林下山参外形性状和生长年限的相关性研究

目的 研究1~21年逐年生林下山参的生长趋势特点,探讨自然生长环境下多年生林下山参的“芦”“艼”“体”“纹”“须”的外形性状特征和生长年限的相关性。方法 参考传统的“五形”定义特点,观察、测量、分析1~21年参龄的林下山参外形和质量数据,确认各参数和年限的相关性关系;采用主成分分析法降维筛选与年限相关的变量。结果 在林下山参的芦长、芦径、主根长、主根径、总长和质量变量中,芦长有逐年增长的趋势,特别是第1~6年,和年限有较好的线性关系。分析结果显示变量和年限相关性关系为芦长>总长>芦径。通过降维分析发现芦长、总长在第1个主成分因子上分数较高,质量和芦径在第2、3个主成分因子上分数较高。结论 传统“辨状论质”评估人参质量的方法具有一定的科学依据,除“数芦碗判定年限”外,林下山参年限及等级评估还可以综合参考芦长、总长和芦径等量化参数进行辅助判断。

不同生长年限及生长环境下黄芪种子品质评价研究

为探究不同生长年限(三年生、四年生、五年生)及生长环境(野生阳坡、野生阴坡、人工阳坡、人工阴坡)对黄芪种子抗氧化酶活性及内源性营养物质含量的影响,本研究以不同生长年限及生长环境下蒙古黄芪种子为试验材料,测定其抗氧化酶(SOD、POD、CAT)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、丙二醛(MDA)含量以及可溶性糖、粗脂肪、蛋白质含量等指标,对黄芪种子品质进行评价分析。结果表明,蒙古黄芪种子随着生长年限的增加,其抗氧化酶(SOD、POD、CAT)活性呈增长趋势,MDA含量呈下降趋势,内源性营养物质呈上升趋势;野生黄芪种子的抗逆性要优于仿野生黄芪;阳坡种植的黄芪种子品质优于阴坡;蒙古黄芪种植留种宜选择四年生、五年生阳坡植株,其中野生黄芪最佳。

不同生长年限子洲黄芪休眠期的质量差异

目的:比较不同生长年限子洲黄芪休眠前期和休眠后期的有效成分含量,揭示子洲黄芪在休眠期各有效成分的变化规律,确定子洲黄芪的最适采收期。方法:采用随机取样法收集8批不同生长年限休眠前期及休眠后期的子洲黄芪,以黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷和水溶性浸出物质量分数为指标,结合聚类分析法分析其质量差异。结果:各指标含量测定结果显示,随生长年限的增加,各成分含量呈规律性动态变化。黄芪甲苷与毛蕊异黄酮葡萄糖苷质量分数均在生长5年时达到最高值,分别为0.166%、0.079%;水溶性浸出物质量分数在生长7年时达到最高值,为21.290%。对不同生长年限休眠前期和休眠后期的各成分含量进行对比发现,休眠后期黄芪甲苷质量分数显著下降,且下降幅度逐年增大,生长7年时下降幅度最大,为54.09%;毛蕊异黄酮葡萄糖苷质量分数增加,生长5年时增幅最大,为145.83%;水溶性浸出物质量分数生长7年时增幅最大,为18.40%。结论:子洲黄芪有效成分积累受生长年限及采收时间的影响,且变化趋势不一致,如以毛蕊异黄酮葡萄糖苷为指标,宜在生长5年休眠后期采收;如以黄芪甲苷为指标,宜在生长5年休眠前期采收;若综合考虑黄芪甲苷及毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量,宜在生长6年休眠前期采收。

不同生长年限与采收期对怀牛膝化学成分与质量的影响

目的研究不同生长年限与采收期对怀牛膝化学成分与质量的影响,明确怀牛膝适宜的生长年限及采收期。方法采用高效液相色谱法对2015年4月至2021年12月不同生长年限(2~6年)与采收期(9~12月)怀牛膝中的有机化学成分(β-蜕皮甾酮、25R-牛膝甾酮、25S-牛膝甾酮、齐墩果酸)进行含量测定。对结果进行含量分析及主成分分析。结果同一生长年限中,4种化学成分含量在不同月份采收存在差异,10、11月含量相对较高,9、12月含量相对偏低。同一采收月份中,齐墩果酸、β-蜕皮甾酮生长4年含量最高,其次为5年、3年;25S-牛膝甾酮生长3年含量最高,而25R-牛膝甾酮生长5年含量最高。4年生11月中旬的牛膝样品综合得分最高,其次为4年生10月份采收,3年、5年生的10、11月份采收的质量接近。结论以β-蜕皮甾酮、25R-牛膝甾酮、25S-牛膝甾酮、齐墩果酸为怀牛膝药材质量的考核指标,建议4年生11月中旬为牛膝的最佳采收期。

杉木林下不同生长年限灵芝栽培土壤微生物群落变化特征

为研究不同生长年限灵芝对杉木林下土壤微生物群落结构及其多样性的变化,并初步探索土壤因子与真菌、细菌群落的相关性,通过Illumina MiSeq高通量测序技术对杉木林下栽培1年(S1)、2年(S2)、3年(S3)、4年(S4)的灵芝栽培土壤进行了扩增子测序,分析了杉木林下不同生长年限灵芝栽培土壤中微生物群落的变化特征。结果表明,在门水平上,细菌主要优势菌群为变形菌门、酸杆菌门、放线菌门、绿弯菌门,其中变形菌门和酸杆菌门的优势表现较为显著;真菌优势菌群主要为子囊菌门、担子菌门、被孢霉门、罗兹菌门和一些未定种类,其中4组样品中子囊菌门占主导地位,相对丰度占比最高。在属水平上,细菌黄色杆菌属、norank_f__norank_o__Elsterales属相对丰度在4组样品中占比均较高,且4年相对丰度占比无显著差异;在真菌属水平上发现,每个年份的主要优势菌群均不同,S1组的主要优势菌群为木霉属,S2组的主要优势菌群为纹枯状革菌属,S3组的主要优势菌群为unclassified_k__Fungi属,S4组的主要优势菌群为unclassified_p_Basidiomycota属。土壤全碳、全磷、漆酶是影响杉木林下不同生长年限灵芝栽培土壤微生物群落结构和土壤微生物多样性的关键因子。

不同生长年限九节茶不同部位中八种成分含量比较

目的建立高效液相色谱法同时测定不同生长年限九节茶不同部位中的8种成分含量变化。方法色谱柱为Phenomenex Luna(C18)(250 mm×4.6 mm,5μm),以0.2%磷酸(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱(0~12 min,2%~11%B;12~25 min,11%~18%B;25~40 min,18%~40%B),流速1.0 ml/min,检测波长为210 nm和325 nm,柱温30℃,进样量10μl。结果富马酸、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、异嗪皮啶、落新妇苷、迷迭香酸8种成分分别在7.61~304.40μg/ml(R^(2)=0.9997)、3.52~140.60μg/ml(R^(2)=1.0000)、4.99~199.60μg/ml(R^(2)=1.0000)、3.89~155.40μg/ml(R^(2)=1.0000)、0.56~22.06μg/ml(R^(2)=0.9999)、0.57~22.62μg/ml(R^(2)=1.0000)、26.75~1070.00μg/ml(R^(2)=1.0000)、12.49~499.40μg/ml(R^(2)=0.9999)范围内线性关系良好。不同添加水平加标回收率为95.05%~99.26%,其相对标准偏差在1.15%~1.93%之间。结论九节茶在茎中富马酸、绿原酸、咖啡酸、落新妇苷、迷迭香酸的含量1年生>2年生>3年生;新绿原酸、隐绿原酸的含量1年生<2年生<3年生;异嗪皮啶的含量1年生>3年生>2年生。在叶中富马酸、新绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、异嗪皮啶、落新妇苷、迷迭香酸的含量1年生>2年生>3年生;绿原酸的含量1年生>3年生>2年生。

基于生长年限对白及类药材militarine成分的积累影响研究

目的探讨不同生长年限的白及、小白及和黄花白及药材中1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯(militarine,化学式为C_(34)H_(46)O_(17))成分的积累规律,为白及质量控制和近缘种资源的开发提供依据。方法采用HPLC法,以XTerra Waters柱(5μm,4.6 mm×250 mm)为色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液(22∶78)进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长270 nm,测定各样品militarine的含量。结果经过对HPLC图谱分析比较,不同生长年限的白及与其2种近缘种的militaeine成分含量差别较大,以4年生最高,3年生的次之,2年生则最低,相同生长年限的种间含量稍有差异,白及稍高,小白及与黄花白及稍低。结论以3年及以上生长年限的白及作为药材原料具有一定的科学性。小白及、黄花白及与生长年限相同的白及的militarine含量相当,二者作为习用品具有一定的合理性,可为开展深入的资源评价提供参考依据。

UPLC-MS/MS法测定不同生长年限钩吻茎中6种生物碱的含量

目的建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时测定不同生长年限钩吻茎中6种生物碱(钩吻碱甲、胡蔓藤碱丙、钩吻素子、钩吻素己、钩吻绿碱、胡蔓藤碱乙)的含量。方法采用UPLC-MS/MS法,通过正离子多反应监测(MRM)模式进行含量测定。色谱条件:ACQUITY UPLC BEHC18色谱柱,乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速0.25 mL/min,柱温45℃,进样量2μL。结果在上述的色谱条件下,6种生物碱在各自的线性范围内呈现良好的线性关系(r≥0.9990),精密度、稳定性、重复性考察的RSD均<5%,符合分析要求;平均回收率98.66%~104.69%,RSD<6%。1~4年生钩吻茎中除胡蔓藤碱丙外,钩吻碱甲、钩吻素子、钩吻素己、钩吻绿碱、胡蔓藤碱乙等含量均随着生长年限的增长而增加,6种生物碱总量也呈现上升趋势。结论本研究建立了UPLC-MS/MS法同时测定钩吻茎中6种生物碱含量,方法简易、准确、高效,为钩吻综合质量评价提供了数据参考。

三七生长年限对5个皂苷及其抗血栓作用的影响

目的:通过比较分析不同生长年限对三七质量、皂苷含量及抗血栓作用的影响,为确定三七药材适宜的采收年限提供数据支持。方法:建立高效液相色谱法(HPLC)同时测定三七中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd、人参皂苷Re、三七皂苷R15个主要皂苷,比较1—6年不同生长年限的三七有效成分的积累情况。同时,利用斑马鱼血栓模型比较1、2、3年生三七的抗血栓作用。结果:1—3年生三七质量、5个皂苷含量均随生长年限的增加逐渐累积,其中人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的含量均较高,随年限变化最显著;而4—6年生三七中质量、皂苷含量受批次个体等影响较大,皂苷含量波动较大,与3年生三七相比差异无统计学意义。1—3年生三七抗血栓作用比较中发现,在相同剂量下,生长年限越长,疗效越好;在相同生长年限下,剂量越大,疗效越好。结论:综合品质、产量、种植成本及活性等因素,结合目前产地种植三七的实际情况,3年生三七整体品质较高且趋于稳定,可为三七标准化采收提供依据。

不同部位与不同生长年限的千斤拔化学成分GC-MS分析

目的:对比研究不同部位及生长年限的千斤拔挥发油化学成分的差异。方法:采用水蒸气蒸馏法提取一至四年生千斤拔叶、茎、根挥发油,结合GC-MS分析其化学成分组成和相对百分含量。结果:总共鉴定出61个化合物。一年生的千斤拔叶、茎、根分别鉴定出37、26、7个化合物,分别占各自挥发油总量的88.97%、76.55%、79.52%;二年生的千斤拔叶、茎、根分别鉴定出31、35、15个化合物,分别占各自挥发油总量的93.39%、79.93%、85.90%;三年生千斤拔叶、茎、根分别鉴定出34、48、47个化合物,分别占各自挥发油总量的93.83%、93.46%、81.85%;四年生千斤拔叶、茎、根分别鉴定出46、34、25个化合物,分别占各自挥发油总量的86.40%、84.87%、86.35%。4种不同年份的样品中挥发油的提取率最高的为千斤拔叶,且化学成分种类较多。结论:千斤拔挥发油成分种类主要为烃类、醇类及酸类,一至四年生千斤拔不同部位挥发油成分及相对含量具有一定的差异性。

不同生长年限与采收季节对何首乌中14个成分含量的影响

目的:探究何首乌中成分含量随生长年限和采收季节的变化规律。方法:建立超高效液相色谱-三重四极杆质谱法(UPLC-QQQ-MS/MS),测定德庆地区何首乌药材中14个成分反式-2,3,5,4ʹ-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(trans-THSG)、顺式-THSG(cis-THSG)、2,3,5,4ʹ-四羟基二苯乙烯-2-O-(2ʺ-O-阿魏酰)-β-D-吡喃葡萄糖苷、虎杖苷、白藜芦醇、儿茶素、表儿茶素、金丝桃苷、芦丁、没食子酸、对羟基苯甲酸、对羟基苯甲醛、对香豆酸和决明酮-8-O-β-D-葡萄糖苷含量。结果:建立了准确可靠的UPLC-QQQ-MS/MS测定何首乌中14个成分含量的方法;随生长年限的增加,何首乌中二苯乙烯苷类、黄酮类、酚类化合物含量多降低;随采收季节的变化,二苯乙烯苷类、黄酮类、决明酮-8-O-β-D-葡萄糖苷成分多春季含量最高、秋季含量最低,酚类化合物多夏季含量最高、春秋含量低。结论:成分的含量与何首乌药材生长年限及采收季节密切相关,其中采收季节变化较为明显;以trans-THSG、决明酮-8-O-β-D-葡萄糖苷作为潜在肝毒性物质,cis-THSG作为有效成分,秋季为何首乌的适宜采收期,与《中华人民共和国药典》2020年版规定相符。

