建鲤生长激素受体基因分离、转录子多态性以及组织表达特性

使用PCR、RT-PCR和RACE方法分离克隆了建鲤基因组内的4个jlGHRs基因,同源性分析和系统树表明它们两两分属于鱼类GHR1和GHR2,命名为jlGHR1a、jlGHR1b;jlGHR2a、jlGHR2b。jlGHR1s和jlGHR2s的两个旁系同源基因间氨基酸差异分别为5%和11%,但功能保守区FGVFS基序、Box1、Box2基本一致,jlGHR1s和jlGHR2s氨基酸差异为41%。jlGHRs和斑马鱼GHRs基因结构相同,在阅读框内存在7个内含子,两旁系同源基因间内含子长度或序列存在差异。jlGHR1s、jlGHR2s与不同鱼类GHR1、GHR2同源性高低与传统分类地位一致。实验过程中发现建鲤肝脏存在jlGHRs的多种转录子,包括丢失了外显子4的jlGHR1b'、保留了内含子3的jlGHR2a'、丢失了部分外显子8的jlGHR2as。实时定量RT-PCR组织表达结果显示4个jlGHRs在脑、肝、心、头肾、肾、肠、脾、肌肉各组织中均有表达,但表达量差异明显,其中肌肉组织中4个基因表达量均最高,脑中4个基因的表达水平相当,其余各组织中jlGHR2b的表达量均最高。从多转录子和较低表达量推测jlGHR2a所受的选择压力低于jlGHR2b。鲤鱼基因组内分离到GHR1、GHR2的两个旁系同源基因在功能基因方面证实了鲤鱼体内存在两套基因,表明鲤鱼是研究同源基因变异分化的好材料,也为今后正确查找jlGHRs基因上的SNP位点奠定了基础。

生长激素受体基因表达的研究进展

生长激素(growth hormone,GH)在促进动物生长、发育等代谢过程中起着重要作用。长期以来人们在研究动物生长发育机制及其调控时,主要着眼于提高生长激素水平。然而GH必须与靶器官上生长激素受体(growth hormone receptor,GHR)结合,由GHR介导将信号传入细胞内才能发挥作用。大量研究结果显示,动物生长速度与GH水平并不完全平行,但与肝脏GHR呈明显正相关。生长快的肉鸡血液中GH和垂体GH mRNA水平比生长慢的蛋鸡低,而肝脏GHR水平比蛋鸡高;患侏儒症动物血液中GH浓度却比正常动物高,而GHR胞外部分缺失或功能不全。可见GHR基因表达对动物生长发育调控起着至关重要的作用。

生长激素与生长激素受体基因的表达

在动物生长轴中,GH是调控动物生长发育的核心激素,它具有促生长作用。但GH发挥生理作用的第一步是与靶细胞膜表面的GH受体(GHR)结合,由GHR介导将信号传入细胞内从而产生一系列生理效应。在生理激素浓度下,GH与GHR以1/2相结合。在超生理激素浓度下,激素饱和了所有的受体分子形成1/1的复合物,阻止了受体二聚化和信息传递。当GH水平提高而GHR基因表达没改善时,不仅GH的作用不能完全发挥,而且可能因为GH过剩而产生负反馈调节,影响其他生理功能。这可能是某些促生长激素轴功能的添加剂在使用一段时间后效果减弱的原因之一。因此,在直接或间接提高GH水平的同时,应该提高GHR基因表达水平,才能最大限度发挥GH的作用。促进GHR基因表达有促进动物生长发育和发展的趋势,可使畜禽生产性能在较高水平的情况下再上新台阶。

荷斯坦母牛生长激素受体基因F279Y突变与产奶性状的关联分析

采用PIRA-PCR和RFLP法检测204头中国荷斯坦母牛生长激素受体(growth hormone receptor,GHR)基因F279Y突变,并分析其与产奶性状的关系。结果在中国荷斯坦母牛中检测到GHR基因F279Y突变,3种基因型TT、TA和AA的频率分别为0.461、0.495和0.044,等位基因T和A的频率分别为0.708和0.292。分析表明,AA基因型个体305天产奶量显著高于TA和TT基因型(P<0.05);TT基因型个体乳脂率显著高于AA基因型个体(P<0.05),乳蛋白率极显著高于TA和AA基因型个体(P<0.01)。A等位基因对305天产奶量有正加性效应,显性度相对较高;而对其他4个乳成分性状有负加性效应,显性度相对较低。等位基因A具有提高产奶量的效应,等位基因T具有提高乳成分的效应。本研究初步表明F279Y突变可以用于中国荷斯坦牛产奶性状的标记辅助选择。

鹅生长激素受体基因克隆及其个体发育性表达研究

以籽鹅为实验材料,根据鸡生长激素受体(GHR)基因mRNA序列设计并合成引物,通过PCR技术克隆了鹅GHR基因,并利用TaqMan实时荧光定量PCR方法检测籽鹅出壳到90日龄GHRmRNA在部分组织中的表达量变化。结果表明:鹅与鸡和鸭的GHR基因核苷酸序列同源性为97.1%和99.1%,氨基酸同源性均为99.1%。籽鹅肝组织中GHRmRNA表达水平在10到90日龄都较高,显著高于1日龄,以30日龄的表达量最高。30日龄GHRmRNA在肝脏等检测的组织中都有表达,但在肝脏和骨骼肌中的表达量高。肝组织中GHRmRNA表达量与日增重呈显著正相关(r=0.9116)。本实验结果揭示了生长期籽鹅组织中GHRmRNA表达水平的差异,为进一步研究生长轴相关基因对鹅生长及繁殖的调控作用奠定基础。

一个Laron综合征家系患者临床特点和生长激素受体基因突变分析(英文)

Laron综合征是一种常染色体隐性遗传病,生长激素受体(GHR)基因缺陷是导致Laron综合征的主要病因。Laron综合征主要临床特征为生后严重的生长落后伴特殊面容,血生化特点为高生长激素(GH)、低胰岛素样生长因子-I(IGF-I)和低胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)。该研究报道一家系2例Laron综合征患者的临床特点及GHR基因突变。这两个病人为同胞姐弟。弟弟8岁,身高80.0cm(-8.2SDS),姐姐11岁,身高96.6cm(-6.8SDS)。他们出生体重和身长无特殊,自生后出现生长落后,身高明显落后于同龄正常儿童,并均呈现了典型Laron综合征外貌特征:身材矮、肥胖、前额突出、大眼睛、塌鼻梁、头发稀软。这两个病人空腹血清GH值均明显高于正常儿童,空腹血清IGF-I明显低于同年龄同性别正常儿童,血浆IGFBP-3和生长激素结合蛋白(GHBP)低于检测线。其中1例(8岁男孩)胰岛素和可乐定刺激后GH峰值大于350ng/mL,给予重组人生长激素治疗1年,身高由治疗前的80.0cm增加至83.3cm。GHR基因序列测定结果显示2例患者均存在外显子4上第65位氨基酸的纯合突变S65H(TCA→CCA),为新发现的突变。Laron综合征患者存在特殊的面貌特征,结合血GH、IGF-I、IGFBP-3和GHBP测定可以明确诊断。GHR基因外显子4上S65H突变可能是这两位Laron综合征患者的致病原因。

鹅生长激素受体基因荧光定量PCR检测方法的建立

根据GenBank中鹅生长激素受体(GHR)基因序列设计合成了引物和探针,对荧光定量PCR的方法进行了方法学的评估,建立了TaqmanMGB荧光定量RT-PCR检测方法。结果表明,由pMD-18T-GHR所构建的标准曲线线性关系良好,建立的GHR基因荧光定量PCR检测方法灵敏度高、特异性强(可以检测出低于10个拷贝/μl的样品),准确可靠。籽鹅和莱茵鹅GHRmRNA出壳到90日龄生长过程中肝脏中的表达量不同,30日龄不同组织的表达量各有变化特点。

Laron综合征家系患者生长激素受体基因突变分析

目的研究Laron综合征患者的临床特点及生长激素受体(GHR)的基因突变。方法对一家系中2例表现为身材明显落后的患儿进行研究,分别进行体格测量和GH-IGF-I轴功能测定。提取外周血白细胞基因组DNA,运用聚合酶链式反应(PCR)扩增GHR基因第2～9外显子及其两侧的侧翼序列,直接进行测序,将所测结果与正常人GHR基因序列进行对比,确定突变位点和突变类型。对突变基因均经2次测定证实。结果2例患儿自出生后身长明显落后于同龄儿童,呈现Laron综合征的独特面貌,空腹血清GH值均明显高于正常儿童。空腹血清IGF-I明显低于同年龄同性别正常儿童。血浆IGFBP-3和GHBP低于检测线。GHR基因序列测定结果显示2例患儿均存在外显子4上第65为氨基酸的纯合突变S65H,为新发现突变。结论Laron综合征患者存在典型的面貌特征,结合血GH、IGF-I、IGFBP-3和GHBP测定可以明确诊断。GHR基因外显子4上S65H突变可能是该Laron综合征患者的致病原因。[临床儿科杂志,2007,25(12):971-973]

