人参皂苷Rg3通过TGF-β1/ERK信号通路调控原位荷瘤人肺癌裸鼠的淋巴管生成的机制

目的 探究人参皂苷Rg3(GS-Rg3)通过转化生长因子-β1(TGF-β1)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路调控原位荷瘤人肺癌裸鼠淋巴管生成的机制。方法 60只裸鼠随机分为3组,即模型组、GS-Rg3组和ERK抑制剂(SCH772984)组。GS-Rg3组和SCH772984组建立人肺癌裸鼠原位移植模型,GS-Rg3组小鼠使用GSRg3灌胃,SCH772984组小鼠腹腔注射ERK抑制剂SCH772984。观察各组小鼠建模和淋巴转移情况。并分析各组肿瘤组织中淋巴管生成情况、TGF-β1/ERK信号通路以及血管内皮生长因子(VEGF)表达情况。结果 HE染色病理学检查证实肺癌以及肺癌淋巴转移。GS-Rg3组和SCH772984组小鼠出现淋巴转移的比例、肿瘤体积和肿瘤质量均显著低于模型组,GS-Rg3组和SCH772984组无显著差异。使用podoplanin蛋白标记淋巴管,GS-Rg3组和SCH772984组podoplanin蛋白表达水平和淋巴管相对密度显著低于模型组,GS-Rg3组和SCH772984组无显著差异。GS-Rg3和SCH772984可以显著抑制TGF-β1/ERK通路的激活。GS-Rg3组和SCH772984组的VEGF-C、VEGF-3表达水平较模型组低,GS-Rg3组和SCH772984组无显著差异。结论 GS-Rg3可以通过下调TGF-β1/ERK信号通路的转导水平抑制VEGF-C、VEGF-3蛋白的表达,从而抑制淋巴管的生成降低肺癌的淋巴转移率,其作用水平与SCH772984相似。

熊果酸对子宫内膜异位症模型大鼠内膜血管生成及ERK-VEGF/MMP-9通路的影响

目的:探讨熊果酸对子宫内膜异位症模型大鼠内膜血管生成及细胞外调节蛋白激酶(ERK)-血管内皮生长因子(VEGF)/基质金属蛋白酶9(MMP-9)通路的影响。方法:建立子宫内膜异位症大鼠模型,随机分为模型组、熊果酸低(100 mg·kg^-1)、中(250 mg·kg^-1)、高(500 mg·kg^-1)剂量组、孕三烯酮(60 mg·kg^-1)组,每组12只,另取12只设为假手术组。造模后以熊果酸及孕三烯酮灌胃治疗,1次/d,持续给药7 d。给药结束24 h后处死大鼠,观察药物对大鼠异位子宫内膜体积生长的抑制作用;采用免疫组织化学染色检测各组大鼠异位子宫内膜组织中CD31表达情况;采用免疫酶联吸附实验(ELISA)检测大鼠血清中VEGF和MMP-9水平;采用实时荧光定量(qRT-PCR)检测大鼠异位子宫内膜组织中VEGF、MMP-9 mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠异位子宫内膜组织中ERK、磷酸化ERK(p-ERK)、VEGF、MMP-9蛋白表达水平。结果:与假手术组相比,模型组大鼠CD31阳性细胞表达、血清中VEGF及MMP-9水平、异位子宫内膜组织中VEGF及MMP-9mRNA水平、异位子宫内膜组织中p-ERK/ERK、VEGF及MMP-9蛋白表达均显著升高(P<0.05);与模型组相比,熊果酸组大鼠CD31阳性细胞表达、血清中VEGF及MMP-9水平、异位子宫内膜组织中VEGF及MMP-9 mRNA水平、异位子宫内膜组织中p-ERK/ERK、VEGF及MMP-9蛋白表达均显著降低(P<0.05),异位子宫内膜生长抑制率升高(P<0.05)且熊果酸各剂量组之间呈剂量依赖性;熊果酸高剂量组和孕三烯酮组相比,差异无统计学意义(P>0.05);ERK蛋白表达各组之间无明显变化(P>0.05)。结论:熊果酸可抑制子宫内膜异位症模型大鼠内膜血管生成,可能是通过下调ERK-VEGF/MMP-9通路来实现。

HPK1 GROβ及THRSP蛋白在乳腺癌患者中的表达及与预后的相关性分析

目的 分析造血祖细胞激酶1(HPK1)、生长调节蛋白-β(GROβ)及THRSP蛋白在乳腺癌患者中的表达及与预后的相关性。方法 选取2016年1月—2019年12月温州市中医院收治的乳腺癌患者100例,取所有患者手术切除的癌组织及癌旁组织标本,采用免疫组化染色法检测GROβ水平,Western blot法检测HPK1、THRSP表达量。结果 癌旁组织中HPK1、GROβ及THRSP蛋白表达量分别为(1.62±0.35)、(47.23±6.56)pg/ml、(1.13±0.16);癌组织中HPK1、GROβ及THRSP蛋白表达量分别为(1.16±0.19)、(116.35±25.59)pg/ml、(1.57±0.31)。与癌旁组织相比,癌组织中HPK1表达量较低,GROβ、 THRSP蛋白表达量较高(均P<0.05)。淋巴结转移、Ⅲ期、Ⅳ期、低分化患者中HPK1表达量较低,GROβ、 THRSP蛋白表达量较高(均P<0.05)。乳腺癌癌组织中HPK1与GROβ表达量呈负相关(r=-0.292,P<0.05),GROβ与THRSP表达量呈正相关(r=0.277,P<0.05),HPK1与THRSP表达量呈负相关(r=-0.348,P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示:HPK1、 GROβ、 THRSP蛋白是乳腺癌患者预后的危险因素(均P<0.05)。结论 HPK1、GROβ及THRSP蛋白在乳腺癌组织中表达异常,与TNM分期、分化程度、有无淋巴结转移相关,三者表达和乳腺癌患者预后有一定相关性。

GROβ在乳腺癌中的表达差异及其与乳腺癌的关系

目的探讨生长调节蛋白-β(GROβ)在乳腺癌患者血清、组织中的表达差异及其与乳腺癌的关系。方法采集2017年1月-2018年12月在兰州大学第一医院就诊的48例乳腺癌患者(乳腺癌组)、25例健康对照者(正常组)的外周血清标本及乳腺癌组织标本,采用ELISA方法分析2组患者外周血清中GROβ的质量浓度,免疫组化法检测乳腺癌组织及癌旁组织GROβ的表达。结果乳腺癌患者的血清GROβ质量浓度明显高于健康对照者,且具有显著差异(P<0.05);血清GROβ水平与乳腺癌肿瘤TNM分期相关(P<0.05),不同分期患者间血清GROβ质量浓度差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组化结果表明,Ⅳ期患者肿瘤组织中GROβ高表达比例显著升高,与低表达或无表达具有显著差异,且血清GROβ水平及组织中GROβ表达与ER阴性、PR阴性相关。结论血清GROβ水平对辅助诊断乳腺癌具有一定的临床意义,可用于临床检测乳腺癌。