可提高HER2阳性乳腺癌患者总体病理完全缓解率,降低Ki-67阳性率、MMP-9相对表达量和TPS水平,延长患者生存期。

帕妥珠单抗联合白蛋白结合型紫杉醇和卡铂治疗人表皮生长因子受体2阳性晚期乳腺癌患者的疗效

目的探讨帕妥珠单抗联合白蛋白结合型紫杉醇和卡铂治疗人表皮生长因子受体2(HER2)阳性晚期乳腺癌患者的疗效。方法根据治疗方式的不同将108例HER2阳性晚期乳腺癌患者分为观察组(n=63)和对照组(n=45),对照组患者给予白蛋白结合型紫杉醇联合卡铂治疗,观察组患者给予帕妥珠单抗联合白蛋白结合型紫杉醇和卡铂治疗。比较两组患者的肿瘤标志物[癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)、糖类抗原15-3(CA15-3)]水平、血管内皮生长因子(VEGF)水平、临床疗效及不良反应发生情况。结果治疗后,两组患者CEA、CA125、CA15-3、VEGFA、VEGFB水平均低于本组治疗前,观察组患者CEA、CA125、CA15-3、VEGFA、VEGFB水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。观察组患者的疾病控制率高于对照组,差异有统计学意义(P﹤0.05)。两组患者的不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P﹥0.05)。结论帕妥珠单抗联合白蛋白结合型紫杉醇和卡铂治疗HER2阳性晚期乳腺癌患者的疗效显著,可降低肿瘤标志物及VEGFA、VEGFB水平,且具有一定的安全性。

胰岛素样生长因子结合蛋白2对高血糖环境诱导人足细胞凋亡的影响及机制研究

背景糖尿病肾病患者日益增加,仍有患者在现有治疗中进展为终末期肾病,因此迫切需要新型治疗靶点。目的探讨胰岛素样生长因子结合蛋白2(insulin like growth factor binding protein 2,IGFBP2)对高血糖环境诱导人足细胞凋亡的影响及机制。方法体外培养的人足细胞随机分为正常血糖(normal glucose,NG)组(5 mmol/L)以及高血糖(high glucose,HG)24 h组、HG 48 h组、HG 72 h组(30 mmol/L)。采用RT-qPCR法检测IGFBP2、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor,TNF-α)和细胞间黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)mRNA表达水平,Western blot检测IGFBP2和Cleaved Caspase 3蛋白表达水平,以此确定后续实验HG处理的最佳时间点。将IGFBP2小干扰RNA转染进入足细胞并分为NG组、阴性对照干预组(NG-NC-siRNA)、IGFBP2敲低siRNA干预组(NG-IGFBP2-siRNA1、NG-IGFBP2-siRNA2、NG-IGFBP2-siRNA3),RT-qPCR检测IGFBP2 mRNA表达水平,选择敲低效率最高的IGFBP2-siRNA用于后续实验。根据实验内容将足细胞随机分为:(1)NG组和HG组;(2)NG组和NG+125 ng/mL rhIGFBP2组;(3)HG组和HG-IGFBP2-siRNA组。(1)(2)(3)均通过RT-qPCR检测TNF-α和ICAM-1 mRNA表达水平,JC-1染色法检测线粒体膜电位,共聚焦显微镜检测线粒体超氧化物和活性氧荧光强度,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果随HG处理时间增加,RT-qPCR结果显示IGFBP2、TNF-α和ICAM-1 mRNA水平随时间升高,Western blot结果显示IGFBP2和Cleaved Caspase 3蛋白水平随时间升高。与NG组比较,RT-qPCR结果显示IGFBP2、TNF-α和ICAM-1均在HG 72 h时mRNA水平最高(P<0.05),Western blot结果显示IGFBP2在HG 72 h时和Cleaved Caspase 3在HG 48 h时蛋白水平最高(P<0.05),据此选72 h为后续实验诱导时间点。RT-qPCR检测结果显示,与NG组相比,阴性对照干预组mRNA表达无统计学差异(P>0.05),NG-IGFBP2-siRNA2组IGFBP2 mRNA表达水平最低(P<0.05),敲除效率最高,因此选择IGFBP2-siRNA2进行后续实验。与NG组相比较,HG组线粒体膜电位绿/红色荧光强度比值、线粒体超氧化物和活性氧荧光强度以及细胞凋亡率均增强(P<0.05)。与NG组相比较,NG+125 ng/mL rhIGFBP2组的TNF-α和ICAM-1 mRNA水平、线粒体膜电位绿/红色荧光强度比值、线粒体超氧化物和活性氧荧光强度以及细胞凋亡率均升高(P<0.05)。与HG组相比较,HG-IGFBP2-siRNA组的TNF-α和ICAM-1 mRNA表达水平、线粒体膜电位绿/红色荧光强度比值、线粒体超氧化物和活性氧荧光强度以及细胞凋亡率均降低(P<0.05)。结论敲除IGFBP2后通过减弱高血糖处理下的线粒体功能紊乱和氧化应激降低人足细胞凋亡,因此抑制IGFBP2的表达有望成为糖尿病肾病的潜在治疗策略。

