血清长链非编码RNA生长阻滞特异性基因6反义RNA1与冠状动脉粥样硬化病变程度及稳定性的相关性

目的检测冠状动脉粥样硬化(CAS)患者血清长链非编码RNA生长阻滞特异性基因6反义RNA1(lncRNAGAS6-AS1)的表达水平,分析其与CAS病变程度及稳定性的关系。方法选取2020年2月至2021年8月期间在武汉市汉口医院接收的124例CAS患者为CAS组,同期在我院体检的健康者124例为对照组;检测并比较各组血清中lncRNAGAS6-AS1和白介素-6(IL-6)的表达水平,分析CAS患者血清lncRNA GAS6-AS1与IL-6表达水平、Gensini积分的相关性。结果与对照组相比,CAS组血清lncRNA GAS6-AS1的表达水平降低,IL-6表达水平升高(t=43.614、23.404,P<0.05);稳定性、不稳定性心绞痛和急性心肌梗死患者中lncRNA GAS6-AS1表达水平依次降低,IL-6表达水平依次升高(F=6.821、7.495,P<0.05);单支、双支、多支病变患者血清lncRNAGAS6-AS1表达水平依次降低,IL-6表达水平依次升高(F=12.946、13.023,P<0.05);轻、中、重度病变组血清lncRNA GAS6-AS1表达水平依次降低,IL-6表达水平依次升高(F=15.900、6.224,P<0.05);CAS患者血清lncRNAGAS6-AS1与IL-6表达水平和Gensini积分呈负相关(r=-0.685、-0.699,P<0.05)。结论CAS患者血清lncRNA GAS6-AS1表达水平可能可以作为反映CAS病变严重程度和稳定性的潜在生物标志物。

lncRNA GAS6-AS1在子宫内膜癌中的表达与临床病理特征和预后因素分析

目的分析子宫内膜癌组织中长链非编码RNA生长阻滞特异性基因6反义RNA1(lncRNA GAS6-AS1)表达水平,并探讨其与临床病理特征及预后的关系。方法回顾性分析2015年6月至2018年1月于河南大学第一附属医院行子宫切除的80例子宫内膜癌患者。收集患者子宫内膜癌组织以及癌旁组织,采用实时荧光定量PCR法检测组织中lncRNA GAS6-AS1表达水平。Kaplan-Meier法分析组织lncRNA GAS6-AS1表达与子宫内膜癌患者预后的关系,多因素Cox回归分析影响子宫内膜癌预后的因素。结果与癌旁组织相比,子宫内膜癌组织中lncRNA GAS6-AS1表达水平较高(P<0.001)。lncRNA GAS6-AS1表达水平与浸润深度、盆腔淋巴结转移具有相关性(P<0.05)。lncRNA GAS6-AS1低表达组5年累积总生存率高于lncRNA GAS6-AS1高表达组(P<0.05)。浸润深度≥1/2肌层、组织lncRNA GAS6-AS1高表达是子宫内膜癌患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。结论子宫内膜癌组织中lncRNA GAS6-AS1呈高表达,与子宫内膜癌预后不良有关,可能成为评估预后的分子标志物。