贵州矮马(Equus caballus)生长激素受体基因5个单核苷酸位点的多态性研究

旨在探究贵州矮马生长慢的根本原因,本研究采用PCR和基因克隆技术测定贵州矮马生长激素受体基因(GHR)外显子10的核苷酸序列;以伊犁马为对照,通过AS-PCR和SSCP方法研究贵州矮马群体中SNP位点的分布频率,应用群体遗传学和生物信息学方法分析基因型与体尺指标间的相关性。结果,从贵州矮马GHR外显子10中得到10个单倍型,包括10个SNPs位点,其中的5个引起氨基酸改变。与伊犁马相比,贵州矮马GHR基因1028位点的A等位基因占优势,对应较低的尻高和较粗的管围;1471位点的E等位基因在贵州矮马群体中分布较多,与胸围率较高相关;1697和1732两个位点的杂合型存在于最矮的雄性矮马(6岁)GHR基因中。1028位点引起的V343A位于UbE结构域中,1471、1697和1732位点引起的S491G、Y566C和R578G改变与GHR蛋白的磷酸化有关。这4个位点可能影响GHR的内化作用或通过磷酸化途径影响细胞内的信号传导效率。研究结果提示,贵州矮马GHR基因外显子10中的多态性变化可能影响贵州矮马的生长发育。

绵羊肝脏生长激素受体基因表达的发育性变化研究

[目的]研究哈萨克羊和新疆细毛羊肝脏生长激素受体（Growth hormone receptor，G积）基因在发育早期的表达，为绵羊早期生长发育的研究提供资料。[方法]采用实时定量PCR检测2个品种羊在2、30、60、90和120日龄时肝脏GHR mRNA的水平，并用SPSS软件进行统计分析。[结果]绵羊肝脏GHR基因的表达量在2日龄时较高，30日龄时降到最低点，然后持续上升；30日龄后的变化趋势与绵羊的累积生长曲线呈正相关（P〈0．05）；哈萨克羊的GHR表达量在2～90日龄期间均低于新疆细毛羊，但仅在2和90日龄时差异极显著（P〈0．01）。[结论]雄性哈萨克羊和新疆细毛羊肝脏GHRmRNA表达的发育性变化模式基本相似，品种间差异较小；肝脏GHR基因在绵羊生长发育的调控中可能起着重要作用。

绵羊肌肉生长激素受体基因表达的发育性变化研究

[目的]探讨绵羊肌肉生长激素受体基因（GHR）在生长发育早期的表达。[方法]用real time PCR法对不同日龄雄性哈萨克羊和新疆细毛羊背最长肌GHRmRNA的表达进行定量分析。[结果]绵羊背最长肌GHRmRNA的表达随着日龄的增加先升后降,然后趋于水平,30日龄时最高。哈萨克羊的表达量在2~90日龄期间都极显著低于新疆细毛羊（P〈0.01）。[结论]日龄和品种对绵羊肌肉GHR基因表达均有较大影响。

反刍动物生长激素受体基因的研究进展

生长激素受体(growth hormone receptor,GHR)基因是家畜生产力的重要候选基因,并成为提高反刍动物奶肉产量等研究的焦点。近年来,有关牛羊GHR基因的研究不断增加,该领域的深入探讨可能产生家畜育种和生产中候选基因研究的突破性进展,而且有助于标记辅助选择的实施.本文主要就牛羊GHR的结构和功能区域的分析,及其基因的结构和表达调控,多态性与生产性能的相关研究等方面进行了综述和讨论。

生长激素受体基因的研究进展

生长激素受体(GHR)是调控动物生长发育的关键基因之一。近年来,将GHR基因作为家畜生产力的候选基因来探讨提高动物奶肉产量等方面的报道不断增加,已逐渐成为研究热点。该领域的深入探讨可能产生家畜育种和生产中候选基因研究的突破性进展,而且有助于标记辅助选择的实施。文章主要从GHR基因的结构、信号传导途径、GHR表达的组织特异性、GHR多态性与生产性能的关系以及GHR表达的发育性变化等方面进行了综述。