胰岛素样生长因子2结合蛋白2基因多态性与妊娠期糖尿病的关系

目的分析胰岛素样生长因子2结合蛋白2(IGF2BP2)基因多态性与妊娠期糖尿病(GDM)的关系。方法选择GDM患者84例为GDM组,另选取同期健康孕妇84例为对照组,收集两组一般资料。实时聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性法检测IGF2BP2基因rs4402960位点、rs1470579位点和rs11705701位点的多态性。结果GDM组总胆固醇、空腹血糖和空腹胰岛素高于对照组(P<0.05)。与对照组比较,GDM组IGF2BP2基因rs4402960位点GG基因型较少,TT基因型较多,等位基因T频率较高,等位基因G频率较低(P<0.05);rs11705701位点等位基因A频率较低,等位基因G频率较高(P<0.05);而其他基因型和基因频率两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论IGF2BP2基因多态性与GDM发生有关,可通过基因多态性结果评估和筛选GDM高风险人群,以提高对GDM控制。

左心室舒张功能结合血清微小RNA-152-5p、潜在转化生长因子结合蛋白2水平与射血分数保留的心力衰竭患者左心室重构的相关性

目的探讨左心室舒张功能结合血清微小RNA-152-5p(miR-152-5p)、潜在转化生长因子结合蛋白2(LTBP-2)水平与射血分数保留的心力衰竭(HFpEF)患者左心室重构的相关性。方法选取2019年8月至2020年8月在唐山中心医院进行治疗的HFpEF患者48例为HFpEF组,同期健康体检者52例为对照组。以实时荧光定量PCR法和酶联免疫吸附试验法分别检测血清miR-152-5p、LTBP-2水平。研究对象均进行超声心动图检查,收集二尖瓣环舒张早期峰值速度(E')、晚期峰值充盈速度(A)、二尖瓣口舒张早期峰值充盈速度(E)、左心室舒张末期内径(LVIDd)、舒张末期后壁厚度(PWTd)、舒张末期室间隔厚度(IVSTd),并计算E/A、E/E'及左心室质量(LVM)值。使用Pearson法分析血清miR-152-5p、LTBP-2、E/A、E/E'与LVIDd、IVSTd、PWTd、LVM之间的相关性。结果HFpEF组患者E/A值低于对照组,血清miR-152-5p、LTBP-2水平及E/E'值高于对照组,差异有统计学意义(t=12.722、21.830、9.882、15.979,P<0.05)。HFpEF组患者的LVIDd、IVSTd、PWTd、LVM水平高于对照组,差异有统计学意义(t=2.044、2.894、5.733、3.973,P<0.05)。HFpEF组患者血清miR-152-5p、LTBP-2、E/E'表达水平均与LVIDd、IVSTd、PWTd、LVM呈正相关(r=0.447、0.425、0.437、0.473、0.414、0.338、0.422、0.347、0.492、0.412、0.385、0.367,P<0.05);E/A与LVIDd、IVSTd、PWTd、LVM呈负相关(r=-0.441、-0.374、-0.369、-0.438,P<0.05)。结论血清miR-152-5p、LTBP-2水平以及E/E'值、E/A水平与HFpEF患者左心室重构有关。

