脑内注射P物质对大鼠痛阈、电针镇痛和不同脑区甲啡肽含量的影响

脑室内注射(icv)P物质(substance P,SP,1μg/10μl)可使痛阈明显升高,纹状体、下丘脑内甲啡肽样免疫活性物质(Ir-MEK)含量显著增多(P<0.05～0.01),而海马内Ir-MEK含量无明显变化 电解损毁中脑导水管中央灰质(PAG)后,SPicv升高痛阈和二脑区内Ir-MEK含量的作用显著降低(P<0.05～0.01)。 将SP注入PAG(0.4μg/4μl),电针“夹脊”穴(5Hz、3V)或腹腔注射吗啡(3mg/kg)均可使痛阈和纹状体、下丘脑内Ir-MEK含量显著升高。在SP注入PAG或腹腔注射吗啡时,海马内Ir-MEK含量也明显提高。将SP注入PAG加电针刺激增强上述效应的作用更为显著(P<0.01)。将SP注入PAG加腹腔注射吗啡增强上述效应的作用却未见进一步升高(P>0.05)。结果表明SP可能经PAG使脑内甲啡肽含量增加而发挥镇痛效应,SP注入PAG与电针具有协同作用。

大鼠中央灰质Fos蛋白与甲啡肽的共存

用免疫组织化学方法观察福尔马林脚掌皮下注射和足三里穴电针后清醒大鼠中脑导水管周围灰质（ＰＡＧ）中快速反应基因ｃ－ｆｏｓ在含甲啡肽神经元中的表达。实验中看到福尔马林注射组和电针刺激组动物的ＰＡＧ内均有Ｆｏｓ样免疫阳性反应（ＦＬＩ）标记神经元及ＦＬＩ与甲啡肽样免疫阳性反应（ＭＥＬＩ）双标记神经元，它们在ＰＡＧ的腹侧腹外侧部分布较多，对照动物ＦＬＩ标记神经元很少，共存现象极为少见。实验组与对照组神经无计数经统计处理差异非常显著。这一结果表明，福尔马林致痛和电针都能诱导ＰＡＧ中含脑啡肽神经元内（ｃ－ｆｏｓ的表达，提示伤害性刺激及针刺均可激活ＰＡＧ的腹侧腹外侧部这一重要的中枢镇痛部位。神经元中ＦＬＩ与ＭＥＬＩ的并存提示ＰＡＧ中Ｆｏｓ可能对前脑啡肽原基因表达有调控作用。

吗啡、甲啡肽和强啡肽在镇痛中的相互作用及阿片拮抗剂纳洛酮的阻断作用

本文重点观察了阿片拮抗剂纳洛酮阻断上述阿片类物质镇痛作用所需的剂量。

甲啡肽、纳络酮对红藻氨酸、谷氨酸在大鼠海马兴奋作用的调制

目的 研究甲啡肽、纳络酮对红藻氨酸、谷氨酸在大鼠海马兴奋作用的调制 ,探讨甲啡肽、纳络酮影响癫疒间生的可能机制。方法 健康Wistar大鼠以 1%戊巴比妥钠 (3ml kg)腹腔注射麻醉后行气管插管并固定于立体定位仪上 ,清醒后用 0 .0 1%d 筒箭毒 (1mg kg)腹腔注射制动。使用多管微电极微电泳给药并细胞外记录海马单位放电。结果 ①甲啡肽可兴奋大多数海马神经元 ,阿片受体拮抗剂纳络酮可拮抗甲啡肽的上述作用。而纳络酮单独电泳对海马神经元放电频率无影响。②红藻氨酸、谷氨酸可强烈兴奋海马神经元 ,甲啡肽及纳络酮可以影响这种兴奋作用。结论 甲啡肽可能通过调节红藻氨酸、谷氨酸在海马的兴奋作用来影响癫疒间 的发生。

