长链非编码RNA母系表达基因3在垂体生长激素细胞肿瘤组织中的表达及其临床病理相关性分析

目的按探讨长链非编码RNA(LncRNA)母系表达基因3(MEC3)在垂体生长激素(GH)细胞肿瘤组织中的表达水平及其临床病理相关性。方法利用ChipBase v3.0数据库分析正常垂体组织中MEC3与谱系分化因子核受体亚家族5A族成员1(NR5A1)、POU1类同源盒1(POU1F1)、Tbox转录因子19(TBX19)、GH、GH受体(CHR)、CH释放激素受体(CHRHR)、胰岛素样生长因子1受体(ICF1R)、生长抑素受体2/5(SSTR2/5)基因的相关性。选取来源于唐山市人民医院神经外科的28例垂体GH细胞肿瘤患者的手术切除肿瘤标本,采用实时定量PCR法检测肿瘤组织中MEC3的表达水平,采用免疫组织化学染色方法检测肿瘤组织中CH、CHRHR和SSTR5蛋白的表达情况。采用Pearson相关性检验分析肿瘤标本中MEC3基因表达水平与CH、GHRHR和SSTR5蛋白表达水平的关系。根据MEC3基因表达水平,将患者分为MEC3高表达组(表达水平≥0.14,14例)和低表达组(表达水平<0.14,14例),分析MEC3基因表达水平与患者的临床病理特征的相关性。结果ChipBasev3.0数据库分析结果显示,31种器官中,垂体的MEC3表达水平与POU1F1、NR5A1和TBX19表达水平的相关性分别排名第1(r=0.60)、9(r=0.32)和29位(r=0.28)(均P<0.05)。31种器官的MEC3基因表达水平与GH、GHRHR和SSTR5基因表达水平的相关性中,垂体均位居第1(r值分别为0.60、0.72和0.57)(均P<0.05);MEC3表达水平与ICF1R和GHR表达水平的相关性中,垂体分别位居第4(r=0.74)、18位(r=0.28)(均P<0.05);而与SSTR2表达水平的相关性无统计学意义(P>0.05)。Pearson相关分析结果显示,MEC3基因表达水平与肿瘤组织标本中GH、GHRHR和SSTR5蛋白的免疫组织化学评分均呈正相关(r值分别为0.59、0.65和0.47,均P<0.05)。MEC3高表达组与低表达组患者的肿瘤体积和最大径的差异均无统计学意义(均P>0.05)。MEG3高表达组和低表达组的Ki-67增殖指数[M(Q_(1),Q_(3))]分别为2.0%(1.5%,2.6%)和3.0%(2.0%,6.6%),差异有统计学意义(Z=2.11,P=0.001);Ki-67增殖指数>3.0%者分别占2/14和6/14,两组的差异无统计学意义(P=0.088)。透射电镜结果显示,MEG高表达组存在细胞内大量致密圆形颗粒者的比例为10/14,MEG低表达组为3/14,差异有统计学意义(P=0.001)。结论MEG3可能促进垂体肿瘤向GH细胞肿瘤分化和合成CH,并抑制肿瘤的增殖,其表达量的高低可能影响肿瘤的激素颗粒类型.

生长激素基因SNPs与康乐黄鸡产蛋性状的关联分析

为探索生长激素(Growth hormone,GH)基因部分序列单核苷酸多态性(Single nu⁃cleotide polymorphism,SNP)位点与康乐黄鸡母鸡产蛋性状的相关性,寻找地方鸡种产蛋性状选育的分子标记,试验选取294只康乐黄鸡母鸡为研究材料,测量并记录3个产蛋性状指标,包括开产日龄、初产体重和182日龄产蛋数。采用PCR直接测序法筛选GH基因内含子1区域SNPs,利用SAS分析产蛋性状关联的SNPs。结果显示:共发现30个SNP位点,其中共有5个SNP位点与康乐黄鸡母鸡产蛋性状显著关联,其中位于内含子1区域的位点T1270451C与康乐黄鸡母鸡182日龄产蛋数,位点C1271148T与开产日龄、初产体重,位点A1271168G与开产日龄,位点G1271198A与初产体重均显著相关,位于内含子2区域的位点T1270070A与初产体重显著相关。研究表明,GH基因内含子1区域的4个位点T1270451C、C1271148T、A1271168G、G1271198A,内含子2区域T1270070A位点可作为康乐黄鸡产蛋性状选育的候选分子标记。

不同剂量基因重组人生长激素治疗特发性矮小症的临床疗效观察

目的探讨不同剂量基因重组人生长激素(r-hGH)治疗特发性矮小症(ISS)的临床疗效及对患儿糖脂代谢水平等的影响。方法选取2020年1月至2021年6月抚州市第一人民医院收治的72例ISS患儿作为研究对象,根据r-hGH应用剂量的不同分为L组与S组,每组36例。L组给予大剂量r-hGH(每天0.20 IU/kg)治疗,S组给予小剂量r-hGH(每天0.15 IU/kg)治疗。比较两组临床疗效、糖脂代谢情况、甲状腺功能及不良反应发生情况。结果治疗后,两组生长速度快于治疗前,身高高于治疗前,骨龄大于治疗前,且L组生长速度快于S组,身高高于S组,骨龄大于S组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组空腹胰岛素、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、甘油三脂(TG)水平均低于治疗前(P<0.05),但组间比较差异无统计学意义;两组空腹血糖、胰岛素敏感指数及总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平与治疗前及组间比较差异无统计学意义。治疗前后,两组促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)水平组内、组间比较差异无统计学意义。两组不良反应发生率比较差异无统计学意义。结论大剂量r-hGH治疗ISS临床疗效更佳,且不同剂量r-hGH不会对患儿糖脂代谢水平产生明显影响。

革胡子鲇生长激素基因表达定量PCR分析的引物设计与评估

以革胡子鲇(Clarias gariepinus)为试验对象,对其生长激素(GH)基因进行荧光定量PCR(qPCR)的引物设计与评估。将合成的5对引物通过常规PCR电泳结果选择出符合条件的GHF-GHR引物,并进行qPCR引物的评估。结果显示:扩增GH基因片段的引物GHF-GHR扩增时熔解曲线为单一峰,说明引物具有良好的特异性;通过标准曲线得出GHF-GHR引物的扩增效率为93.3%,标准曲线的R2值为0.982,说明引物的扩增效率良好。上述结果说明GHF-GHR引物能用于待检样本的GH基因表达的qPCR分析。

斜带石斑鱼生长激素/催乳素家族基因cDNAs的分子克隆及其进化意义

从斜带石斑鱼垂体提取总RNA ,再取其 5 0ng合成SMARTcDNA。从所构建的垂体SMARTcDNA质粒文库中筛选到生长激素 /催乳素基因家族的 2个成员的全长cDNA片段 :生长激素 (GH )基因全长为 938bp ,编码 2 0 4个氨基酸 ;催乳素基因 (PRL)全长为 14 2 9bp ,编码 2 12个氨基酸。采用计算机软件Mega 2和CLUSTALW1 6 4b对 9种鱼的生长激素 /催乳素基因家族的 3个成员 (GH、PRL和生长催乳素SL)的氨基酸序列进行系统分析 ,构建NJ分支系统树 ,对于序列中的插入 /缺失位点则采用PairaiseDeletion ,10 0 0次自展(Bootstrap)分析计算各节点支持率。根据 3个基因的氨基酸序列构建的系统树表明 ,石斑鱼与金头鲷、金鲈和牙鲆聚成一类 ,虹鳟与大马哈鱼聚成一类 ,鲫鱼与鲶鱼聚成一类 ,鳗鲡成另外一类。根据石斑鱼全长cDNA推断的氨基酸序列比较表明 ,SL相对GH和PRL有较高的保守性。石斑鱼的GH、PRL和SL的氨基酸同源性在2 4 %～ 31% ,但其C -端的氨基酸同源性较高 ,尤其是C -端的 3个Cys是严格保守的。其中SL与GH的同源性 (30 8% )高于与PRL的同源性 (2 5 6 % ) ,GH和PRL的同源性最低 (2 4 1% )。

基因重组人生长激素+促性腺激素释放激素激动剂治疗大骨龄矮小儿童的临床效果

目的探讨大骨龄矮小儿童采用基因重组人生长激素+促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)联合治疗的临床效果。方法于三明市中西医结合医院2018年6月至2021年6月接诊的大骨龄矮小患儿中选取64例作为研究对象,采取奇偶数法将患儿分为对照组与观察组,每组各32例。对照组采取基因重组人生长激素单独治疗,观察组采取基因重组人生长激素+GnRHa联合治疗,对比两组治疗前、治疗1年后的生长速率(GV)、骨龄(BA)、预测成年身高(PAH)以及BA的身高标准差积分(Ht SDSBA)情况。结果治疗后观察组GV高于对照组,BA低于对照组(P<0.05);治疗后观察组PAH、Ht SDSBA均优于对照组(P<0.05)。结论基因重组人生长激素+GnRHa联合治疗方案更有助于大骨龄矮小儿童的身高改善,值得推广。

毛发鼻指(趾)骨综合征合并生长激素缺乏症一例并文献复习

毛发鼻指(趾)骨综合征(TRPS)是一种罕见的常染色体显性遗传病,其临床特征主要为毛发稀疏、梨状鼻、部分指(趾)骨锥形骨骺及短指畸形等。本文报道了1例因矮小、特殊面容于2021-01-07在石河子大学医学院第一附属医院儿科确诊为TRPS合并生长激素缺乏症的患儿,回顾性分析了患儿的临床资料及诊断过程,基因检测显示其TRPS1_ex6 c.2725dupT(p.Cys909Leufs*42)杂合移码突变为新发变异,根据美国医学遗传学与基因组学会(ACMG)指南判读为致病变异,确诊为TRPS合并生长激素缺乏症,并给予重组人生长激素治疗,随访1年2个月发现,重组人生长激素治疗可以改善TRPS合并生长激素缺乏症患儿的身高,且未引起患儿颅内压增高、甲状腺功能减退等不良反应。

生长激素基因多态性与山羊体重性状的关系

以鲁北白山羊、波尔山羊以及波尔山羊与鲁北白山羊的杂交一代、回交一代共计224只山羊为材料,根据山羊生长激素基因5′调控区的序列(GenBank登录号:D00476)设计两对引物,用PCRSSCP法进行多态性分析。多态性片段的纯合基因型经克隆测序,发现共有5处突变。对突变位点产生的不同基因型与体重、体尺性状进行分析表明:第一对引物扩增片段波尔山羊AA型个体的初生重、周岁重显著高于BB型和AB型(P<0.05);杂交一代中断奶重、周岁重也以AA型偏高,但不同基因型间的差异均不显著(P>0.05);而鲁北白山羊BB基因型的体重相对于另外两种基因型的偏低,且断奶重的差异达到显著水平(P<0.05)。第二对引物扩增片段不同基因型对体重、体尺没有显著影响。由此初步推断生长激素基因可能是影响山羊体重性状的主基因或与主基因相连锁,可以用该位点对山羊体重性状进行标记辅助选择。

精神分裂症患者血清催乳素和生长激素水平研究

目的 探讨精神分裂症患者血清催乳素（ Ｐ Ｒ Ｌ） 、生长激素（ Ｇ Ｈ） 基础水平与正常人的差异及治疗前后 Ｐ Ｒ Ｌ、 Ｇ Ｈ 水平的变化，以及利培酮对 Ｐ Ｒ Ｌ、 Ｇ Ｈ 的影响。方法 采用放射免疫法对６２ 例精神分裂症患者治疗前和治疗后第２ 、４ 、６ 周末的 Ｐ Ｒ Ｌ、 Ｇ Ｈ 水平进行测定，并与３２ 名正常人对照，同时分为利培酮组３２ 例和氯丙嗪组３０ 例进行对照分析。结果 精神分裂症患者总样本的基础 Ｐ Ｒ Ｌ、 Ｇ Ｈ 水平与对照组无差异（ Ｐ＞ ０ ．０５） ，用抗精神病药物治疗后 Ｐ Ｒ Ｌ 显著升高（ Ｐ＜ ０ ．０１） ， Ｇ Ｈ 无显著变化（ Ｐ＜ ０ ．０５） 。女性患者治疗后 Ｐ Ｒ Ｌ 水平升高明显，为男性的２３ 倍。利培酮治疗后６ 周末 Ｐ Ｒ Ｌ 水平为（１２２ ．３３ ±７３ ．２７）μｇ／ Ｌ，较治疗前明显增高（ Ｐ＜ ０ ．０１） ，较氯丙嗪组 Ｐ Ｒ Ｌ 水平（１０２ ．０６ ±６５ ．６１）μｇ／ Ｌ为高，但无显著差异（ Ｐ＞ ００５） 。结论 结果支持精神分裂症的多巴胺功能亢进假说，抗精神病药物所致 Ｐ Ｒ Ｌ 升高有明显的性别差异，利培酮有明显的致 Ｐ Ｒ Ｌ 升高的作用，有较强的拮抗中枢多巴胺作用。

生长激素基因(GH2)多态性与猪部分生产性能的关系

采用PCR -RFLP对南昌白猪 (117头 )和大约克夏猪 (36 1头 )的GH 2基因 - 119～ +486bp的片段进行了扩增 ,并用ApaⅠ酶切 ,产生了 2个等位基因A(44 9+10 1+5 5bp)和B(316 +133+10 1+5 5bp)。分析了不同基因型对个体初生重、2月龄重、4月龄重、6月龄重、校正背膘厚、平均背膘厚、瘦肉率和料重比等生产性能的影响。结果表明 ,在南昌白猪中 ,不同GH 2基因型间在所测的生产性能上差异不显著 (P >0 0 5 ) ;在大约克夏猪中 ,AA型猪的瘦肉率最低、与BB型猪相比 ,差异显著 (P <0 0 5 )。

人生长激素基因在团头鲂和鲤中的整合和表达

采用显微注射方法，将带有小鼠ＭＴ－１基因启动顺序与人生长激素ｈＧＨ基因顺序重组的线状ＤＮＡ片段，注入团头鲂和鲤的受精卵，获得成活的实验鱼。经斑点、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交、放射免疫和酶联等方法检测，表明外源基因在受体鱼中得到整合、转录、翻译和表达，并具促生长效应。转基因雌鱼和雄鱼有性繁殖所获得的子鱼带有外源基因，表明外源基因能通过性细胞传递给子代，并仍具促生长效应。

转牛（羊）生长激素基因工程鲤鱼研究

生产出转牛和羊生长激素基因实验鲤鱼一万余尾，筛选出生长速度快，含有外源基因的转基因鲤鱼１４３尾。遗传实验证实外源基因可遗传给后代，经池塘生长实验证明子代仍具有生长速度快的特征，建立了把外源基因直接注入鲤鱼受精卵及确定了外源基因导入鲤鱼受精卵的最佳时期等构建转基因鱼的一整套技术。

