生长抑素Ⅱ型受体SSTR2蛋白的理化性质及生物信息学分析

利用生物信息学方法在线分析生长抑素Ⅱ型受体SSTR2的理化性质、信号肽、跨膜结构、分泌蛋白类型、亚细胞定位、磷酸化位点修饰、空间结构及蛋白互作网络等,并通过MEGA5.0软件建立SSTR2蛋白的系统进化树。结果显示,该基因编码369个氨基酸,分子式为C_(1898)H_(2984)N_(470)O_(513)S_(23),相对分子质量为41332.79,等电点理论值为9.15,不稳定系数为37.16。SSTR2是一种碱性稳定亲水蛋白,无信号肽,存在7个跨膜区,作用于质膜结构;二级结构主要为α-螺旋,属7tmGPCRs超家族,且含有1个7tmA_SSTR2结构域;与SSTR2相互作用的蛋白质包括CORT、SST、NPY、GHRL、GNAI1、GNAI2、GNAI3、SHANK1、HIVEP2。SSTR2基因及其编码蛋白在进化上高度保守,可能参与G蛋白偶联受体信号通路,进而发挥其作用。本研究通过对SSTR2蛋白的理化性质及生物学功能进行分析,为深入研究该蛋白在疾病发生中的机制以及为靶向治疗神经内分泌肿瘤等肿瘤药物研发提供理论依据。

生长抑素受体亚型SSTR-2和SSTR-3mRNA在原发性肝癌中的表达

目的:了解原发性肝癌组织中生长抑素受体somatostatinreceptor,SSTR亚型SSTR2和SSTR3基因的表达情况。方法:采用逆转录-PCR法检测27例原发性肝癌患者癌组织和癌旁组织中生长抑素受体亚型SSTR2和SSTR3mRNA的表达。结果:27例原发性肝癌患者的癌组织和癌旁组织SSTR2mRNA的表达阳性率分别为81.5%(22/27)和96.3%(26/27)SSTR3mRNA在肝癌组织中表达的阳性率为66.7%(18/27),在癌旁组织中的阳性率为51.9%(14/27)。结论:大多数原发性肝癌肿瘤组织中有一种以上生长抑素受体亚型基因的表达。

靶向生长抑素受体SSTR2的新型白蛋白亲和放射性碘标记分子探针的制备与评价

生长抑素受体亚型2(SSTR2)在神经内分泌肿瘤和多种心血管疾病中高表达,是一个非常有吸引力的靶点.基于铜介导下放射性碘离子与苯硼酸底物发生氧化偶联反应的方法,构建了靶向SSTR2的新型放射性碘标记分子探针[^(131)I]IPBA-TATE和[^(131)I]IBA-TATE(对照),并在体外评价了其理化性质及白蛋白结合特性.在BALB/c小鼠中测定其血液末端清除半衰期,并在正常小鼠和AR42J肿瘤模型小鼠中研究其生物分布特性(以每克组织中摄取注射剂量的百分率(%ID/g)为单位).结果表明:[^(131)I]IPBA-TATE的放射性化学产率为(64.0±4.2)%(n=3),在体外具有良好的稳定性和蛋白亲和性;相比于[^(131)I]IBA-TATE,[^(131)I]IPBA-TATE的血液末端清除半衰期延长了60%,为(25.50±3.35)h.在给药后4 h,[^(131)I]IPBA-TATE在AR42J肿瘤中的摄取为(1.21±0.67)%ID/g,具有较高的瘤/肉比(5.30±2.07).可见[^(131)I]IPBA-TATE是一种基于奥曲肽的新型碘标记白蛋白亲和探针,有望用于SSTR2阳性肿瘤的单光子发射计算机断层显像及放射性核素靶向治疗.