长链非编码生长停滞特异性蛋白6反义RNA1靶向miRNA-374a-3p调控高糖诱导的人肾小管上皮细胞损伤及纤维化分子机制的研究

目的探讨长链非编码生长停滞特异性蛋白6反义RNA1(LncRNA DLX6-AS1)对高糖诱导的人肾小管上皮细胞HK-2损伤及纤维化的影响及其可能作用机制。方法高糖诱导HK-2细胞建立细胞损伤模型,实验分为正常对照(Con)组、高糖组(HG)、LncRNA DLX6-AS1小分子干扰RNA阴性对照(si-NC)+HG组(si-NC+HG组)、LncRNA DLX6-AS1小分子干扰RNA(si-LncRNA DLX6-AS1)+HG组(si-LncRNA DLX6-AS1+HG组)、miR-374a-3p寡核苷酸模拟物阴性对照mimic NC序列(miR-NC)+HG组(miR-NC+HG组)、miR-374a-3p寡核苷酸模拟物(miR-374a-3p mimics)+HG组(miR-374a-3p+HG组)、miR-374a-3p特异性寡核苷酸抑制剂阴性对照(anti-miR-NC)+si-LncRNA DLX6-AS1+HG组(anti-miR-NC+si-LncRNA DLX6-AS1+HG组)、miR-374a-3p特异性寡核苷酸抑制剂(anti-miR-374a-3p)+si-LncRNA DLX6-AS1+HG组(anti-miR-374a-3p+si-LncRNA DLX6-AS1+HG组)。qRT-PCR法检测LncRNA DLX6-AS1、miR-374a-3p表达,ELISA法检测TNF-α、IL-1β水平,双荧光素酶报告实验检测LncRNA DLX6-AS1和miR-374a-3p的靶向关系,Western blot法检测人平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(Fn)、I型胶原α1链(COL1a1)、COL3a1蛋白表达量。结果转染si-LncRNA DLX6-AS1或miR-374a-3p mimic可降低TNF-α、IL-1β水平和α-SMA、Fn、COL1a1、COL3a1蛋白水平(P<0.05)。LncRNA DLX6-AS1可靶向调节miR-374a-3p表达。共转染anti-miR-374a-3p与si-LncRNA DLX6-AS1可恢复转染si-LncRNA DLX6-AS1对HG诱导的HK-2细胞炎症及纤维化作用。结论干扰LncRNA DLX6-AS1表达可通过上调miR-374a-3p表达抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞炎症反应及纤维化。

长链非编码RNA DLX6-AS1调控微小RNA-15b和磷脂酶D1影响口腔鳞状细胞癌侵袭转移的分子机制研究

目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)生长停滞特异性蛋白6-反义RNA1(growth arrest specific protein 6-antisense RNA1,DLX6-AS1)对口腔鳞状细胞癌(口腔鳞癌)细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法:实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测口腔鳞癌组织及癌旁组织中DLX6-AS1、微小RNA-15b(microRNA-15b,miR-15b)和磷脂酶D1(phospholipase D1,PLD1)mRNA的表达水平。转染DLX6-AS1小干扰RNA至口腔鳞癌细胞HSC3,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)、Transwell小室和Western印迹法(Western blot)检测抑制DLX6-AS1表达对HSC3细胞的增殖、迁移和侵袭能力,以及对p21、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)和E-钙黏附素(E-cadherin)蛋白表达的影响。分别共转染miR-15b抑制剂或PLD1过表达载体与DLX6-AS1小干扰RNA至HSC3细胞,用上述相同方法观察抑制miR-15b或过表达PLD1对DLX6-AS1表达抑制的HSC3细胞增殖、迁移和侵袭能力,以及对p21、MMP-2和E-cadherin蛋白表达的影响。双荧光素酶报告基因实验验证DLX6-AS1与miR-15b及miR-15b与PLD1的调控关系。结果:与癌旁组织比较,口腔鳞癌组织中DLX6-AS1和PLD1 mRNA表达水平升高(P<0.001),miR-15b表达水平降低(P<0.001)。抑制DLX6-AS1表达可降低HSC3细胞存活率、迁移和侵袭,以及MMP-2的蛋白表达水平(P<0.001),提高p21和E-cadherin蛋白表达水平(P<0.001)。抑制miR-15b表达或过表达PLD1均可降低抑制DLX6-AS1表达对HSC3细胞的存活率、迁移和侵袭及P21、MMP-2和E-cadherin蛋白表达的影响。DLX6-AS1在HSC3细胞中靶向负调控miR-15b,miR-15b靶向负调控PLD1。结论:抑制DLX6-AS1表达可能通过靶向调控miR-15b和PLD1轴抑制口腔鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭。