转化生长因子-β_3对肝纤维化的影响

肝纤维化是各种慢性肝损伤常见和共同的病理转归．是细胞外基质（extracellularmatrix．ECM）各成分合成与降解的失衡而致纤维组织在肝内过量沉积的结果，属可逆性病变。若进一步发展则致不可逆的肝小叶结构改建、假小叶和结节形成（肝硬化阶段）。

转化生长因子-β_3在子宫肌瘤组织中的表达和消癥煎膏的干预作用

目的研究消癥煎膏对大鼠子宫肌瘤以及子宫肌瘤中TGF-β3的影响。方法造模大鼠60只,随机分成5组,每组12只:实验组消癥煎膏分高、中、低3个剂量组,直肠给药;中桂组,予桂枝茯苓胶囊溶液灌服,每次0.5 m l/kg;模型组。另设空白组12只,每天灌服0.9%生理盐水,0.5 m l/kg/次,以上各组均给药3次/d,共4周。停药后第1天内处死大鼠,立即取标本实验研究。结果治疗组大鼠子宫重量明显减轻,宫颈和宫体处最大直径显著缩小,与模型组比治疗组子宫系数降低明显;实验组3个剂量的TGF-β3水平与模型组比较P<0.05,有显著意义;中桂组与模型组比较,P<0.05;模型组与空白组比较,P<0.01,有非常显著意义。结论消癥煎膏能使子宫肌瘤缩小,明显降低TGF-β3表达,抑制子宫肌瘤细胞增殖,使肌瘤缩小,因此推测其内可能含有TGF-β抗体类物质在起作用。

构建具有靶向治疗作用的工程化生长转化因子-β3蛋白的实验研究

目的构建前体相关蛋白（LAP）为潜伏作用，基质蛋白金属酶（MMP）酶切位点为导向作用，生长转化因子-β3（TGF-β3）活性部分为治疗作用的具有靶向治疗作用的工程化TGF-β3蛋白，并检验其特异性的靶向治疗作用。方法将人工合成的编码MMP酶切位点氨基酸的正、反义DNA序列经基因重组定向克隆插入真核表达载体pIRES-EGFP中，获得pIRES—EGFP—MMP重组体，用PCR从大鼠胚胎组织中TGF-β3的LAP段和TGF-β3的活性部分mTGF-β3，分别插入pIRES-EGFP-MMP中MMP的上游和下游，获得pIRES-EGFP-LAP-MMP-mTGF-β3重组体。然后将其转染入CHO细胞，最后用Westen Blot检测不同环境下细胞上清液中TGF-β3蛋白的表达。结果经过测序和酶切鉴定，确认成功构建了pIRES—EGFP—LAP—MMP-mTGF-β3质粒，转染CHO细胞后也成功表达了工程化TGF-β3蛋白，而且这种蛋白只在有MMP存在的条件下才能特异性地释放出有活性的mTGF-β3。结论通过基因工程技术，可成功构建工程化TGF-β3蛋白真核表达载体，其蛋白产物具有特异性的靶向治疗功能。

转化生长因子-β_3对增生性瘢痕成纤维细胞的生物学作用(英文)

背景:哺乳类动物有3种TGF-β异构体即TGF-β1,β2,β3,这3种异构体各自具有独特而不同的生物学作用,TGF-β1是明显的促瘢痕形成因子,而TGF-β3可减少TGF-β1,β2的产生,从而减少细胞外基质(ECM)合成,因此,TGF-β3有可能是人体内天然的抗瘢痕形成因子。目的:通过外源性TGF-β3对增生性瘢痕成纤维细胞(HSFB)生长增殖及Ⅰ,Ⅲ型胶原及TGF-β1蛋白表达的影响,了解其生物学行为,为临床治疗提供理论依据。设计:随机对照实验研究。地点和对象:汕头大学医学院第二附属医院整形烧伤外科完成,对象为新鲜无菌增生性瘢痕组织,来源于本科收治及门诊手术的增生性瘢痕患者6例,男3例,女3例;年龄5～45岁。干预:6例增生性瘢痕成纤维细胞体外培养,分为4组,实验组又分为5,10,50mg/L组分别加TGF-β35,10,及50mg/L,对照组加入FBM1.5mL,采用MTT比色法测定TGF-β3对HSFB增殖活性的影响,3H-脯氨酸掺入法测定其胶原合成,免疫组化检测Ⅰ,Ⅲ型胶原及TGF-β1蛋白表达情况。主要观察指标:TGF-β3对HSFB体外增殖,HSFBⅠ,Ⅲ型胶原及TGF-β1蛋白表达的影响,TGF-β3作用后HSFB胶原合成情况。结果:转化生长因子β3可抑制HSFB细胞增殖,作用120h后实验组细胞密度分别为(6.34±0.51),(6.01±0.38),(5.24±0.65)×105/瓶,明显低于对照组(10.