生长抑素受体-2和金属蛋白酶-2在大肠癌中的表达及意义

目的:检测生长抑素受体(SSTR)-2、金属蛋白酶(MMP)-2在大肠癌组织中的表达,分析其表达与病理类型及转移的关系。方法:采用免疫组化法检测SSTR-2,MMP-2在对照组、结肠腺瘤型息肉以及结肠癌组织中的表达。结果:SSTR-2在结肠癌中的阳性率及表达强度最低(31.5%),显著低于腺瘤型息肉(P<0.01),在高、中分化的腺癌中阳性表达高于低分化腺癌(P<0.05),SSTR-2在结肠腺瘤型息肉和正常结肠黏膜组织的表达差异无统计学意义(P>0.05),在结肠腺瘤型息肉中重度不典型增生明显低于轻-中度不典型增生(P<0.05),SSTR-2表达与结肠癌浸润深度及远处转移无关(P>0.05);MMP-2在结肠癌组织中阳性表达明显高于腺瘤型息肉(P<0.01),MMP-2在结肠腺瘤型息肉和正常结肠黏膜组织的表达差异无统计学意义(P>0.05),在结肠腺瘤型息肉中,重度不典型增生明显高于轻-中度不典型增生(P<0.05),MMP-2表达与结肠癌临床分期和淋巴结转移相关。结论:SSTR-2表达下降对诊断结肠癌有一定价值,MMP-2在结肠癌中高表达,在结肠癌的发生、发展和浸润转移中起重要作用,可作为反映结肠癌进展的生物学指标。

生长抑素受体2在结直肠癌中的表达

目的:检测生长抑素Ⅱ型受体(SSR2)mRNA在结直肠癌组织中的表达并研究其在结直肠癌发生、发展中的作用。方法:采用逆转录聚合酶链反应(Reverse transcription-PCR,RT-PCR)方法检测37例结直肠癌患者癌远旁黏膜、癌近旁黏膜、肿瘤组织中SSR2mRNA的表达情况,分析不同组织表达阳性率及表达强度的差别。结果:SSR2mRNA在癌远旁黏膜、癌近旁黏膜、癌组织表达阳性率分别为100%、91.9%、83.8%,表达阳性率差异有统计学意义(P=0.038),结直肠癌组织中SSR2mRNA表达强度明显低于正常黏膜(P=0.021)。在结直肠癌组织中SSR2mRNA的表达阳性率与肿瘤的分化程度、Dukes分期相关(P=0.021,P=0.005),其表达强度也与肿瘤的分化程度、Dukes分期相关(P=0.013,P=0.019),而其表达率及表达强度与病人年龄、性别、肿瘤大小、部位及血清CEA的水平无显著相关性。结论:SSR2mRNA在结直肠癌中表达明显降低,其表达率及表达强度与肿瘤的分化程度、Dukes分期相关,可能与肿瘤的发生、发展有一定的关联。

扩张性心肌病患者生长抑素受体2表达变化及诊断意义

目的探讨扩张性心肌病(DCM)患者血清生长抑素受体2(SSTR2)水平及其临床意义。方法采用酶联免疫双抗夹心法对2010年6月至2013年6月就诊的52例DCM患者和同期60例对照者外周血中SSTR2水平进行检测,同时检测两组血清中脑钠肽(BNP)水平,并结合研究对象一般临床资料、超声心动图、其他血清学指标进行综合分析。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,评价SSTR2对DCM的诊断价值。结果心功能分级为Ⅲ-Ⅳ级的DCM患者,血清SSTR2与BNP水平均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),但是对于心功能Ⅱ级的患者,仅SSTR2水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。相关分析结果表明,Ⅲ-Ⅳ级患者SSTR2、BNP水平与左心室射血分数(LVEF)均呈负相关关系(r=-0.53、-0.43,P<0.05),但是Ⅱ级患者仅SSTR2与LVEF呈负相关(r=-0.45,P<0.05)。ROC曲线显示,对于Ⅱ级患者,SSTR2的诊断曲线下面积为0.702,明显优于BNP的诊断曲线下面积(0.573)。结论 DCM患者血清SSTR2水平增高,与患者心肌纤维化、心肌细胞肥大和心力衰竭有密切关系。尤其是心功能Ⅱ级的DCM患者,SSTR2相对于BNP,灵敏度更高,能及时反映DCM患者早期心功能不全,是一项具有潜力的生物学指标。

生长抑素受体2在结直肠神经内分泌肿瘤中的表达及意义

目的:研究生长抑素受体(somatostafin receptor,SSTR)亚型SSTR2在结直肠神经内分泌肿瘤组织中的表达情况,以及与临床病理特征的关系.方法:收集结直肠神经内分泌瘤患者组织标本及相关临床病理资料,应用免疫组织化学En Vision二步法检测肿瘤组织中SSTR2表达情况.结果:56例患者纳入研究,其中SSTR2阳性表达率为76.8%.SSTR2的阳性表达与淋巴结转移、肿瘤浸润肌层、出现远处转移关系密切(P<0.05),但是与性别和年龄无关(P>0.05).此外,肿瘤的最大径及组织学分级也与SSTR2阳性表达有关(P<0.05).结论:SSTR2异常表达与重要的临床病理学特征相关,SSTR2可能成为一个新的结直肠神经内分泌瘤诊断和预后的分子指标.