泥蚶(Tegillarca granosa)生长因子受体结合蛋白2(GRB2)基因的克隆与表达分析

通过已构建的泥蚶(Tegillarca granosa)转录组文库,利用SMART RACE技术扩增得到泥蚶Tg-GRB2基因的全长cDNA序列,并对其生物信息学、组织表达及发育阶段表达特征进行了分析。结果表明,泥蚶Tg-GRB2 cDNA全长1283bp,开放阅读框为708bp,编码236个氨基酸;蛋白结构预测显示,Tg-GRB2蛋白包含SH3-SH2-SH3三个功能域,SH2结构域由两端的α-螺旋和中间反向平行的β-折叠片构成,SH3结构域主要由β-折叠片组成,具备典型的结构特征;氨基酸序列比对发现,Tg-GRB2与脊椎动物的同源性为62.1%—63.8%,而与玻璃海鞘和日本血吸虫同源性较低。qRT-PCR检测结果显示:Tg-GRB2 mRNA在泥蚶血液、斧足、鳃、外套膜、闭壳肌、内脏团6个组织中都有表达,而在血液中的表达量极显著地高于其它组织;在泥蚶的不同发育阶段中,Tg-GRB2 mRNA在2—4细胞胚胎、原肠胚、担轮幼虫、D形幼虫中均有较高的表达量,而在D形幼虫中表达量最高,表明Tg-GRB2基因在泥蚶早期发育中发挥重要调节作用。

文蛤生长因子受体结合蛋白2(GRB2)基因克隆、时空表达及SNP位点筛查

为探索贝类GRB2基因的结构、功能特征,以及在贝类生长发育过程中的作用,实验通过已构建的文蛤转录组文库,利用SMART RACE技术扩增得到了文蛤GRB2基因的c DNA全长序列,对其生物信息学、组织及发育阶段表达特征进行了分析,并利用直接测序方法在外显子中筛选SNP位点。结果显示,GRB2基因c DNA全长1 791 bp,开放阅读框669 bp,编码223个氨基酸,蛋白由SH-SH2-SH3 3个结构域组成;氨基酸序列比对发现,文蛤G RB2与泥蚶的同源性最高,达到65.6%,与脊椎动物的同源性都在60%以上,说明GRB2基因在进化过程中比较保守。荧光实时定量PCR(qRT-PCR)结果表明,GRB2在文蛤6个组织和10个发育时期中均有表达,但不同组织间的表达量并没有显著差异;发育时期中的表达量呈现逐渐升高的趋势,在壳顶幼虫时期达到最高,之后表达量又有所降低。SNP位点的筛选结果表明,在G RB2基因的外显子区域共发现16个SNP位点。

乳腺癌组织中胰岛素样生长因子结合蛋白-2的表达及其与雌激素受体、孕激素受体相关性的研究

目的研究胰岛素样生长因子结合蛋白-2(IGFBP-2)在乳腺癌组织中的表达,探讨其与乳腺癌临床病理学特征的关系及与雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)的相关性。方法用免疫组织化学SP法检测42例乳腺癌患者肿瘤组织中IGFBP-2和ER、PR的表达水平。结果在不同大小原发灶、年龄和类型乳腺癌组织中IGFBP-2的表达率无显著差异(P>0.05);IGFBP-2在有淋巴结转移乳腺癌中的表达显著高于无淋巴结转移乳腺癌(P<0.05)。IGFBP-2与ER在乳腺癌中的表达呈中度正相关(P<0.01,rs=0.486);与PR在乳腺癌中表达无明显相关性(P>0.05,rs=0.271)。结论IGFBP-2的表达在乳腺癌的发展和侵袭转移可能起重要作用,并与ER在乳腺癌中的表达呈正相关,提示IGFBP-2的高表达可能是乳腺癌预后不良的指标之一,对乳腺癌的临床治疗有一定的指导作用。

