利用转座子将parDE与pCPP430体内重组提高生防工程菌的遗传稳定性

带有梨火疫欧氏杆菌 (Erwiniaamylovora)完整的hrp基因簇的重组粘粒pCPP43 0转化到植物的附生菌成团泛菌 (Pantoeaagglomerans) 3 0 8R中后可以使成团泛菌获得在烟草等植物上引发过敏反应和诱导植物抗病性的能力。pCPP43 0携带着约 40kb的梨火疫欧氏杆菌的染色体DNA ,在成团泛菌 3 0 8R中不能稳定遗传。本文首先把广宿主范围质粒RK2的控制质粒稳定性的parDE片段插入到转座载体pUT mini Tn5Km的唯一克隆位点NotI上 ,然后利用Tn5的转座特性 ,将parDE体内重组到pCPP43 0上 ,经过在无抗生素选择压下反复传代和过敏反应活性测定 ,筛选到了遗传稳定性显著提高的重组生防工程菌。

原生质体融合技术在生防菌株筛选中的应用

原生质体融合技术作为一种重要的微生物育种手段,被广泛应用于工程菌株的筛选。对该技术在链霉菌,木霉生防工程菌株筛选中的应用进行了论述,着重讨论了该技术在创建高效稳定生防工程菌中应用的可行性。

甘蔗真菌病病害及生物防治的研究进展

文章论述了甘蔗常见真菌病害的种类及研究现状。通过对现有科研成果的研究,总结出目前阶段国内对于甘蔗真菌病害防治的不足和生物防治手段的缺失。通过对植物真菌病现有生防研究方法在植物真菌病害防治的讨论,提出针对甘蔗真菌病害的生物防治可借鉴的思考点和切入点,为甘蔗真菌病的生防工程提供思路。

白菜病害生防原生质体融合菌株的筛选

为了获得同时具有白菜软腐病和黑斑病生防功能的原生质体融合菌株,对白菜软腐病生防菌株芽孢杆菌KR和白菜黑斑病生防菌株假单胞菌B13的融合子进行了筛选。结果表明:2·0单位/mL的硫酸妥布霉素和5×10-3g/mL的氯霉素可分别抑制假单胞菌B13和芽孢杆菌KR,培养基中添加这两种抗生素可选出融合子。对得到的182个融合子进行传代,连续传10代后,得到一株能稳定遗传的融合子KB1。

利用转座子Tn5诱变冰核细菌获得无冰核活性菌株

以云南省冰核细菌的优势种类丁香假单胞菌Pseudomonassyringae和菠萝泛菌Pantoeaananas为重组基因工程菌的受体菌 ,采用Tn5转座子诱变技术 ,以大肠杆菌EscherichiacoliS17/pZJ2 5∶∶Tn5作为转座子诱变的供体菌 ,使Tn5插入并整合到冰核细菌基因组中 ,使冰核基因的线性连续性被破坏 ,失去冰核活性。大量筛选接合子 ,获得 15