重组转化生长因子-β_3基因对大鼠肝星状细胞内、外蛋白表达的影响

目的探讨重组转化生长因子-β3(TGF-β3)基因对大鼠肝星状细胞(HSC)内、外蛋白合成及分泌的影响。方法构建质粒pcDNA3.1(+)-TGF-β3和pcDNA3.1(+)-TGF-β1。稳定转染:通过脂质体介导的方法,将pcDNA3.1(+)-TGF-β1转染HSC-T6,经G418筛选建立稳定高表达pcDNA3.1(+)-TGF-β1的HSC-T6细胞阳性克隆。再将pcDNA3.1(+)-TGF-β3转染HSC-T6克隆细胞,用W estern b lot法和酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测细胞内外TGF-β1、Ⅰ型胶原、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9及金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)-1的蛋白表达量。结果pcDNA3.1(+)-TGF-β3转染HSC-T6阳性细胞克隆后,与单纯阳性克隆组相比,TGF-β1、Ⅰ型胶原、TIMP-1细胞内蛋白表达及培养上清中的分泌水平均明显降低(P<0.05),MMP-2的表达也降低,但两者间差异无统计学意义(P>0.05),而MMP-9的表达明显增高(P<0.05)。结论重组质粒pcDNA3.1(+)-TGF-β3能减少细胞内外Ⅰ型胶原的合成及分泌;通过调节MMP-9及TIMP-1的表达,可抑制细胞外基质的合成,促进其降解。

转染人转化生长因子-β_3基因对瘢痕成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的影响

目的 观察转染人转化生长因子 β3 (hTGF β3 )基因对瘢痕成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的影响。方法 通过脂质体介导的方法 ,将人表皮细胞生长因子基因真核表达质粒 (pBK CMV) TGF β3 质粒转染体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞 ,采用RT PCR法检测TGF β3 mRNA的表达 ,放射免疫 (RIA)法测定细胞培养上清液中Ⅰ型和Ⅲ型前胶原的浓度。结果 构建的TGF β3 质粒可成功转染成纤维细胞 ,并增强Ⅰ型和Ⅲ型胶原的表达 ,下调Ⅰ /Ⅲ型胶原比值。结论 转染hTGF β3

转化生长因子-β3与纤维连接蛋白在子宫肌瘤及子宫肌层内的表达水平与生物学意义

目的:探讨转化生长因子(TGF)-β3与纤维连接蛋白(FN)在绝经或未绝经妇女子宫肌瘤及子宫肌层中表达的水平变化及其意义。方法:采用免疫组化法(SP)检测40例绝经后子宫肌瘤妇女(绝经组)、40例未绝经子宫肌瘤妇女(未绝经组)肌瘤组织及肌壁组织中的TGF-β3、FN的表达差异,同时将绝经组妇女根据肌瘤是否发生萎缩分为萎缩组(17例)、未萎缩组(23例)并进行上述指标的比较。结果:绝经组的肌瘤组织、肌壁组织中的TGF-β3表达评分分别为(3.11±0.78)分、(1.85±0.69)分均显著的低于未绝经妇女的(3.98±0.67)分、(2.31±0.82)分(P<0.05);两组妇女肌瘤组织和肌壁组织中的FN表达评分差异不显著(P>0.05)。子宫肌瘤萎缩和未萎缩患者的子宫肌瘤组织、肌壁组织中TGF-β3、FN表达在两组间差异均不显著(P>0.05),萎缩组和未萎缩组的肌瘤组织TGF-β3表达分别为(2.90±0.65)分、(3.32±0.74)分均显著的高于本组肌壁组织中的(1.85±0.67)分、(2.25±0.61)分(P<0.05);两组肌瘤和肌壁组织中的FN表达差异不显著(P>0.05)。结论:TGF-β3表达可能与患者绝经前后的激素水平改变有关。