老年乳腺癌组织雌激素受体、孕激素受体与富集AT序列的特异性结合蛋白1及人表皮生长因子受体-2表达的相关性

目的探讨老年乳腺癌组织中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)与富集AT序列的特异性结合蛋白(SATB)1及人表皮生长因子受体(Cerb B)2表达的相关性。方法回顾性分析原发性乳腺癌患者172例的临床资料。以距肿瘤组织超过5 cm外的癌旁组织为对照,用免疫组化方法检测乳腺癌组织中SATB1、CerbB2表达及其与临床病理特征、ER、PR的关系。结果 SATB1、CerbB2在乳腺癌组织中表达的阳性率显著高于癌旁组织(P<0.05)。组织学分级Ⅲ级的乳腺癌组织中SATB1、CerbB2表达阳性率最高,其次为Ⅱ级、Ⅰ级,差异有统计学意义(P<0.05);临床分期为Ⅲ期的乳腺癌组织中SATB1、CerbB2表达阳性率显著高于Ⅰ+Ⅱ期(P<0.05);有淋巴结转移的乳腺癌组织中SATB1、CerbB2表达阳性率显著高于无淋巴结转移者(P<0.05)。SATB1、CerbB2在乳腺癌组织中的表达与ER、PR表达呈显著负相关(r_(ER)=-0.387,-0.372,r_(PR)=-0.296,-0.329,均P<0.05)。结论 SATB1、CerbB2在老年乳腺癌组织中呈高表达,且与ER及PR表达呈显著负相关。

成纤维细胞生长因子2和尿肝素结合蛋白在产后尿路感染诊断中的应用价值及影响因素分析

目的:分析成纤维细胞生长因子2(FGF2)和尿肝素结合蛋白(U-HBP)在产后尿路感染诊断中的应用价值及影响因素。方法:选取2021年3月—2023年8月临海市中医院收治的210例产妇为研究对象,根据是否发生产后尿路感染将其分为尿路感染组(n=36)和非尿路感染组(n=174)。比较两组临床资料,分析影响产后尿路感染的因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析FGF2、U-HBP早期诊断产后尿路感染的价值。结果:尿路感染组患者体质量指数、既往患尿路感染、患妊娠期糖尿病、FGF2、U-HBP水平高于非尿路感染组,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,体质量指数、妊娠期糖尿病、FGF2、U-HBP是影响产后尿路感染的主要因素(P<0.05)。FGF2、U-HBP以及两者联合检测早期诊断产后尿路感染的ROC曲线下面积分别为0.713、0.930、0.952。结论:FGF2、U-HBP是产后尿路感染的危险因素,可作为早期诊断产后尿路感染的生物学标志物。

