靶向生长抑素受体SSTR2的新型白蛋白亲和放射性碘标记分子探针的制备与评价

生长抑素受体亚型2(SSTR2)在神经内分泌肿瘤和多种心血管疾病中高表达,是一个非常有吸引力的靶点.基于铜介导下放射性碘离子与苯硼酸底物发生氧化偶联反应的方法,构建了靶向SSTR2的新型放射性碘标记分子探针[^(131)I]IPBA-TATE和[^(131)I]IBA-TATE(对照),并在体外评价了其理化性质及白蛋白结合特性.在BALB/c小鼠中测定其血液末端清除半衰期,并在正常小鼠和AR42J肿瘤模型小鼠中研究其生物分布特性(以每克组织中摄取注射剂量的百分率(%ID/g)为单位).结果表明:[^(131)I]IPBA-TATE的放射性化学产率为(64.0±4.2)%(n=3),在体外具有良好的稳定性和蛋白亲和性;相比于[^(131)I]IBA-TATE,[^(131)I]IPBA-TATE的血液末端清除半衰期延长了60%,为(25.50±3.35)h.在给药后4 h,[^(131)I]IPBA-TATE在AR42J肿瘤中的摄取为(1.21±0.67)%ID/g,具有较高的瘤/肉比(5.30±2.07).可见[^(131)I]IPBA-TATE是一种基于奥曲肽的新型碘标记白蛋白亲和探针,有望用于SSTR2阳性肿瘤的单光子发射计算机断层显像及放射性核素靶向治疗.

人类乳腺良恶性病变的SSTR2mRNA表达及其与类固醇受体相关性研究

目的 了解人类良、恶性乳腺病变组织中生长抑素受体亚型 2 (SSTR2 )mRNA的表达情况 ,并探讨其与雌激素受体(ER)、孕激素受体 (PR)的相关性。方法 收集 2 3例乳腺癌、16例乳腺增生病和 9例乳腺纤维腺瘤手术标本 ,采用多相寡核苷酸探针原位杂交法检测SSTR2mRNA表达 ,免疫组化法检测ER、PR状况 ,并用图像分析仪进行SSTR2mRNA相对含量测定。结果 SSTR2mRNA在乳腺癌表达的阳性率 (87% )和相对含量 (0 .4 7)均明显高于乳腺良性病变 (6 4 % ,0 .2 6 ) (P <0 .0 5 )。乳腺良性病变中SSTR2mRNA表达与ER呈正相关 (P <0 .0 5 ) ;在乳腺癌中SSTR2mRNA表达与ER、PR均呈正相关(P <0 .0 5 )。结论 SSTR2mRNA在乳腺良、恶性病变组织中普遍表达 ,恶性高于良性 ;SSTR2mRNA表达与ER、PR具有相关性 ,提示对ER阳性乳腺癌采用抗雌激素与SST类似物联合治疗的可行性。

pAd-SIG腺病毒质粒构建及其在MCF-7细胞中的表达

目的含人生长抑素受体2亚型(human somatostatin receptor subtype2,hSSTr2)和增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)的腺病毒重组质粒的构建及表达。方法采用PCR方法将hSSTr2以及IRES-EGFP基因亚克隆至穿梭质粒pShuttle-CMV中,获得pShuttle-CMV/hSSTr2-EGFP,经PmeⅠ酶切,去磷酸化后转化含pAdeasy-1的超感受态BJ5183菌,细菌内同源重组构建腺病毒质粒pAdeasy-1/hSSTr2-EGFP(pAd-SIG),将其转染HEK293细胞进行病毒包装与滴度测定。重组腺病毒感染MCF-7细胞,流式细胞术检测其表达。结果酶切、PCR及基因测序证实重组腺病毒质粒pAd-SIG构建成功,病毒滴度为8.2×109IU/ml,流式细胞术结果显示hSSTr2在MCF-7细胞中表达阳性率为86.59%。结论成功构建了重组腺病毒质粒pAd-SIG,并能在真核细胞表达,为体内外研究hSSTr2效应提供了基础。