转化生长因子-β3基因重组腺病毒载体的构建及表达

目的:构建含有转化生长因子-β3(Transforming growth factor-β3,TGF-β3)和增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)的腺病毒载体,使其转染兔骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs),并在细胞内得到表达。方法:将含有TGF-β3基因克隆至含有EGFP的穿梭质粒,通过在感受态菌DH5α内同源重组,构建pAdxsi-EGFP-TGF-β3。PacⅠ酶切线性化pAdxsi-EGFP-TGF-β3转染HEK293细胞,多轮"乒乓感染法"扩增收集pAdxsi-EGFP-TGF-β3病毒液,氯化铯梯度离心纯化,PCR和荧光显微镜观察EGFP的表达并检测重组腺病毒液的滴度。测定重组腺病毒液转染MSCs细胞转染效率,Western blot检测TGF-β3蛋白表达。结果:成功构建携带TGF-β3和EGFP的重组腺病毒载体pAdxsi-EGFP-TGF-β3,PCR和绿色荧光证实病毒包装成功,并具有感染力,病毒滴度为2×1010pfu/ml。Western blot检测表明Adxsi-EGFP-TGF-β3感染的兔骨髓MSCs细胞有效表达TGF-β3。结论:含有TGF-β3和EGFP的腺病毒载体pAdxsi-EGFP-TGF-β3构建成功和TGF-β3蛋白在兔骨髓MSCs中有效表达,为进一步研究转染TGF-β3基因的兔骨髓MSCs减轻创面愈合后瘢痕组织增生提供实验基础。

缺氧诱导因子-1α和转化生长因子-β3在子痫前期患者胎盘组织中的表达

目的:研究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和转化生长因子-β3(TGF-β3)在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义。方法:采用免疫组化方法和图像分析系统分别对20例正常孕妇(对照组)和46例子痫前期患者(子痫前期组,其中轻度16例、重度30例)胎盘组织中的HlF-1α和TGF-β3的表达进行分析。结果:①HIF-1α主要表达于胎盘绒毛滋养细胞和蜕膜细胞,与正常组胎盘组织(65.2±1.77)比较,子痫前期组HIF-1α的平均光密度(78.10±3.84)显著升高(P<0.05),重度子痫前期(81.49±1.81)显著高于轻度子痫前期(74.71±1.53)(P<0.05)。②TGF-β3主要表达于胎盘绒毛滋养细胞和蜕膜细胞,与正常组胎盘组织(63.55±2.10)比较,子痫前期组TGF-β3的平均光密度(75.34±3.73)显著升高,其中重度子痫前期(78.05±3.14)显著高于轻度子痫前期(72.64±1.79)。③子痫前期组HIF-1α和TGF-β3的表达呈正相关性(γ=0.351,P<0.05)。其中轻度子痫前期γ1=0.549,P<0.05。重度子痫前期γ2=0.577,P<0.05。结论:胎盘滋养细胞HIF-1α和TGF-β3表达升高可能与子痫前期的发病有关。

转化生长因子-β3对肝脏和胰腺纤维化的影响

组织纤维化的基本特征是细胞外基质降解减少、过度沉积,导致组织结构的改建.TGF-β3通过抑制胶原的沉积,促进其降解而具有抗纤维化作用,并被证实在创伤愈合过程中可减轻伤后疤痕的形成.本文着重介绍了TGF-β3在肝脏及胰腺纤维化中的表达及其作用,以进一步了解其对纤维化疾病的影响.

转化生长因子β_3在子痫前期胎盘中表达及意义(英文)

【目的】探讨转化生长因子β3(TGF-β3)mRNA及蛋白在子痫前期胎盘组织中的表达变化及意义。【方法】应用实时定量PCR,检测10例子痫前期和10例正常妊娠的胎盘组织中TGF-β3mR-NA表达的水平,应用Western blot检测两组胎盘组织中TGF-β3蛋白表达水平。【结果】与正常妊娠胎盘组织相比,子痫前期胎盘组织中TGF-β3mRNA和蛋白表达水平明显增加(P<0.05)。【结论】TGF-β3在子痫前期胎盘组织中表达增高,可能与子痫前期的发病机制有关。