人类真核延伸因子1A2与生长因子受体结合蛋白2在胰腺癌组织中的表达及临床病理意义

目的:探讨人类真核延伸因子1A2(eukaryotic elongation factor 1A2,EEF1A2)和生长因子受体结合蛋白2(growth factor receptor-bound 2,GRB2)在胰腺癌组织中的表达、相互关系及临床病理意义.方法:应用免疫组织化学方法检测97胰腺癌及其周边胰腺组织中EEF1A2和GRB2蛋白表达情况.结果:EEF1A2蛋白在胰腺癌周边组织中不表达,但在77.8%(76/97)的胰腺癌组织中表达阳性.EEF1A2的异常表达与胰腺癌周边淋巴结转移(χ2=4.28,P=0.039)和神经浸润显著相关(χ2=4.11,P=0.043).GRB2蛋白在胰腺癌和周边胰腺组织中阳性表达率分别为82.5%(80/97)和30.2%(31/97),胰腺癌组织中GRB2蛋白阳性率显著高于周边胰腺组织(χ2=48.5,P<0.001).GRB2阳性表达率与淋巴结转移显著相关(χ2=4.63,P=0.031).胰腺癌中EEF1A2和GRB2表达具有显著等级正相关(rs=0.451,P<0.001).结论:EEF1A2和GRB2的表达与胰腺癌的生物学行为密切相关,且两者之间的表达强度具有显著等级正相关.

缢蛏生长因子受体结合蛋白2基因克隆、时空表达及SNP筛查

为了探索生长因子受体结合蛋白2(GRB2)在缢蛏生长发育中的作用,本实验基于缢蛏转录组文库,利用SMART RACE技术克隆缢蛏GRB2(Sc-GRB2)基因的cDNA全长序列,分析其在不同组织和发育时期的表达差异,并在外显子中进行了SNP位点筛选。结果表明,Sc-GRB2基因cDNA全长1 223bp,开放阅读框711bp,编码236个氨基酸;氨基酸序列比对发现,缢蛏与文蛤、泥蚶等双壳贝类同源性较高(64%、59%),而与其他物种的同源性为45%~58%,表明GRB2基因比较保守;不同组织的荧光定量PCR(qRT-PCR)结果显示,Sc-GRB2基因在缢蛏7个组织中均有表达,其中足中的表达量极显著地高于其他6个组织(P<0.01);在8个发育时期的表达差异分析发现,该基因在稚贝期表达量极显著地高于其他7个时期(P<0.01)。SNP位点筛选结果表明,在Sc-GRB2基因的外显子区域共发现11个SNP位点。

乳铁蛋白对去卵巢大鼠骨胰岛素样生长因子-1受体及其结合蛋白-2、4 mRNA表达的影响

目的探讨乳铁蛋白对去卵巢大鼠骨组织中胰岛素样生长因子-1受体(insulin-like growth factor-1 receptor,IGF-1R)、胰岛素样生长因子结合蛋白-2(insulin-like growth factor binding protein-2,IGFBP-2)、胰岛素样生长因子结合蛋白-4(insulin-like growth factor binding protein-4,IGFBP-4)mRNA表达的影响。方法50只清洁级雌性SD大鼠采用数字表法随机分为去卵巢模型组(Ovx组)40只与假手术组(Sham组)10只,同时把去卵巢大鼠模型组随机分为模型组(蒸馏水2 m L/d)(Con组)、乳铁蛋白(0.1 g/kg·d)组(LF1)、乳铁蛋白(1 g/kg·d)组(LF2)、乳铁蛋白(2 g/kg·d)组(LF3),每组10只,连续干预治疗6个月后,采用实时荧光定量PCR检测各组大鼠骨组织中IGF-1R、IGFBP-2、IGFBP-4 mRNA表达的情况,分析其异同。结果 HE染色结果显示:Sham组骨小梁排列密集,细胞数量多;而Con组骨小梁排列稀疏,细胞数量少;LF组介于Sham组和Con组之间,不同的乳铁蛋白干预后,与Con组相比,随着乳铁蛋白剂量增大,其骨小梁排列密度增大,细胞数量增多。与Sham组比较,Con组大鼠骨组织中IGFBP-2、IGFBP-4 mRNA相对表达量明显增高,IGF-1R mRNA相对表达量明显降低(均P<0.01)。与Con组比较,LF1组、LF2组、LF3组大鼠骨组织中IGFBP-2 mRNA相对表达量明显下降为0.085±0.01、0.013±0.00、0.012±0.00,IGFBP-4 mRNA下降为0.329±0.07、0.040±0.01、0.032±0.01,二者下降量均与乳铁蛋白浓度正相关(均P<0.01);而IGF-1R mRNA相对表达量升高为1.977±0.55、3.139±0.53、3.600±2.46,呈剂量依赖性升高。结论乳铁蛋白可能抑制去卵巢大鼠骨组织IGFBP-2、IGFBP-4 mRNA的表达,促进其IGF-1R mRNA的表达。

生长因子受体结合蛋白2表达与结直肠癌进展和预后的相关性

目的:评价生长因子受体结合蛋白2(growth factor receptor-bound protein 2,Grb2)表达水平与结直肠癌进展及预后的关系。方法:对Grb2的蛋白表达及细胞定位进行免疫组化检测。用t检验、chi-square检验等分析Grb2的表达与年龄、性别、肿瘤部位、分化等级、淋巴结转移个数、TNM分期、辅助化疗、血清癌胚抗原(CEA)和血清CA19-9之间的关系。用Kaplan-Meier法分析Grb2的表达水平对患者生存率的影响;用Cox回归分析结直肠癌预后的影响因素。结果:Grb2主要表达于结直肠癌上皮细胞的胞质。结直肠癌组织中胞质Grb2的表达显著高于腺瘤和癌旁组织(P<0.05),而结肠癌组织、腺瘤、癌旁组织中胞核Grb2中的表达水平差异无统计学意义。癌上皮细胞胞质中Grb2高表达与年龄、性别、肿瘤部位、分化等级、TNM分期、辅助化疗、血清CEA、血清CA19-9之间均无相关性,Grb2表达与淋巴结转移个数有相关性(P=0.001)。Cox单因素分析发现,胞质Grb2高表达能预测患者的不良预后;进一步纳入TNM等指标,Cox多因素分析发现,Grb2是结直肠癌预后的独立影响因素[无瘤生存风险比(HR)=2.664,P=0.015;总体生存风险比(HR)=2.574,P=0.019]。结论:Grb2高表达与结直肠癌进展密切相关,是结直肠癌预后的独立危险因素。

宫颈癌组织中血管内皮生长因子和Grb2协同结合蛋白2的表达与患者放射治疗敏感性及预后的相关性

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)和Grb2协同结合蛋白2(Gab2)在宫颈癌组织中的表达与患者放射治疗敏感性及预后的相关性。方法选择2014年3月至2015年9月于徐州医科大学附属医院行根治性放疗的120例宫颈癌患者为研究对象,所有患者于放射治疗前取宫颈癌组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测宫颈癌组织中VEGF、Gab2 mRNA的表达,采用免疫组织化学法检测宫颈癌组织中VEGF、Gab2蛋白的表达,采用Spearman相关性分析观察VEGF和Gab2蛋白表达水平与放射治疗敏感性的关系;所有患者随访5 a,统计VEGF、Gab2蛋白表达阳性和阴性患者的5 a生存率。结果放射治疗后3个月,120例患者中,88例肿瘤消失(肿瘤消失组),32例肿瘤未控(肿瘤未控组);肿瘤消失组患者宫颈癌组织中VEGF和Gab2 mRNA相对表达量显著低于肿瘤未控组(P<0.05)。放射治疗后5 a,肿瘤消失组患者中,53例肿瘤治愈(肿瘤治愈组),35例肿瘤复发(肿瘤复发组);肿瘤治愈组患者宫颈癌组织中VEGF和Gab2 mRNA相对表达量显著低于肿瘤复发组(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,宫颈癌组织中VEGF和Gab2 mRNA表达水平与放射治疗敏感性呈显著负相关(r=-0.459、-0.720,P<0.05)。120例患者中,VEGF蛋白表达阳性80例(66.67%),阴性40例(33.33%);Gab2蛋白表达阳性103例(85.83%),阴性17例(14.17%)。VEGF蛋白表达阳性和阴性患者的5 a生存率分别为16.25%(13/80)、67.5%(27/40),VEGF蛋白表达阳性患者的5 a生存率显著低于表达阴性患者(χ^(2)=31.519,P<0.05)。Gab2蛋白表达阳性和阴性患者的5 a生存率分别为26.21%(27/103)、76.47%(13/17),Gab2蛋白表达阳性患者的5 a生存率低于表达阴性患者(χ^(2)=16.585,P<0.05)。结论宫颈癌组织中VEGF和Gab2基因表达上调,VEGF和Gab2基因表达水平与放射治疗敏感性呈显著负相关;VEGF和Gab2蛋白表达阴性患者的预后较好,检测VEGF和Gab2蛋白表达对评估宫颈癌患者预后有一定价值。