一测多评法测定不同产地和生长年限三七中5个成分的含量

目的:建立一测多评法测定不同产地(云南、广西、贵州)和生长年限(二至四年生)三七中5个皂苷类成分的含量。方法:以人参皂苷Rg1为内参物,分别建立其与三七皂苷R_(1)及人参皂苷Re、Rb_(1)、Rd的相对校正因子和相对保留时间值,考察不同色谱仪、色谱柱和柱温的影响,并比较不同产地和生长年限三七中5个皂苷的含量。结果:三七皂苷R_(1)及人参皂苷Re、Rb_(1)、Rd的相对校正因子和相对保留时间值的RSD均<1.00%,并且不同色谱仪、色谱柱和柱温对其影响较小。外标法和一测多评法测定结果无显著性差异,云南产三七质量优于广西、贵州,三年生及以上样品质量较佳。结论:该研究建立的一测多评同时测定三七中5个成分含量的方法可行,可为其质量控制提供参考。

不同生长年限虎杖高效液相色谱指纹图谱研究

目的建立不同生长年限虎杖的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,比较其化学成分的差异。方法色谱柱为Diamonsil C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5µm),流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为286 nm,柱温为25℃,进样量为20µL。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012A版软件建立25批(采收时间分别为移植后第1,2,3,4,5年,各5批)虎杖的HPLC指纹图谱,计算相似度;采用SIMCA-P 14.1软件建立偏最小二乘判别分析(PLS-DA)模型,分析其中化学成分的差异。结果共标定19个共有峰,相似度为0.906~0.993。不同生长年限虎杖明显聚为5类,共筛选出6个差异标记物,按影响大小依次为峰15>峰6(虎杖苷)>峰8(白藜芦醇)>峰17(大黄素)>峰5>峰1。结论HPLC指纹图谱结合PLS-DA法能反映不同生长年限虎杖化学成分的差异,可为其采收和质量评价提供参考。

不同生长年限滇黄精的挥发性成分及香气特征分析

为比较分析不同生长年限滇黄精挥发性成分及香气特征,采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术对滇黄精样品挥发性成分进行定性和定量分析,结合相对气味活性值(Relative Odor Activity Value,ROAV)构建香气雷达图,比较其挥发性香气物质差异,并用正交偏最小二乘判别法(Orthogonal Partial Least Squares Discrimination Analysis,OPLS-DA)和随机森林(Random Forest,RF)筛选出标志差异性香气物质。结果表明,从不同生长年限滇黄精样品中共鉴定挥发性成分67种,主要包括酯类(18.39%~63.98%)16种、烷烃类(2.22%~20.85%)15种、醛类(18.31%~35.45%)9种、烯烃类(0.46%~2.33%)8种、醇类(2.50%~6.21%)5种和酮类(0.39%~1.31%)4种。ROAV和香气雷达图表明(E,E)-2,4-壬二烯醛、庚酸乙酯、正己醛对滇黄精香气贡献较大,2年生青草香较突出,3、4、5年生脂肪味较突出,而6年生果香和花香更强烈。OPLS-DA和RF结果表明2-丁基-2-辛烯醛、己酸乙酯、辛酸乙酯、庚酸乙酯、正己醛和(E,E)-2,4-壬二烯醛为标志性风味物质。该研究结果揭示了不同生长年限滇黄精的挥发性成分及香气特征差异,为其综合开发利用提供数据支撑。

不同生长年限北苍术次生代谢物累积对土壤矿质元素的响应

本试验以一年生、三年生和七年生北苍术为研究对象,从种植基地采集不同生长年限植株样品及种植区土样,测定不同生长年限北苍术土壤中矿质元素含量和理化性状及其根茎中苍术素、β-桉叶醇和白术内酯Ⅰ含量,分析影响北苍术药用成分的主要土壤因子。结果表明,七年生北苍术土壤pH值和有机碳含量较一年生均显著下降,且土壤中锌、铜和铬元素含量均最高;而三年生北苍术中的苍术素、白术内酯Ⅰ和β-桉叶醇含量最高。土壤全钾含量对北苍术根茎次生代谢产物含量正向影响最大,重金属元素铬则与北苍术次生代谢产物含量呈显著负相关。综上表明,影响北苍术有效药用成分的主要土壤养分因子为钾,且三年生北苍术质量最好。本研究结果可为优化北苍术人工栽培技术提供理论依据。