射血分数正常的心功能不全患者血清生长抑素受体2的检测

目的：评估射血分数正常的心功能不全（HFNEF）患者血清生长抑素受体2（SSTR2）和血中N-末端脑钠肽前体（NT-pro BNP）表达的变化。方法：选取自2010年4月至2013年4月住院的97例HFNEF患者和76名健康人进入研究。用免疫荧光加微激光技术和ELISA法分别检测所有研究对象血清SSTR2和气血NT-pro BNP的水平,并与研究对象的临床资料和超声心动图进行比较。绘制ROC曲线,选定SSTR2诊断HFNEF的最佳阈值。结果：HFNEF组患者SSTR2、NT-pro BNP水平均明显高于健康人组（P〈0.001）。HFNEF患者SSTR2水平与心功能分级、LAD、IVST、LVPWT、E/Ea、NT-pro BNP水平呈正相关（r=0.511、0.378、0.334、0.420、0.403和0.446,P〈0.05）;与LVEF呈负相关（r=-0.613,P〈0.001）。SSTR2的诊断曲线下面积为0.873（95%CI：0.812-0.899,P〈0.001）,优于NT-pro BNP的诊断曲线下面积0.664（95%CI：0.622-0.689,P=0.042）,两者联合诊断的ROC曲线下面积为0.899（95%CI：0.875-0.921,P=0.033）。根据ROC曲线结果,当SSTR2的诊断阈值为10.9μg/L时,其诊断的灵敏度为73%,特异度为82%。结论：血清SSTR2对HFNEF患者心室重塑的早期诊断具有重要意义,与NT-pro BNP联合诊断HFNEF的效果更佳。

生长抑素2型受体在上皮性卵巢肿瘤中的表达及其与凋亡的相关性

目的检测卵巢癌组织中的细胞凋亡情况,探讨细胞凋亡与生长抑素2型受体(SSTR2)表达的相关性。方法采用链霉素亲生物素-过氧化物酶法(S-P法)进行免疫组织化学染色,SSTR2阳性染色为棕黄色颗粒,定位于细胞膜及细胞浆;采用TUNEL试剂盒检测凋亡细胞,胞核中有棕黄色颗粒散在分布者为阳性细胞。均根据阳性细胞的比例判定结果。结果经统计学处理表明,SSTR2的表达与卵巢肿瘤的病理类型、组织学分级、有无腹水等有显著相关性(P<0.05),上皮性卵巢癌组织中细胞凋亡和SSTR2表达呈正相关(r=0.895,P<0.05)。结论卵巢癌组织细胞中SSTR2的表达可能参与细胞凋亡的调节机制,在卵巢上皮性肿瘤恶变的过程中发挥作用,并与恶性程度关系密切,有可能成为卵巢癌预后评估的参考指标。

生长抑素2型受体在12株肿瘤细胞中的表达

目的研究多种肿瘤细胞是否广泛表达生长抑素2型受体(SSTR2),以期探讨生长抑素类似物应用于各种肿瘤治疗的可能性。方法分别提取肺癌、鼻咽癌、宫颈癌、肝癌、乳腺癌及胰腺癌6种肿瘤,共12株细胞的总RNA,用反转录PCR检测SSTR2 mRNA的表达,同时制备12株细胞的总蛋白样品,经免疫印迹检测SSTR2蛋白的表达。结果除1株肺癌细胞外,其余11株细胞都表达SSTR2 mRNA;有1株肺癌细胞,2株胰腺癌细胞不表达SSTR2蛋白。结论除胰腺癌外,生长抑素2型受体在多种肿瘤细胞中的表达有较大的普遍性。