转化生长因子-β3诱导大鼠前软骨干细胞成软骨分化的量效作用

目的研究转化生长因子-β3(TGF-β3)诱导大鼠前软骨干细胞(PSCs)向软骨方向分化的可行性以及剂量效应关系。方法在体外将分离纯化的大鼠PSCs置于含有不同剂量TGF-β3的诱导培养液中培养,依据其浓度分为5个实验组和1个对照组(不含TGF-β3),观察细胞生长情况,分别进行Ⅱ型胶原的免疫组织化学检测及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Ⅱ型胶原mRNA表达。结果细胞生长良好。免疫组织化学检测对照组Ⅱ型胶原表达阴性,而含TGF-β3的诱导培养液诱导的各组细胞Ⅱ型胶原表达均阳性,其中10μg/L组阳性率最高。RT-PCR半定量检测也显示10μg/L组Ⅱ型胶原mRNA表达量最多,与其它组比较,差异均有显著意义(P<0.05)。结论TGF-β3在体外能有效诱导PSCs向软骨细胞定向分化。TGF-β3对PSCs促分化作用存在剂量依赖性。

四氯二苯对二恶英和地塞米松诱导小鼠腭裂及转化生长因子-β3和受体活化样激酶5的表达

目的建立四氯二苯对二恶英（TCDD）和地塞米松（DEX）联合诱导C57BL/6J小鼠腭裂模型,并在腭发育关键时期检测转化生长因子-β3（TGF-β3）和受体活化样激酶5（Alk5）基因的表达,探讨TCDD和DEX联合诱导胎鼠腭裂与TGF-β3和Alk5的相关性。方法在小鼠GD10～GD12,实验组小鼠连续3d胃饲TCDD和腹腔注射DEX,空白对照组不做处理,于GD17.5体视显微镜下检测各组腭裂发生率,并于GD13.5、GD14.5、GD15.5分别剪取胎鼠腭突提取RNA,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测TGF-β3和Alk5基因表达。结果采用TCDD和DEX联合致畸,可诱导C57BL/6J胎鼠形成100%腭裂,建立了一种稳定适合分子生物学研究的腭裂动物模型。GD13.5时TGF-β3和Alk5基因表达水平在实验组与空白对照组之间差异均无统计学意义（P〉0.05）,在GD14.5、GD15.5实验组TGF-β3表达均降低（P〈0.05）,而Alk5表达均升高（P〈0.05）。结论 TCDD和DEX联合作用可诱导C57BL/6J胎鼠形成稳定腭裂,在腭融合关键时期诱导TGF-β3表达下降,Alk5表达升高,与腭裂的发生具有一定的相关性。

腹腔镜前列腺癌根治术对前列腺癌病人的疗效及对转化生长因子-β1、转化生长因子-β3及前列腺特异性抗原水平的影响

目的探讨腹腔镜前列腺癌根治术对前列腺癌病人的疗效及对转化生长因子-β1(TGF-β1)、转化生长因子-β3(TGF-β3)及前列腺特异性抗原(PSA)水平的影响。方法 2017年10月~2018年10月收治的前列腺癌病人104例,根据治疗方式将其分成腹腔镜组与开放性组,每组各52例。开放性组予以开放性前列腺癌根治术治疗,腹腔镜组则予以腹腔镜前列腺癌根治术治疗。随访1年,比较两组生存率及治疗前1天和治疗后30天的TGF-β1、TGF-β3及PSA水平。结果腹腔镜组12个月的生存率为96.15%(50/52),开放性组为的84.62%(44/52),两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。两组术后血清TGF-β1、TGF-β3、T-PSA、F-PSA水平与术前比较,差异有统计学意义(P<0.05),两组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。腹腔镜组术后并发症发生率低于开放性组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论腹腔镜前列腺癌根治术治疗前列腺癌疗效显著,可改善TGF-β1、TGF-β3及PSA水平,降低术后并发症发生风险。

盐酸氨溴索、地塞米松对大鼠胎肺TGF-β_3表达的影响

目的比较产前给药盐酸氨溴索、地塞米松对大鼠胎肺转化生长因子-β3(TGF-β3)基因和蛋白表达的影响。方法9只孕鼠随机分为生理盐水对照组、地塞米松组、盐酸氨溴索组,每组3只。孕16、17、18d腹腔注射给药3剂。孕19d取胎鼠肺,RT-PCR法检测TGF-β3基因表达水平;免疫组织化学法检测TGF-β3蛋白表达水平。结果地塞米松组和盐酸氨溴索组TGF-β3基因和蛋白的表达均明显高于对照组(P<0.05)。地塞米松组TGF-β3基因和蛋白的表达高于盐酸氨溴索组(P<0.05)。结论产前给药盐酸氨溴索、地塞米松均能促进胎肺发育相关因子TGF-β3基因及蛋白的表达,从而促进胎肺功能的发育。

