生长激素释放肽及其受体的异常表达在肿瘤诊治中的应用

生长激素释放肽(ghrelin)是一种胃源性肽,也被称为饥饿素,可刺激垂体释放生长激素,是一种调节能量代谢的关键多肽,以酰基化生长激素释放肽与无活性的非酰基化生长激素释放肽两种形式存在。酰基化的生长激素释放肽与生长激素促分泌素受体结合,介导多种生理功能。除了刺激食欲增加食物摄入的作用外,生长激素释放肽还可以保护心脏功能,防止肌肉萎缩,增加骨密度,调节应激与焦虑,抑制炎性细胞因子产生,生长激素释放肽及其受体成为多种疾病的潜在治疗靶点。近年来,越来越多的研究证明生长激素释放肽及生长激素促分泌素受体在多种肿瘤中异常表达,对肿瘤细胞的增殖、凋亡、自噬等功能产生直接作用;也可通过调节炎症反应、雌激素产生和代谢的间接作用,与肿瘤的发生与发展密切相关。生长激素释放肽及其受体异常表达可作为多种肿瘤诊断、疗效预测和预后评估的标志物。靶向生长激素释放肽药物也逐渐被研发,并在抗肿瘤和肿瘤患者支持治疗的临床前研究和临床试验中显示了良好疗效。本文将讨论生长激素释放肽及受体在肿瘤发生发展中的作用及其作为肿瘤标志物与治疗靶点的潜力,并对其相关药物在肿瘤患者中的应用进行综述。

手足口病患儿胃生长激素释放素水平与TLR4信号通路的相关性研究

目的 分析手足口病患儿胃生长激素释放素水平与Toll样受体(TLR)4信号通路的相关性,并探讨胃生长激素释放素在手足口病炎症免疫反应中的作用机制。方法 回顾性分析100例手足口病患儿的临床资料,根据病情将其分为轻症组(n=65)和重症组(n=35),另选择100例健康儿童作为对照组(n=100)。比较三组胃生长激素释放素水平、TLR4阳性表达率和平均荧光强度(MFI),应用线性相关分析探究胃生长激素释放素水平与TLR4阳性表达率、MFI的相关性。结果 三组胃生长激素释放素水平、TLR4阳性表达率和MFI差异均有统计学意义(均P<0.05)。在胃生长激素释放素水平方面,对照组>轻症组>重症组;在TLR4阳性表达率和MFI方面,重症组>轻症组>对照组(均P<0.05)。线性相关分析结果显示,手足口病患儿胃生长激素释放素水平与TLR4阳性表达率(r=-0.729)、MFI(r=-0.697)均呈负相关(均P<0.05)。结论 手足口病患儿的胃生长激素释放素水平下降,TLR4阳性表达率和MFI升高,且胃生长激素释放素水平与TLR4阳性表达率、MFI均呈负相关。胃生长激素释放素可能在手足口病的发病机制炎症免疫反应中起到保护作用,具有抑制TLR4信号通路的作用。

功能性腹泻脾虚证模型大鼠结肠生长激素促释放激素受体表达的变化

目的:观察功能性腹泻脾虚证模型大鼠结肠组织生长激素促释放激素受体(GHSR)表达的变化,探讨发病机制。方法:高乳糖饲料喂养及小平台站立制备功能性腹泻脾虚证大鼠模型,观察大鼠的一般状态变化及粪便情况。免疫组织化学法,蛋白质印迹(Western blotting)和荧光定量PCR(Real-time PCR)检测大鼠结肠组织生长激素促释放激素受体的表达情况。结果:功能性腹泻脾虚的模型大鼠出现精神乏力、消瘦及便溏等现象;免疫组织化学结果显示模型组生长激素促释放激素受体的蛋白表达较正常组表达降低;蛋白质印迹结果显示模型组生长激素促释放激素受体的蛋白表达较正常组表达有差异且有统计学意义(P<0.01);荧光定量PCR结果显示模型组生长激素促释放激素受体mRNA的表达较正常组表达有差异且有统计学意义(P<0.01)。结论:成功构建功能性腹泻脾虚证大鼠模型。功能性腹泻脾虚证大鼠结肠组织生长激素促释放激素受体表达下降。推断生长激素促释放激素受体可能与功能性腹泻脾虚证有相关性。