一种靶向于生长抑素受体2的药物筛选模型的建立与应用

目的 以生长抑素受体2(SSTR2)为靶点,建立生长抑素类似物(SSTA)活性检测的细胞模型,为SSTR2激动剂以及SSTA的药物筛选提供一种简单稳定的评价方法。方法 将SSTR2目的基因整合入pEGFP-N3载体中,构建重组质粒SSTR2-pEGFP-N3,并转染进HEK293细胞,使用G418筛选后挑取阳性克隆,扩大培养获得稳转细胞株。通过荧光细胞成像、免疫蛋白印迹、qPCR等方法对获得的稳转细胞株进行鉴定。建立钙流检测体系,对该体系细胞数量、荧光指示剂浓度、孵育时间等条件进行优化。最后利用建立的筛选模型对不同批次的上市药物生长抑素制剂思他宁进行检测。结果 成功构建SSTR2稳转细胞株,受体主要分布在细胞膜上。确定钙流检测最优条件为:30 000个细胞每孔,Fluo-4/AM指示剂浓度为3 μmol·L -1 ~5 μmol·L -1 ,孵育时间为45 min。在该条件下,不同批次的思他宁EC 50 值稳定。结论 成功构建SSTR2稳转细胞株,并优化钙流检测方法,为生长抑素受体激动剂的筛选提供了一种简单稳定的模型。

生长抑素2型受体与消化系肿瘤关系的研究进展

生长抑素（somatostation，SST）是一种环状多肽，最初是从下丘脑中分离出来的，因能抑制垂体释放生长激素而得名，SST广泛分布于胃肠道及中枢神经系统，且在不同组织中表现出不同的浓度，在胃肠道由D细胞产生和分泌。生长抑素有两种活性形式，即14肽生长抑素（SST-14）和28肽生长抑素（SST-28），两种活性形式结构和生物活性都非常相似，其功能早在1973年Gullemin和Gench就认识到，生长抑素不仅对大脑有调控作用，而且对胃肠道也有广谱的抑制作用：抑制胃酸、胰腺外分泌，抑制多种胃肠胰腺激素的释放，降低内脏和门脉血流等作用。生长抑素与靶细胞膜上的受体结合以后，经过受体后信息与转导途径发挥多种作用。

生长抑素联合H_2受体拮抗剂治疗应激性溃疡出血的疗效观察

目的 :探讨生长抑素类似物 (善宁 )与 H2 受体拮抗剂联合应用治疗应激性溃疡出血的临床疗效。方法 :联合应用生长抑素八肽 (善宁 )及 H2 受体拮抗剂治疗应激性溃疡出血 37例 ,给予善宁 10 0 m g静脉点滴每 8h一次 ,同时给予法莫替丁 40 mg静脉点滴 ,每日一次。结果 2 4h、48h、72 h,止血率分别为 2 1.6 %、2 9.7%、37.8% ,3d总止血率 89.2 % ,无效率 10 .8%。结论 :联合应用生长抑素及 H2 受体拮抗剂对各种严重应激导致的溃疡大出血有较显著疗效 ,明显优于单纯应用 H2

生长抑素受体2在小细胞肺癌中的表达及其与患者生物学特征的关系

目的:检测小细胞肺癌(SCLC)标本中生长抑素受体2(SSTR2)的表达,并对SCLC患者的生物学特征(年龄、性别、吸烟、TNM分期、预后)进行统计学分析,旨在判定SSTR2的表达与患者生物学特征是否具有相关性,评估能否将SSTR2作为诊断、治疗的靶点,拓宽SCLC的治疗途径。方法:采用免疫组化方法检测SCLC组织标本、NCI-H446小细胞肺癌细胞株SSTR2的表达,并分别以非肿瘤肺组织及上皮细胞作为对照。收集SCLC患者一般资料,评估SSTR2表达与患者生物学特征的关系。结果:小细胞肺癌株NCI-H446中SSTR2呈强阳性表达(+++),主要表达于细胞膜。上皮对照细胞中,SSTR2无表达。SSTR2在SCLC组织中阳性表达率为69.6%(32/46),强阳性表达率为34.8%(16/46),中度阳性表达率为23.9%(11/46),弱阳性表达率为10.9%(5/46)。非肿瘤肺组织中阳性表达率为10%(1/10),且为弱阳性表达。SSTR2表达阳性者和阴性者的平均生存期分别为33.9个月和28.4个月(中位生存期:21个月vs 24个月),差异无统计学意义(P=0.883)。SSTR2表达与SCLC患者的性别、年龄、是否吸烟、TNM分期以及生存期均无明显相关性(P>0.05)。结论:SSTR2在SCLC中表达率较高,其可作为生长抑素及其类似物靶向治疗SCLC的稳定靶点。而SCLC的SSTR2表达与患者的年龄、性别、吸烟史、TNM分期及生存期无明显相关性,其可能不能作为判断SCLC患者的预后指标。

