甲、乙型流感病毒检测方法的研究进展

流感是一种急性发热性呼吸道传染病,飞沫传播是主要传播途径,具有传染性强、传播速度快、传播范围广等特征,已成为世界范围内的公共卫生问题,可对居民身心健康构成重大威胁。如何快速、准确地诊断流感病毒感染,给予其特异抗病毒治疗,对降低疾病传染性及病死率,进而有效控制疫情具有重要意义。目前常用的甲、乙型流感病毒病原学相关检验方法包括病毒分离、免疫学检测及核酸检测等,不同检测方法各有利弊。本文主要对常用的甲、乙型流感病毒病原学相关检验方法进行综述,通过对比各方法的优缺点,在甲、乙型流感预防控制的不同环节,选择适宜的检测方法,为临床提供快速准确的诊断依据。

2016―2018年某院甲、乙型流感病毒流行病学特点及检测方法比较

目的探讨甲、乙型流感病毒的流行病学特征,比较抗原检测与核酸PCR检测的差异。方法收集2016年1月至2018年1月该院收治的110例疑似流感患者,采集其咽拭子标本,同时进行甲/乙型流感病毒抗原和核酸检测,分析其流行病学特征,研究2种检测方法流感以12月份至次年的3月份为高发季节,甲、乙型流感病例分别为26例和11例,在性别和是否合并肝脏基础疾病的发病率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结果抗原检测与核酸PCR检测结果一致性较差(P>0.05)。甲型流感抗原检测敏感性低于核酸PCR检测(抗原阳性CT值为24.63～39.35),乙型流感病毒抗原检测与核酸PCR检测无明显的相关性。结论 12月份至1月份为流感高发季节,甲、乙型流感发病率在性别和有无肝脏基础疾病中无差异,抗原检测的灵敏度、特异度低于PCR检测。

儿童甲、乙型流感病毒感染外周血中性粒细胞/淋巴细胞比值的临床意义

目的探讨外周血全血细胞分析中的四项指标在儿童甲、乙型流感病毒感染中的临床意义。方法回顾性分析2018年1月~2019年1月在北京儿童医院就诊的发热和/或急性呼吸道症状的门诊患儿468例。采用间接免疫荧光法检测血清甲、乙型流感病毒IgM抗体,采用流式细胞计数法进行外周血全血细胞分析。每组按年龄分为<4岁组和≥4岁组。研究组纳入甲型流感患儿138例,乙型流感患儿177例,对照组纳入有呼吸道感染症状但甲、乙型流感病毒阴性的患儿153例。分别比较三组白细胞(white blood cell,WBC)、中性粒细胞(neutrophil,NEU)、淋巴细胞(lymphocyte,LYM)和中性粒细胞/淋巴细胞比值(neutrophil-to-lymphocyte ratio,NLR)的水平,并对结果进行统计学分析。结果在<4岁组和≥4岁组中,四项指标与对照组相比差异有统计学意义(<4岁组χ^2=48.721~159.45,≥4岁组χ^2=36.79~93.56,均P<0.001)。<4岁组,四项指标的受试者特征曲线(receiver operator characteristic curve,ROC)的曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.765,0.904,0.742和0.924,当NLR取临界值1.12时,敏感度为87.8%,特异度为86.3%。≥4岁组,四项指标的ROC-AUC分别为0.823,0.937,0.799和0.977,当NLR取临界值1.65时,敏感度为94.1%,特异度为94.8%。进一步对甲、乙流感组进行比较,<4岁组中,两组之间WBC,NEU和NLR差异有统计学意义(P<0.001)。结论 NLR优于其他三项常规感染指标,有望作为诊断儿童甲、乙流感病毒感染的潜在指标。

NLR对甲、乙型流感病毒感染患者的预测价值研究

目的探讨中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)在甲、乙型流感病毒感染患者中的预测价值。方法选取800例甲、乙型流感病毒感染患者作为观察组,其中甲型流感病毒感染664例、乙型流感病毒感染132例、甲型和乙型流感病毒混合感染4例;另选取同期健康体检者800例作为对照组。对比两组的C反应蛋白(CRP)、血小板计数(PLT)、白细胞计数(WBC)、中性粒细胞计数(NC)、淋巴细胞计数(LC)、NLR、淋巴细胞计数与单核细胞比值(LMR)、血小板计数与淋巴细胞计数比值(PLR)。结果观察组WBC、NC、CRP、NLR、PLR水平均明显高于对照组,而LMR、LC水平均低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组中,甲型患者的WBC、NC、CRP、NLR高于乙型患者, LMR、LC水平低于乙型患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。甲型患者中,儿童WBC、NC水平与成人比较差异无统计学意义(P>0.05);儿童LMR、LC、PLT、PLR水平均明显高于成人, CRP、NLR水平均明显低于成人,差异具有统计学意义(P<0.05)。儿童WBC、LC、LMR、PLT、PLR水平均明显高于成人,而NLR、CRP水平均明显低于成人,差异具有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析显示, NC对对甲、乙型流感病毒感染患者感染的AUC为0.784,灵敏度为78.1%,特异度为79.3%;LC对甲、乙型流感病毒感染患者感染的AUC为0.812,灵敏度为81.1%,特异度为79.6%;NLR对甲、乙型流感病毒感染患者感染的AUC为0.874,灵敏度为89.0%,特异度为82.3%。结论 NLR对甲、乙型流感病毒感染患者预测价值显著,其升高是预测甲、乙型流感病毒感染阳性的重要指标。