TGF-β_3在臀肌挛缩症患者中的表达及其作用

目的探讨转化生长因子-β3(transforming growth factor-β3,TGF-β3)在臀肌挛缩症(gluteal muscle contracture,GMC)患者臀肌挛缩带中的表达及其意义。方法分别采用实时定量PCR和免疫组化检测23例臀肌挛缩症患者臀肌挛缩带和挛缩带旁臀大肌组织中TGF-β3的表达水平。结果挛缩带中TGF-β3弥漫性分布于成纤维细胞和血管内皮细胞中,呈强阳性。TGF-β3mRNA在挛缩带中的表达水平明显高于挛缩带旁臀大肌组织的表达水平,差异有统计学意义(1.76±0.63 vs1.28±0.49,P<0.05)。结论臀肌挛缩症患者臀肌挛缩带中TGF-β3表达水平升高,TGF-β3可能参与了臀肌挛缩症的发病过程。

上海地区汉族转化生长因子β基因多态性与高血压尿白蛋白的相关研究

目的探讨上海地区汉族人群转化生长因子β（TGF-β）基因多态性与高血压尿白蛋白的关系。方法分别应用PCR-RFLP和等位基因专一PCR法，在352例高血压患者中确定TGF-β1 T869C和TGF-β3 SS5608219多态性基因型；采用免疫速率散射比浊法测定24小时尿白蛋白（UAE）。结果高血压尿白蛋白组与尿白蛋白正常组之间T869C和SS5608219多态性基因型分布无显著差异（P〉0．05）。在231例男性中，调整年龄、体重指数、收缩压和舒张压后，TGF-融AA基因型者UAE为39．0mg／24h（P〈0．05），显著高于AG（25．9mg／24h，95％CI，19．7～34．1）及GG基因型者（22．0mg／24h，95％CI，16．7—28．9）；在121例女性中，不同基因型无显著性差异。结论在上海汉族男性高血压患者中，TGF-β3 SS5608219多态性与尿白蛋白相关。

TGF-β_3在关节软骨组织工程的研究进展

骨关节炎目前尚无有效治疗方法。转化生长因子-β3(TGF-β3)是转化生长因子超家族蛋白之一,可与生物支架联合诱导细胞成软骨分化,可诱导骨髓间充质干细胞、软骨细胞、脂肪间充质干细胞、滑膜间充质干细胞等种子细胞成软骨分化,可与成纤维细胞生长因子、胰岛素样生长因子、骨形态发生蛋白等其他生长因子联合促进软骨细胞生长,在骨关节的软骨生长和重建中起着关键性的作用。

转化生长因子-β_3和牙髓干细胞在兔面神经损伤修复中作用

目的探讨再生室内联合应用牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)和转化生长因子-β3(transforming growth factor-β3,TGF-β3)修复兔面神经横断性损伤的可行性,比较各时间段不同药物干预后面神经的恢复情况。方法健康成年新西兰大白兔36只,随机分为DPSCs+TGF-β3组(实验组)、TGF-β3组和PBS组,每组各12只,3组均于兔左面颊部分离面神经上颊支并切断,利用硅胶管作为再生室桥接离断的神经上颊支,建立面神经上颊支横断伤模型。实验组在再生室内加入100ng/μL TGF-β3液和1×108/LDPSCs悬液0.1mL,TGF-β3组加入等量100ng/μL TGF-β3液,PBS组加入等量PBS液,术后4、12周比较3组兔面神经修复再生情况。结果4、12周时实验组神经纤维数[(1 034.58±94.28)、(1 425.92±188.98)根]和纤维直径[(2.05±0.14)、(7.18±0.40)μm]高于TGF-β3组[(935.00±44.60)、(1 053.42±135.26)根,(1.56±0.12)、(6.21±0.47)μm]和PBS组[(555.50±80.20)、(694.36±24.11)根,(1.26±0.08)、(3.64±0.56)μm](P<0.05);12周时3组再生神经纤维总数和纤维直径均高于4周时(P<0.05)。结论 TGF-β3与DPSCs联合应用可有效促进面神经再生,二者联合应用较单用TGF-β3修复效果好;DPSCs可作为种子细胞应用于面神经组织工程。