鲤鱼(Cyprinus carpio)生长激素基因克隆及原核表达

采用逆转录—聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法，从鲤鱼脑垂体总ＲＮＡ中扩增出编码鲤鱼生长激素（ＧＨ）成熟肽基因序列．定向克隆至质粒ｐＵＣ１８，克隆的鲤鱼ＧＨｃＤＮＡ不含信号肽序列并以新的起始密码子ＡＴＧ取代鲤鱼ＧＨｃＤＮＡ第１个密码子ＴＣＡ．序列分析表明，与Ｋｏｒｅｎ报道的鲤鱼ＧＨｃＤＮＡ相比有两个碱基差异，但推断的氨基酸序列完全一致．将鲤鱼ＧＨｃＤＮＡ定向克隆至原核表达载体ｐＢＶ２２０，构建成重组鲤鱼ＧＨ基因表达载体ｐＢＶｃＧＨ８．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和薄层扫描分析表明：经４２℃诱导，ｐＢＶｃＧＨ８在大肠杆菌中可表达一分子量约２２０００的特异蛋白，表达量占细胞总蛋白的２９．２％．该基因重组的鲤鱼ＧＨ添加到饲料中投喂罗非鱼。

人生长激素基因在转基因鲤鱼体内的遗传

通过有性繁殖转移人生长激素基因鲤鱼(P_1),获得了转基因鲤鱼的子一代(F_1)和子二代(F_2);外源基因在转基因P_1与普通鲤鱼杂交产生的F_1代和转基因F_1代自交产生的F_2代鱼中的存在率分别为45.4%和66.7%;外源基因拷贝数在子代个体之间存在很大差异,从每细胞2拷贝到每细胞200拷贝不等;外源基因在转基因鱼子代中仍可表达具有生物功能的产物,人生长激素(hGH),并能促进鱼的生长。

生长激素受体及其基因研究进展

生长激素(growthhormone,GH)参与动物的生长、发育等代谢过程.GH发挥生理作用,首先是与靶细胞膜表面的生长激素受体(growth hormone receptor,GHR)结合,启动细胞内信号传导,促进胰岛素样生长因子(Insulin_like growth factor,IGF_I)的表达,再通过血液循环到达生物体局部组织,促进细胞的代谢过程.GHR是一种特异、高效的膜蛋白.GHR对GH的功能发挥有重要的影响,其在细胞内的表达量对生长激素发挥作用有重要影响,从而影响了生物器官组织的生理功能.就生长激素受体及生长激素受体基因的研究进展进行综述.

转移人生长激素基因和注射人生长激素对促进银鲫生长的研究

本研究将人生长激素基因重组 DNA 导入银鲫受精卵,或用人生长激素对60日龄银鲫连续6周腹腔注射,均观察到了受体鱼的快速生长效应,转移人生长激素基因鱼在60日龄时的平均体重比对照鱼平均体重增加82%,相应体长平均值比对照鱼增加19.7%;在125日龄时,转基因组平均体重比对照组增加17.7%,相应体长平均值比对照增加3.5%。定期注射人生长激素,在6周的注射实验过程中,实验鱼的体重,体长都与对照组相近或略有减小。但是,在水泥池中饲养一个月后,注射10/μg/g 体重的实验组鱼平均体重比相应对照组鱼的平均体重增加32%;相应体长平均值增加11%。

三种鳜鱼(Siniperca)生长激素基因的克隆及序列比较

采用长片段PCR及T-A克隆技术,从基因组DNA成功克隆翘嘴鳜、大眼鳜和斑鳜含完整阅读框的生长激素(GrowthHormone,GH)基因DNA全序列,翘嘴鳜序列全长5548bp,大眼鳜序列全长5483bp,斑鳜序列全长5789bp,提交GenBank数据库后获得注册号分别为EF205280、EF205281、EF441623。三种鳜鱼GH基因均由六个外显子、五个内含子组成;均在第二内含子中相同位置发现"AG"微卫星重复序列;均在第三内含子末端发现一处剪接位点序列的相邻重复。三种GH基因在第一、二、三内含子处存在碱基长度差异。序列间差异主要表现为邻近序列的重复、DNA片段的缺失或插入及单核苷酸多态性(SNP)。翘嘴鳜与大眼鳜GH基因编码氨基酸序列完全相同,两者与斑鳜序列在第150位有一个氨基酸残基差异。采用MEGA软件对三种鳜鱼GH基因DNA序列及编码氨基酸序列分别构建UPGMA系统发育树,结果表明,在系统发育中,斑鳜可能最先从共有祖先物种中分化出来。