板蓝根水提物S-03体外抑制甲、乙型流感病毒感染的实验研究

以水提法分离制备板蓝根水提物S-03分析其基本化学成分,并在狗肾细胞（MDCK）上分别接种人甲1、3型和乙型流感病毒标准株、临床分离株以及禽流感病毒,采用空斑减少和免疫荧光及血凝抑制实验方法,在预防、治疗和直接作用三种试验模式下探讨S-03体外对流感病毒的抑制作用。研究结果表明S-03的主要化学成分为糖类,多糖所占总重的比例最高。S-03体外抗病毒药效显示：①预防模式：对各型流感病毒均无抑制作用;②治疗和直接作用模式：对不同亚型流感病毒均有一定程度的抑制作用,且直接作用（SI=2.5~16）效果优于治疗模式（SI=2.2~5.8）;③血凝抑制试验：对不同亚型的人流感病毒血凝素有不同程度抑制作用（最低抑制浓度为3.12~25 mg/mL）,并且对禽流感病毒（H6N2、H7N3、H9N2）的血凝素也有一定的抑制作用（最低抑制浓度25~50 mg/mL）,其作用机制可能为抑制流感病毒表面的血凝素（HA）,从而阻止病毒感染。

儿童甲、乙型流感病毒感染的血常规分析和超敏C反应蛋白的变化和意义

探讨儿童甲、乙型流感病毒感染的血常规常用指标和超敏C反应蛋白(CRP)变化特点及其意义,为临床上疾病的诊断及治疗流感提供有力依据。方法 2019年12月-2020年3月在南京市一三甲医院门诊有疑似流感病毒的患者进行咽拭子采样,检测流感病毒抗原,同时采集指尖检测血常规和CRP,随机选择流感患者190例作为观察组,同时,随机选择同期81例流感阴性患者作为对照组。分析患者的血常规和CRP特点,统计各项指标的差异性。结果 A组、C组的白细胞绝对值、中性粒细胞绝对值、CRP均高于B组(P<0.05),A组、B组的淋巴细胞绝对值和淋巴细胞百分比低于C组(P<0.05),A组、B组和C组单核细胞绝对值比较,无统计学研究意义(P>0.05)。A组和C组构成比与B组差异有显著差异(P<0.05),A组的构成比与C组有统计学研究意义(P<0.05);而A组、B组和C组在所有条件下构成比无统计学意义(P>0.05)。结论 患者血液中的血细胞分析和血液CRP对甲型流感病毒感染和乙型流感病毒的诊断鉴别以及治疗具有一定的临床指导意义。

甲型和乙型流感病毒抗原快速检测结果分析

目的 探讨本地区甲/乙型流感病毒在不同流行季节的变化趋势,分析流感病毒阳性患者外周血细胞中白细胞(WBC)、中性粒细胞(Neu)、淋巴细胞(Lym)、嗜酸性细胞(Eos)、血小板(PLT)和C反应蛋白(CRP)等感染性指标的变化.了解季节因素对流感病毒传播的影响,为流感病毒的临床治疗及疾病预防提供流行病学依据.方法利用胶体金标记免疫层析技术进行流感抗原的检测,对2017年3月至2018年2月检测的1648份流感病毒抗原筛查结果进行统计学分析,分析其流行病学特征,包括季节、年龄段分布特点.同时分析流感病毒阳性病例的相应血常规和CRP等感染性指标的变化.结果 与正常对照组比较,流感组CRP明显升高,WBC、Eos、Lym、PLT则明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05).2017-2018年度,本地区流感高峰期在2018年1~2月,且以乙型流感为主,其余月份为散发低流行.年度甲型流感和乙型流感病毒检出率比较,差异有统计学意义(χ2=20.615,P<0.05).不同年龄组的流感病毒抗原检出率比较差异有统计学意义(χ2=27.174,P<0.05).结论 流感病毒的流行与季节有着密切的关系,本地区流感的类型在不同的流行季节存在着一定的变化趋势.甲型/乙型流感病毒抗原胶体金法具有快速、简单准确和无污染等优点,适合基层医院广泛筛查使用.

流感病毒抗原快速诊断试验评估和临床价值分析

目的:本研究的目的是评估甲型/乙型快速流感诊断试验(RIDT)的诊断性能及临床应用价值。方法:在流感季节,我们常规收集了我院1079份呼吸道样本(鼻拭子),以检测流感病毒。根据患者年龄分为6个年龄组:<1岁、1~3岁、4~6岁、7~10岁、11~20岁和>20岁,每个样本用艾博甲型/乙型流感病毒抗原检测和实时PCR试剂盒进行流感检测和分型。结果:以实时RT-PCR为金标准,RIDT对甲型流感病毒的灵敏度和特异度分别为71.30%和99.18%,对乙型流感病毒的灵敏度和特异度分别为75.11%和99.88%。A+B型流感病毒的特异度高达99.00%以上,表明阳性结果不需要证实。儿童及青少年的Flu A灵敏度约为73.44%,但在20岁及以上的成年人中仅为35.48%。儿童及青少年的Flu B灵敏度约为78.08%,但在20岁及以上的成年人中仅为44.00%。儿童及青少年对甲乙型流感的灵敏度高于成人。结论:由于其快速周转时间,RIDT可以帮助指导有关流感临床管理的决策。由于特异度高,阳性结果可以解释为真正的阳性,抗病毒治疗以及预防流感传播的适当措施可以启动。RIDT对青少年的灵敏度高,然而,即使在青少年组中,RIDT识别出流感感染的灵敏度也只有70%多,对于阴性结果的患者仍应结合临床症状考虑流感,并通过PCR进行确认。