血清促生长激素释放激素受体配体与多囊卵巢综合征的相关性分析

目的:探讨血清促生长激素释放激素受体配体(Ghrelin)水平在多囊卵巢综合征(PCOS)中的意义。方法:选择我院PCOS患者48例作为研究对象(PCOS组),同期选择非PCOS患者40例作为对照(对照组),根据体重指数(IBM)将PCOS组、对照组患者分别分为肥胖与非肥胖,根据稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)将PCOS组及全部患者分为胰岛素抵抗(IR)与非IR。测定血清Ghrelin水平及内分泌代谢指标。结果:血清Ghrelin水平PCOS组低于对照组(P<0.05);肥胖组低于非肥胖组(P<0.05);非肥胖组低于非肥胖对照组(P<0.05);IR组低于非IR组(P<0.05)。血清Ghrelin水平与BMI、空腹胰岛素(FINS)、HOMA-IR呈负相关(P<0.01,P<0.05,P<0.05),与胰岛素敏感指数(ISI)呈正相关(P<0.O5)。结论:PCOS患者存在血清低Ghrelin水平,Ghrelin水平与BMI、IR程度呈负相关。Ghrelin可能与PCOS的肥胖发生有相关性。血清Ghrelin检测可能作为预测PCOS患者IR的一个指标。

生长激素促释放剂受体配体的研究进展

生长激素促释放剂是一种合成的小分子化合物,它通过生长激素促释放剂受体而起作用,该受体是一种新的G蛋白偶联受体。以前曾认为生长激素促释放剂受体是一种孤儿受体,直到近年来从人和鼠的胃中鉴定到Ghrelin的存在,而改变了这种看法。Ghrelin是包含28个氨基酸残基的肽,在3号位的丝氨酸位点有辛酰化基团。该肽是在X/A样细胞分泌颗粒中发现的,Ghrelin的发现表明促垂体分泌生长激素可能不止受到来自下丘脑的生长激素释放激素的调节,同时还可能受到来自胃和下丘脑的Ghrelin的调节。

血清促生长激素释放激素受体配体(Ghrelin)水平与多囊卵巢综合征的相关性分析

目的通过检测PCOS患者血清Ghrelin水平,分析血清Ghrelin水平与人体测量学,内分泌激素,及胰岛素抵抗指标等指标的相关性,同时探讨PCOS患者测定血清Ghrelin水平的意义。方法选择97例PCOS患者,120名健康女性为对照组,测定血清Ghrelin水平、内分泌激素、血糖、血脂、胰岛素、身高、体重、腰臀围,采用统计学软件比较2组的差异。结果 PCOS组与对照组比较,PCOS组血清Ghreli水平低于正常对照组(P=0.039),有统计学差别,FSH、PRL、E2、FBG、CHO、TG、LDL等无统计学意义。但PCOS组WHR、LH和T水平明显高于对照组(P<0.01,P<0.01,P<0.01),BMI、HOMA-IR也高于对照组(P<0.05,P<0.05,P<0.05)。PCOS肥胖组Ghrelin水平低于PCOS非肥胖组(P<0.05);对照肥胖组低于对照非肥胖组(P<0.05)。而PCOS组中IR组血清Ghrelin水平低于非IR组(P<0.05),对照组中IR组血清Ghrelin水平显著低于IR组(P<0.01)。结论 PCOSPCOS患者血清Ghrelin水平较低,且Chrelin水平与胰岛素抵抗程度呈负相关,与脂代谢水平和性激素无相关性。