七彩神仙鱼催乳素基因的克隆、定位及表达分析

【目的】七彩神仙鱼(Symphysodon aequifasciatus)具有特殊的亲代抚育行为,克隆并定位七彩神仙鱼催乳素基因,分析其在亲代抚育中的表达模式,为理解催乳素在七彩神仙鱼亲代抚育中的作用提供依据。【方法】通过BLASTP对七彩神仙鱼全基因组进行分析,鉴定出1个催乳素基因,命名为dfprl。基于dfprl基因的CDS区,设计克隆和PCR引物,通过RACE技术克隆获得dfprl基因全长,并利用生物信息学对dfprl基因进行结构分析,对其氨基酸序列进行理化性质和进化分析。对不同抚育阶段七彩神仙鱼的脑、性腺和皮肤进行转录组分析,探究dfprl基因在亲代抚育中的表达特征,并利用原位杂交技术对dfprl基因在七彩神仙鱼皮肤中的表达进行定位。【结果】dfprl全长为1282 bp,cDNA序列开放阅读框长度为639 bp,共编码212个氨基酸,5'-UTR为309 bp,3'-UTR为334 bp。dfprl蛋白存在PRL家族的典型结构域Hormone_1,dfprl蛋白与慈鲷科其他鱼类PRL蛋白相似性较高,与尼加拉瓜湖始丽鱼(Archocentrus centrarchus)对应的氨基酸序列同源性最高、为96.70%。亲鱼进入抚育阶段后,dfprl在性腺和皮肤中的表达水平逐渐上升,抚育结束时表达水平下降。原位杂交结果显示,dfprl在皮肤粘液细胞中表达,且与七彩神仙鱼催乳素受体(dfprlr)表达位点重叠,在抚育早期阶段高表达。【结论】七彩神仙鱼dfprl基因高度保守,存在稳定的Hormone_1结构域。七彩神仙鱼dfprl基因在亲代抚育阶段的皮肤中高表达,且在亲代抚育阶段的皮肤粘液细胞中与dfprlr表达位点重合,表明dfprl可能通过作用于dfprlr进而促进七彩神仙鱼独特抚育行为的发生。

精神分裂症患者血清催乳素和生长激素水平及与利培酮、氯丙嗪治疗关系的对照研究

目的 :探讨精神分裂症患者的血清催乳素 ( PRL)、生长激素 ( GH)的基础水平与正常人的差异 ,及治疗前后 PRL、GH水平的变化 ,以及利培酮对 PRL、GH的影响。方法 :采用放射免疫法对 2 1例精神分裂症患者治疗前和治疗后第 2、 4、 6周末的 PRL、 GH水平进行测定 ,并与 3 2名正常人为对照 ,同时将药物分为利培酮组 11例和氯丙嗪组 10例。结果 :精神分裂症患者的基础 PRL、 GH水平与对照组无差异 ( P>0 .0 5 ) ,但女性患者 PRL明显低于对照组 ( P<0 .0 5 )。抗精神病药物治疗后 PRL 显著升高 ( P<0 .0 1) ,GH下降 ,但未达显著差异水平。女性患者治疗后 PRL 升高明显 ,为男性的 4 .0 6倍。利培酮治疗 6周末 PRL 为 119.61± 64 .4 2 ng/ml,较治疗前增高显著 ( P<0 .0 1) ,与氯丙嗪组比较无差异 ( P>0 .0 5 )。结论 :支持精神分裂症的多巴胺功能亢进假说 ,抗精神病药物所致 PRL 升高有明显的性别差异 ,利培酮有明显的致 PRL升高作用 。