敲低潜在转化生长因子β结合蛋白2(LTBP2)抑制SK-MEL-28恶性黑素瘤细胞的侵袭和迁移

目的检测潜在转化生长因子β结合蛋白2(LTBP2)在恶性黑素瘤组织及细胞中的表达,及其对恶性黑素瘤细胞侵袭和迁移的影响。方法采用免疫组织化学染色法检测95例恶性黑素瘤组织LTBP2的表达,并采用Spearman秩相关法分析LTBP2阳性率与黑素瘤临床病理指标的关系。采用实时定量PCR检测恶性黑素瘤组织和SK-MEL-28黑素瘤细胞LTBP2的mRNA水平, Western blot法检测SK-MEL-28黑素瘤细胞LTBP2的蛋白水平。利用小干扰RNA技术沉默SK-MEL-28细胞中LTBP2的表达, Transwell^(TM)实验检测敲低LTBP2后对SK-MEL-28细胞侵袭能力的影响,细胞划痕实验检测对细胞迁移的影响。结果恶性黑素瘤组织中LTBP2阳性率显著高于皮肤良性痣组织, LTBP2阳性率与恶性黑素瘤患者TNM分期、远处转移及淋巴结转移正相关。LTBP2在恶性黑素瘤SK-MEL-28细胞中的表达高于正常黑素HEMa-LP细胞。敲低SK-MEL-28细胞LTBP2的水平后, SK-MEL-28细胞侵袭和迁移能力降低。结论 LTBP2在皮肤恶性黑素瘤组织和细胞高表达,敲低SK-MEL-28细胞LTBP2的水平后,抑制SK-MEL-28细胞的侵袭及迁移。

血清胰岛素样生长因子结合蛋白-2水平与消化道恶性肿瘤的关系

目的:探讨胰岛素样生长因子结合蛋白-2(IGFBP-2)与消化道恶性肿瘤发生之间的关系。方法:用酶联免疫吸附试验法测定116例原发消化道恶性肿瘤及21例手术治疗后6周患者血清IGFBP-2的水平,并同步检测血管内皮生长因子(VEGF)、胰岛素样生长因子(IGF)-1、2水平,与28例消化道良性疾病和40例健康体检者进行对照比较。结果:原发消化道恶性肿瘤组血清IGFBP-2水平显著高于健康对照组(P<0.01);21例手术治疗后6周患者、消化道良性疾病对照和健康对照之间均无显著性差异。相关分析显示消化道恶性肿瘤患者血清IGFBP-2水平与VEGF、IGF-1、IGF-2呈正相关性(r=0.454,P<0.01;r=0.290,P<0.01;r=0.276,P<0.01)。结论:IGFBP-2为促肿瘤生长因子,可作为消化道恶性肿瘤的检测指标,其对于研究肿瘤发生发展、辅助诊断消化道恶性肿瘤及评价手术治疗效果都具有重要意义。