人生长激素释放激素变异受体1型基因绿色荧光蛋白真核表达载体1的构建及体外表达

目的构建人生长激素释放激素变异受体1型(GHRHR-SVT1)基因绿色荧光蛋白真核表达载体1(pEG-FP-N1)并在鼠成纤维细胞株NIH-3T3细胞中的表达。方法GHRHR-SVT1基因是由人胃癌细胞株AGS中扩增出的DNA片段,克隆入真核表达载体pEGFP-N1中,用高效转染试剂将pEGFP-N1/GHRHR-SVT1转染NIH-3T3细胞,NIH-3T3细胞分3组:非转染组(对照组),只加转染试剂不加质粒;转染空质粒组(pEGFP-N1组),加转染试剂与空质粒;重组质粒转染组(pEGFP-N1/GHRHR-SVT1组),加转染试剂与重组质粒。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法和流式细胞仪检测各组转染后各组NIH-3T3细胞的生长情况。结果(1)pGEFP-N1/GHRHR-SVT1经限制性内切酶XhoⅠ和Bam HⅠ双酶切产生约1 080 bp和4 700 bp 2条带。(2)构建的GHRHR-SVT1cDNA序列与GHRHR-SVT1原始序列(AF-282259)进行对比,第54位碱基突变(A突变为T),为无义突变。(3)重组质粒转染组NIH-3T3细胞增殖率明显高于对照组(P<0.01)。(4)重组质粒转染组NIH-3T3细胞增殖指数明显高于对照组(P<0.01)。结论在适当浓度GHRH(10μmol/L)的培养基中,GHRHR-SVT1能够促进NIH-3T3细胞增殖,并为肿瘤的治疗提供新的思路。

人生长激素释放激素受体剪接变异体1型对人肝癌细胞HepG2增殖的影响

目的:探讨人生长激素释放激素受体剪接变异体1型(GHRHR SV1)对肝癌细胞系HepG2增殖的影响,阐明GHRHR SV1对人肿瘤细胞的促增殖作用。方法:将GHRHR SV1真核表达载体导入HepG2细胞建立HepG2-SV1细胞系。设计对照组(野生型HepG2)、空载质粒组(HepG2-pCDNA 3.0细胞系)和干扰组(HepG2-SV1细胞系)。采用PCR和Western blotting法鉴定HepG2-SV1细胞系,CCK-8法检测各组细胞的增殖率,克隆形成实验检测各组细胞的单克隆形成率,细胞划痕实验检测细胞的迁移率。结果:PCR与Western blotting法检测,构建的HepG2-SV1细胞系能稳定表达GHRHR SV1;CCK-8法检测,干扰组HepG2-SV1细胞系的增殖率高于空载质粒组HepG2-pcDNA3.0细胞系(P<0.05);克隆形成实验,干扰组HepG2-SV1细胞系的单克隆形成率约为空载质粒组HepG2-pcDNA3.0细胞系的3.5倍(P<0.05);细胞划痕实验,所构建的干扰组HepG2-SV1细胞系的迁移率高于空载质粒组HepG2-pcDNA3.0细胞系(P<0.05)。结论:GHRHR SV1能促进HepG2细胞的增殖。

五指山小型猪生长激素释放激素受体基因的cDNA克隆及序列分析

[目的]克隆五指山小型猪生长激素释放激素(GHRH)受体基因的cDNA,并对其进行序列分析。[方法]以五指山小型猪耳组织提取的基因组RNA为模板,根据已报道的猪GHRHR cDNA序列设计3对引物,用RT-PCR方法进行cDNA扩增。PCR产物经回收纯化后,与pMD18-T连接并转化大肠杆菌DH5α,转化产物经PCR和双酶切鉴定后筛选出阳性克隆,阳性克隆经LB液体培养基培养鉴定后测序。[结果]成功获得了五指山小型猪GHRH受体基因的cDNA,该片段长1 577 bp,编码423个氨基酸。BLAST分析结果表明,该片段与猪GHRH受体基因仅有23个碱基的差异,同源性为98%;而两者GHRH受体基因均由423个氨基酸组成,序列同源性为96%。[结论]该研究为进一步揭示五指山小型猪的矮小机理提供了理论依据。

鱼类生长激素释放肽及其受体的研究进展

生长激素释放肽(Ghrelin)是生长激素促分泌素受体(Growth hormone secretagogue receptor,GHSR)的一种内源性配体,主要在胃肠道内产生。目前不少鱼类的Ghrelin基因和氨基酸序列已经确定。鱼类Ghrelin能促进生长激素(GH)、促黄体释放激素(LH)的分泌,并参与摄食调节,表明Ghrelin是一种具有多种生理活性的多肽。综述了鱼类Ghrelin及其受体的结构和分布,并对其调控机理进行了简要介绍,最后论述了Ghrelin在鱼类中的生理功能,旨在为Ghrelin在鱼类营养生理学及内分泌生理学中的研究提供参考。