特发性矮小生长激素受体基因与生长激素结合蛋白的研究进展

生长激素（GH）是促进生长发育的重要因子之一。它首先需要与靶细胞表面生长激素受体（GHR）结合，GHR基因突变导致的GHR结构与功能异常都会抑制GH发挥正常生理作用，最终影响成人身高。近年来关于GHR基因单核苷酸多态性（SNP）与特发性矮小（ISS）遗传易感性关系的研究越来越多．并发现了一些与ISS相关的SNP位点。

鸽生长激素受体基因多态性与生长性状及体组成的相关分析

根据鸽生长激素受体(GHR)基因CDS序列设计引物进行PCR扩增,克隆了鸽GHR基因内含子9序列,通过Gen-Bank中Blastn比对表明,与鸡内含子9(AF372659)同源性为70.01%。利用PCR-SSCP技术和DNA测序方法检测GHR基因内含子9、外显子10和3’-UTR的单核苷酸多态性。本试验共检测出3个多态位点,经最小二乘法分析,多态位点与两群体鸽生长性状及体组成均不相关。

宁夏肉牛杂交改良群体生长激素受体基因的多态性研究

试验通过对宁夏六盘山区肉牛杂交改良群体生长激素受体(growth hormone receptor,GHR)基因的多态性研究,为宁夏肉牛杂交改良选育提供理论基础。采用PCR-RFLP对该群体70个个体GHR基因多态性进行检测,结果扩增出338 bp的目的片段,PCR产物被限制性内切酶AluⅠ消化后表现出多态性,共检测到2种基因型:AA、AB,其中A为优势等位基因,AA基因型为优势基因型。

牛生长激素受体基因多态性及其研究进展

生长激素受体基因是重要的家畜生产性状候选基因,它的突变可能导致生长激素受体结构及功能的改变,从而影响到信号的转导以及生长激素的生理作用。介绍了牛生长激素受体基因的多态性及其与生产性能相关性的国内外研究进展。

禽类生长激素受体基因研究进展

生长激素受体(GHR)是促乳素、生长激素、细胞因子、促红细胞生成素受体超家族成员之一,它与生长激素(GH)结合可对禽类生长发育起到调节作用。目前有关禽类GHR的研究多集中在正常鸡和矮小禽类之间GHR的变异上。本文就鸡GHR基因结构与表达、多态性与生产性能的相关等研究进行了综述和讨论。

骨性下颌前突与生长激素受体基因单核苷酸多态性的研究进展

下颌前突为表现的非综合征型骨性Ⅲ类错[牙合]畸形是遗传和环境相互作用导致的一种颌面部发育畸形,严重者需要通过正颌手术来改善面型,获得正常咬合。最近的研究指出了可能与该疾病相关的易感染色体区域和候选基因。其中,生长激素受体基因的单核苷酸多态性与骨性下颌前突的发生密切相关。本文综合了对非综合症型骨性Ⅲ类错[牙合]畸形的当前认识,包括病因、遗传模式、易感染色体区域及候选基因,并对骨性下颌前突相关的生长激素受体基因单核苷酸多态性位点作出了概述。

特发性矮小患儿生长激素受体基因外显子10单核苷酸多态性研究

目的研究特发性矮小(ISS)患儿生长激素受体(GHR)基因外显子10的单核苷酸多态性(SNPs),探讨GHR基因外显子10 SNPs与ISS的相关性。方法 2008年9月-2009年7月在苏州大学附属儿童医院就诊的ISS患儿30例为ISS组,健康体检的儿童30例为健康对照组。抽取空腹静脉血2 mL,提取基因组DNA,应用PCR扩增GHR基因外显子10的序列,PCR产物经纯化后进行DNA测序,将测得序列与美国国立生物技术信息中心公布的基因序列对比,采用SAS8.0统计软件对ISS组与健康对照组基因型频率及等位基因频率进行χ2检验。结果 GHR基因外显子10有2个SNP位点,分别为685位点和790位点。第685位碱基A→C杂合突变,造成第526号氨基酸由组氨酸转变为脯氨酸,即I526L。该位点上存在3种基因型(AA、CA、CC),其基因型频率及等位基因频率在2组间比较差异均无统计学意义(Pa>0.05)。第790位碱基C→A杂合突变,造成第561号氨基酸由丙氨酸转变为天冬氨酸,即P561T。该位点存在2种基因型(CC、CA),其基因型频率及等位基因频率在2组间比较差异均无统计学意义(Pa>0.05)。结论 GHR基因外显子10的685位点和790位点SNPs均与ISS的发病无关。