脐血中胰岛素、胰岛素样生长因子-Ⅰ及胰岛素样生长因子结合蛋白-2与胎儿生长发育的关系

目的探讨脐血中胰岛素、胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)及胰岛素样生长因子结合蛋白-2(IGFBP-2)的水平与胎儿生长发育的关系及意义。方法单胎足月正常妊娠(无产科并发症)孕妇及其新生儿各90例,根据出生体重将新生儿分为低体重儿(SGA)组、正常体重儿(AGA)组、巨大儿(LGA)组。胎儿娩出后即抽脐静脉血5ml,标本收集后用高效液相色谱法测定脐血中胰岛素、IGF-Ⅰ及IGFBP-2的水平。结果 SGA组脐带血清胰岛素、IGF-Ⅰ水平明显低于AGA、LGA组,AGA组脐血胰岛素、IGF-Ⅰ水平低于LGA组,差异均有统计学意义(P<0.01);SGA组脐血IGFBP-2水平明显高于AGA、LGA组,AGA组脐血IGFBP-2水平高于LGA组,差异均有统计学意义(P<0.01);脐血中IGF-Ⅰ与胰岛素水平呈正相关(r=0.462,P<0.05),而与IGFBP-2呈负相关(r=-0.451,P<0.05);脐血胰岛素、IGD-Ⅰ水平与新生儿出生体重呈正相关(r=0.511,0.562,P<0.05),而IGFBP-2与之呈负相关(r=-0.432,P<0.05)。结论脐血胰岛素、IGF-Ⅰ、IGFBP-2参与胎儿生长发育的病理、生理过程。

转化生长因子β1对乳鼠心肌细胞转化生长因子结合蛋白2表达的影响

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)在诱导心肌细胞表达转化生长因子结合蛋白2(LTBP2)中的作用及信号传导通路。方法培养乳鼠心肌细胞;实时定量聚合酶链式反应、蛋白质印迹和免疫细胞化学方法检测不同时间和不同浓度的TGF-β1对大鼠乳鼠心肌细胞LTBP2基因及蛋白表达的影响;用TGF-β1相关信号通路阻断剂探讨TGF-β1调节LTBP2表达改变的信号传导机制。结果 LTBP2基因表达随着TGF-β1浓度增加(0、2、5及10μg/L)而明显升高,在5μg/L时刺激最强(P<0.05);5μg/L的TGF-β1刺激下心肌细胞内LTBP2基因和蛋白表达的升高呈时间依赖性,均在12 h最高,24 h开始呈下降趋势(P<0.05或P<0.01);免疫细胞化学结果显示TGF-β1明显升高LTBP2的表达。信号传导通路研究显示TGF-β1在心肌细胞内主要通过ERK信号通路和PI3K信号通路诱导LTBP2的表达。结论 TGF-β1在乳鼠心肌细胞内通过ERK信号通路和PI3K信号通路上调LTBP2的表达。

胰岛素样生长因子结合蛋白2在新生鼠肺发育中的作用

目的探索胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP)2在新生鼠肺发育中的作用。方法SD孕鼠80只分为4组,即A:对照组;B:地塞米松(Dex)1组;C:Dex2组;D:维A酸(RA)组。A、B、D组分别于孕18～20d皮下注射生理盐水、Dex,腹腔注射RA;C组于生后1～3d皮下注射Dex。各组分别于孕18、20、21d(C组孕期不取)、生后1、3、5、7、10、14、21d取肺标本作形态学检查、免疫组织化学、Westernblot及RT PCR检测。结果1.肺组织形态学:B、C组早期肺泡发育提前,数目多,壁薄,晚期则明显落后于A、D组。2.IGFBP2肺表达:A组中IGFBP2主要在胎肺组织中表达,孕18d左右表达最强,随后表达渐减弱。B、C组表达趋势同A组,但生后各时间点均较A组增强;D组生后各时间点均较A组减弱。3.Westernblot:IGFBP2多肽表达强度各组孕18d表达最强,随后渐降低;B、C组生后各时间点表达强度明显高于A组(P均<0.01);D组各时间点浓度均明显低于A组(P均<0.01)。4.RT PCR:IGFBP2mRNA表达的强度变化规律与其肽浓度变化相似。结论IGFBP2在肺发育过程起重要作用,其浓度过高则影响肺发育。