生长激素释放多肽通过与生长激素释放因子不同的受体起作用

用固相法合成了生长激素释放因子(GRF),生长激素释放多肤(GHRP)和生长激素释放抑制因子(GRF-AN,D-Arg2-GRF44),并检测了多肽的生物学活性。结果表明1.GRF和GHRP在体内外均可刺激人垂体生长激素(GH)分泌。2.GRF和GHRP体外灌流时均可刺激牛垂体GH分泌。3.GHRP可促进大鼠生长发育。4.GRF-AN可抑制由GRF兴奋的人和动物垂体GH释放,但有较强的选择性,GRF-AN不抑制由GHRP兴奋的GH释放。表明,GRF和GHRP均可兴奋垂体GH分泌,但二者的机制有本质上的区别。

生长激素释放激素受体拮抗剂对翼状胬肉上皮细胞生长的影响及机制

目的探讨生长激素释放激素受体(GHRH-R)拮抗剂对人翼状胬肉上皮细胞生长的影响及机制。方法采用原发性翼状胬肉患者术中所取的翼状胬肉头部进行组织块培养,模拟翼状胬肉生长模型,根据翼状胬肉组织的透明度和血管化程度分为静止期翼状胬肉组(8例)和活动期翼状胬肉组(16例),并选取正常结膜上皮组织(6例)作为正常结膜组。此外,采用10μmol·L^(-1)GHRH-R拮抗剂MIA602作用于8例活动期翼状胬肉组的胬肉组织作为MIA602干预组。记录各组翼状胬肉上皮细胞的生长距离,并采用免疫印迹实验和免疫荧光染色检测各组GHRH-R、p-ERK1/2和Caspase-3的相对表达量。结果与正常结膜组和静止期翼状胬肉组相比,活动期翼状胬肉组翼状胬肉上皮细胞的生长速度明显加快,并且GHRH-R和p-ERK1/2表达均显著增高,Caspase-3表达明显降低(均为P<0.05)。与活动期翼状胬肉组相比,MIA-602干预组翼状胬肉上皮细胞生长速度明显变慢,GHRH-R和p-ERK1/2蛋白表达均显著降低,Caspase-3的表达显著升高(均为P<0.05)。结论阻断GHRH-R能够有效地抑制翼状胬肉的生长并促使翼状胬肉上皮细胞凋亡,其机制可能与降低细胞增殖能力和促进细胞凋亡有关。

生长激素释放激素受体激动剂MR409对db/db小鼠糖尿病肾病作用的研究

目的:探讨人工合成的生长激素释放激素受体激动剂MR409对db/db小鼠糖尿病肾病和肾脏纤维化的影响。方法:将db/db小鼠随机分为模型组和MR409治疗组,野生型小鼠为对照组,每组10只。MR409治疗组小鼠隔天皮下给予MR409(每只15µg),对照组和模型组小鼠隔天皮下给予等量溶剂对照,干预8周。取第8周末小鼠血清和尿液进行生化指标检测,HE、PAS、Masson和天狼星红染色用于评价肾损伤和肾纤维化程度,二氢乙啶(DHE)荧光染色检测评价肾脏中活性氧的含量,Western blot检测肾脏纤维化以及氧化应激相关蛋白的表达。结果:与db/db小鼠相比,MR409治疗可显著降低db/db小鼠尿蛋白/肌酐比、血清中胆固醇和甘油三脂含量以及肾间质纤维化和肾小球硬化面积(P<0.05),MR409还可显著降低肾脏中活性氧水平及NADPH氧化酶亚基p22phox和gp91phox、纤连蛋白(FN)和转化生长因子β1(TGFβ1)蛋白的表达量(P<0.05)。结论:生长激素释放激素受体激动剂MR409能有效减轻db/db小鼠糖尿病肾损伤,其机制可能与降低氧化应激和肾纤维化有关。

生长激素释放激素在垂体生长激素瘤中的作用

目的探索Gsα和生长激素释放激素受体(GHRHR)基因突变和生长激素释放激素(GHRH)在生长激素瘤形成中的作用。方法对26例垂体生长激素瘤标本用ABC免疫组化法观察GHRH及其受体在垂体生长激素瘤细胞中的表达,提取组织DNA行PCR扩增并进行测序研究Gsα和GHRHR基因突变。结果免疫组化显示GHRH阳性率为15.4%,GHRHR阳性率为30.8%。2例Gsα突变在第201位,1例在第210位,总突变发生率为11.5%;2例GHRHR基因突变在第225位。结论Gsα突变是生长激素瘤发生的重要原因,GHRH在垂体瘤中阳性表达提示部分生长激素瘤可能分泌GHRH,并通过自分泌或旁分泌作用于瘤细胞,导致肿瘤的发生。

