生长抑制蛋白4核定位信号和PHD指状结构域共同调控丝裂原活化蛋白激酶通路中ERK1的激活

目的探索生长抑制蛋白4(inhibitor of growth 4,ING4)的核定位信号(nuclear localization sig-nal,NLS)和PHD指状结构域(plant homeodomain)在刺激丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)细胞信号通路成员ERK1磷酸化中的作用。方法通过构建ING4的NLS和PHD结构域突变或缺失重组质粒,将上述质粒分别与ERK1表达载体共转染HEK-293细胞,Western印迹检测ERK1总蛋白和磷酸化ERK1蛋白水平。结果在HEK-293细胞中,ING4蛋白分别缺失NLS和PHD结构域后,其对MAPK细胞信号通路成员ERK1磷酸化的促进作用均降低,突变ING4的NLS结构域中两个重要位点Lys-Lys(KK)和Arg-Ala-Arg-Ser-Lys(RARSK)并不改变对ERK1激活的能力,但突变ING4 PHD结构域中RKKK位点则改变了调控ERK1磷酸化的能力。结论ING4的NLS和PHD指状结构域同时参与了刺激MAPK细胞信号通路成员ERK1的激活。