不同土质和生长年限甘草HPLC指纹图谱及3种成分含量测定研究

目的:探究不同土质和生长年限甘草中甘草酸、甘草苷和甘草总黄酮的含量差异,并结合化学计量学分析方法为甘草质评质控体系的构建及其种植土质和适宜采收时间提供实验依据和参考。方法:采用HPLC法测定甘草苷和甘草酸含量,色谱条件:色谱柱为Symmetry C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流速1.0 mL/min,检测波长237 nm,柱温26℃,流动相为乙腈-0.05%磷酸水梯度洗脱系统;采用紫外分光光度法测定甘草总黄酮含量,运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012.1版)对HPLC指纹图谱进行共有峰确定和相似度评价;运用OriginPro软件(2021版)对含量测定结果进行3D绘图分析;运用SPSS Statistics 25统计学分析软件对样品进行聚类分析。结果:不同土质和生长年限栽培甘草HPLC指纹图谱共匹配24个共有峰成分,样品间相似度为0.917~0.991;3D绘图分析结果表明,不同土质和生长年限栽培甘草质量排序为3年沙地>5年沙地>3年土地>4年沙地>5年土地>4年土地,沙地种植的甘草质量明显高于土地;聚类分析结果可将不同土质和生长年限栽培甘草样品完全区分。结论:本研究所建立的甘草HPLC指纹图谱并结合化学计量学分析方法稳定可靠,可用于甘草质量评价研究与开发潜在标志物的探索。

不同生长年限党参氨基酸组分分析及营养价值评价

为了比较九寨沟县所产不同生长年限党参氨基酸组分及含量,探讨其营养价值,文中采用盐酸水解法,使用日立L-8800全自动氨基酸分析仪测定。结果显示:九寨沟县所产党参所含氨基酸种类有15～16种,其中7种为人体必需氨基酸。总氨基酸含量较高,并随生长年限的增加而增加。多数必需氨基酸的含量低于FAO/WHO氨基酸模式谱中的必需氨基酸含量,且随生长年限的增加,符合FAO/WHO氨基酸模式谱中要求的氨基酸种类不断减少;1～3年生党参样品的蛋白质较接近理想蛋白质的要求。通过分析得出,以FAO/WHO氨基酸模式谱为标准以3年生党参较好;以FAO/WHO提出的理想蛋白质为标准,则以2年生党参为好;而以特殊功效及味觉氨基酸为开发目标,则以4年生党参较好。

生长年限对黄芪药材中黄酮及皂苷类成分含量积累的影响

目的:探究不同生长年限对黄芪药材中黄酮及皂苷类成分含量积累的影响,为确立药材的最佳采收年限奠定理论基础。方法:采用高效液相色谱法测定采集的不同生长年限黄芪药材中黄酮及皂苷类成分的含量。结果:不同生长年限黄芪药材中黄酮及皂苷类成分含量存在明显差异,同一地区生长年限越长其含量相对较高。结论:随着生长年限的增加,黄芪药材中黄酮及皂苷类成分含量大致呈逐年升高趋势,生长年限对这两类成分的积累影响较大。

不同生长季节及生长年限银杏叶总萜内酯含量的相关性研究

采用 HPLC法测定银杏叶中白果内酯、银杏内酯 A、B、C的含量 ,并测出不同生长季节及生长年限的含量变化。结果表明 :总萜内酯含量在 8月份最高 ;幼树叶的含量明显高于老树 ,并伴随树龄的增长 。

不同生长年限野生与栽培黄芩的药材鉴定研究

目的:寻找鉴别黄芩的生长年限、区别野生及栽培黄芩的依据,为黄芩质量控制提供参考依据。方法:以性状组织学研究方法,对5个省(区)12个产地45个编号共87份不同生长年限的栽培和野生黄芩标本和7个省(区)共22份黄芩商品药材进行研究。结果:发现野生黄芩与一、二年生栽培品(商品多见)横切面观的导管排列方式不同。野生黄芩导管为切向排列;栽培一年生品为径向排列,二年生为团状排列。首次发现黄芩根中存在年轮结构。根据主根形状、色泽、栓皮、残留茎基和枯心等性状特征,以及导管的排列方式、木质部木栓细胞环、年轮等组织学特征可区别野生和栽培黄芩并判断其生长年限。结论:建立了不同生长年限的野生和栽培黄芩的性状组织学鉴别方法,并首次发现黄芩组织中可观察到年轮结构。