生长激素释放因子肝脏定向表达复合物在家兔体内的表达

外源基因在体内的转染及表达存在转染效率低、表达时间短等缺点 ,利用受体介导基因转移技术 ,可以将基因定向转入到特定组织 ,并且能提高转染效率和表达时间。在本试验中 ,利用肝脏去唾液酸糖蛋白受体 (ASGR)将生长激素释放因子 (GRF)基因定向转入到家兔肝脏组织并得到了表达。首先通过 DNA阻滞试验确定质粒 DNA与多聚赖氨酸 (poly- L- lysine,PL L)的结合比例及反应液的最佳 Na Cl浓度 ,然后将 PL L 与 α- D-吡喃半乳糖苯基异硫氰酸盐 (α-D- galactopyranosylphenyl isothiocyanate) (物质的量之比为 8∶ 1)在 p H9.0的 Na2 CO3溶液中进行糖基化反应 ,得到糖基化的 PL L(gal PL L)后透析除去未反应的糖并测定反应物糖含量。将糖基化的 PL L 与克隆有 GRF基因的 pc D-NA3- GRF质粒 (质量比为 3.16∶ 1)在 1.0 31m ol/ L的 Na Cl溶液中进行连接 ,最终得到 DNA- gal PL L复合物 ,电镜观察其结构。耳缘静脉注射质粒复合物到家兔体内 (1.5 mg/只 ) ,用 RT- PCR和 EL ISA检测不同组织的表达情况。结果注射后 7d家兔的肝脏 RT- PCR结果呈阳性 ,2 7d仍能检测到 GRF蛋白 ,但同时在其他的组织也检测到表达。并且进行了增重试验 ,发现定向转移

Ghrelin:一种新发现的生长激素释放肽

Ghrelin是一种新发现的含有28个氨基酸的生长激素释放肽,为生长激素促分泌素受体(growthhormonesecretagoguereceptor,GHSR)的内源性配体。当Ghrelin与其特异性受体(GHSR)结合后会产生一系列生物学效应。Ghrelin具有刺激垂体前叶释放生长激素、增加食欲、调节能量代谢平衡,以及促进胃酸分泌等生物学功能,其作用机制目前尚不清楚。

生长抑素/生长激素释放激素-生长激素-胰岛素样生长因子-1轴与营养

介绍近几年来生长抑素／生长激素释放激素-生长激素-胰岛素样生长因子轴营养调节的研究进展，包括营养不良时生长激素，胰岛素样生长因子-1的变化，生长激素抵抗，生长激素受体与受体后缺陷，生长激素受体后缺陷的分子机制及胰岛素样生长因子-1的清除与降解。简单阐述了生长激素，胰岛素样生长因子-1对分解代谢，神经肌肉疾病，骨质疏松，肾功能不全，肥胖，老年人营养不良，生长激素缺乏及生长激素受体或受体后缺陷综合征的影响及治疗意义。

生长激素释放肽(ghrelin)促生长作用和应用前景

生长激素释放肽(ghrelin)是在大鼠和人胃内发现的,是一种生长激素促分泌素受体(growth hormone secretagogue receptor,GHSR)的内源性配体。ghrelin与位于垂体、下丘脑的GHSR结合后,具有促进生长激素释放、增加食欲、调节消化系统功能和能量代谢等作用。本文对ghrelin的结构、分布、生物学功能的近期研究成果及畜牧业上的应用前景进行综述,以期为相关添加剂的研究和开发提供依据。

生长激素释放肽在动物科学中的研究进展

生长激素释放肽(GHRPs)是一类人工合成的促生长激素分泌素(GHS),在动物体内具有促进GH释放、刺激动物食欲、促进动物生长、提高动物生产性能和免疫水平等多方面的功能。其作用机制不同于生长激素释放激素(GHRH)。此外,GHRPs和GHRH还具有协同作用。

生长激素释放抑制因子受体亚型2和4在前列腺增生和前列腺癌中的表达

在前列腺组织中,生长激素释放抑制因子受体亚型的表达,目前认识一个有争议的问题,相关报导互有矛盾之处。作者设计使用原位杂交方法,定位前列腺组织中生长激素释放抑制因子受体亚型2(SSTR2)和4(SSTR4)