生长抑素受体亚型在人鼻咽癌细胞株CNE_2中表达

背景与目的:生长抑素受体(somatostatin receptor SSTR)在许多肿瘤组织均有表达,为生长抑素类似物如奥曲肽用于这些肿瘤的治疗提供了生物学基础,但对生长抑素受体在鼻咽癌中表达情况的研究甚少。本研究旨在了解生长抑素受体基因在鼻咽癌细胞中的表达情况,为生长抑素类似物用于鼻咽癌治疗的进一步研究提供试验基础。方法:采用RT-PCR法和SP免疫组化法联合检测体外培养的人鼻咽癌细胞株CNE2的SSTRs表达,并对PCR mRNA产物测序以鉴定结果。结果:RT-PCR提示人鼻咽癌细胞株CNE2分别表达生长抑素受体亚型SSTR1、SSTR2、SSTR4;免疫组化结果:人鼻咽癌细胞株CNE2表达SSTR1、SSTR2A为强阳性(>60%),表达SSTR4为弱阳性、SSTR2介于两者之间、SSTR3和SSTR5则无表达。结论:我们的研究证实人鼻咽癌细胞株CNE2有多种生长抑素受体亚型基因表达,且以表达SSTR1、SSTR2较多。

人表皮生长因子2、血管内皮生长因子和生长抑素受体在中老年进展期胃癌组织中的表达及意义

目的探讨人表皮生长因子2(HER-2)、血管内皮生长因子(VEGF)及生长抑素受体2(SSTR2)在中老年进展期胃癌组织中的表达及其与胃癌预后的关系。方法选取2014年〜2018年南京大学鼓楼医院收治的接受手术切除的200例中老年进展期胃癌患者作为研究对象,采用免疫组化方法,检测胃癌组织中HER-2、VEGF、SSTR2的表达水平,并结合临床特点对其预后进行多因素分析。结果200例中老年进展期胃癌组织中,HER-2阳性40例(20.00%),VEGF阳性175例(87.50%),SSTR2阳性175例(87.50%)。进展期胃癌患者预后多因素分析结果显示:肿瘤大小、年龄、VEGF为中老年进展期胃癌预后的独立危险因素(P<0.05)。结论中老年进展期胃癌组织中VEGF及SSTR2阳性表达率高,提示其在胃癌的发生、发展过程中存在协同作用;VEGF对中老年进展期胃癌预后具有独立预测意义。

生长抑素受体2的功能与研究进展

生长抑素受体(somatostatin receptors,SSTR)家族属于G蛋白耦联受体超家族,共有5种亚型(SSTR1-5)。其中SSTR2是目前研究最广泛和深入的SSTR亚型,分布于人体各组织器官,并且在内分泌、中枢神经等系统发挥重要调节作用。在病理情况下,许多肿瘤高表达SSTR2,以SSTR2为靶点进行肿瘤的影像学检查和靶向治疗可以有效控制肿瘤生长、增殖、转移以及评估肿瘤恶性程度和预后效果,具有很好的临床应用前景。此外,在心血管尤其是血管内皮的功能调控中,SSTR2也发挥着重要作用。本文对SSTR2的功能及其在肿瘤和心血管这两个主要研究领域中的进展进行了总结。

在人类绒毛膜血管神经丛和蛛网膜颗粒中生长抑素受体1和2的表达-与特发性高颅压的关联

目的：用免疫组化的方法研究在人绒毛膜血管神经丛(CP)和蛛网膜颗粒中(AGs)生长抑素受体1和2的定位。