福尔马林致痛后大鼠中脑导水管周围灰质甲啡肽及脊髓背角P物质含量的变化

本文用免疫组化方法结合计算机图像处理技术观察大鼠后脚掌皮下注射福尔马林后脊髓背角Ｐ物质免疫阳性反应（ＳＰＬＩ）变化的节段性分布及中脑导水管周围灰质（ＰＡＧ）内甲啡肽样免疫阳性反应（ＭＥＬＩ）的变化。结果显示，注射福尔马林后，脊髓腰段（Ｌ１－２，Ｌ４－５）背角ＳＰＬＩ显著增强（Ｐ＜．０５），３０ｍｉｎ组与６０ｍｉｎ组相比较无显著变化（Ｐ＞０．０５）；胸脊髓（Ｔ８）无显著变化（Ｐ＞０．０５）；颈脊髓背角ＳＰＬＩ有增强趋势（０．０５＜Ｐ＜０．１）；ＰＡＧ中ＭＥＬＩ减弱，腹外侧部３０ｍｉｎ组比６０ｍｉｎ组变化更大（Ｐ＜０．０５）。ＰＡＧ中ＭＥＬＩ与脊髓背角ＳＰＬＩ变化的时相关系提示福尔马林致痛引起的脊髓背角Ｐ物质的增多可能与ＰＡＧ中甲啡肽及阿片受体活动有关。

甲啡肽的免疫调节作用

甲啡肽是既存在于神经系统．又存在于免疫系统的内源性阿片肽，具有双向调节免疫功能、维持体内免疫平衡的重要作用。临床研究表明，甲啡肽能提高HIV感染者及肿瘤病人的免疫功能，提示甲啡肽及其类似物可能成为免疫调节药物。

甲啡肽对心室肌细胞内钙的影响

目的：检测甲啡肽引起的心室肌细胞内Ca2＋动态变化.方法：以Fura-2AM负载,荧光分光光度计检测心室肌细胞内游离钙浓度的变化.结果：心室肌细胞加入高钾前后的细胞内游离钙浓度分别为（138.7±10.1）nmol/L和（279.3±11.0）nmol/L,两组有显著差异P〈0.01.普鲁卡因处理的心室肌细胞加入高钾后,心室肌细胞内游离钙浓度为（201.3±12.0）nmol/L,而再加入甲啡肽后游离钙离子浓度降为（141±＋10.8）nmol/L.P〈0.01两组有显著差异.结论：甲啡肽可以阻断由氯化钾引起的电压依赖性钙通道道的开放.

大鼠脊髓后角内甲啡肽标记及非标记结构与C纤维间关系的免疫电镜研究

向大鼠蛛网膜下腔注射辣椒素导致一级传入纤维中的Ｃ纤维变性后，用免疫电镜技术在大鼠脊髓后角浅层内观察到：（１）大量含甲啡肽的轴突终末与未标记树突（或棘）形成对称性（少数为非对称性）突触；（２）含甲啡肽的轴突终未与变性终末共同会聚于同一甲啡肽阴性树突；（３）少量含甲啡肽轴突终末与变性终末间形成轴－轴突触或接触；（４）变性终末与含甲啡肽的树突形成非对称性轴－树突触；（５）甲啡肽阴性轴突终末与变性终末会聚于同一未标记树突并与变性终末间形成轴－轴突触或接触．以上结果表明，在脊髓后角内，脑啡肽除主要以突触后抑制方式调节Ｃ纤维传入外，也可通过轴－轴突触或接触对Ｃ纤维传入进行突触前抑制；非甲啡肽能神经元也能对Ｃ纤维传入进行突出后又突触前抑制．此外，Ｃ纤维在脊髓后角内可通过兴奋性轴－树突触直接影响甲啡肽能中间神经元的活性．

甲啡肽,纳络酮对红藻氨酸诱发大鼠癫痫活动的影响

目的：探索甲啡肽（ＭＥ）、纳络酮（ＮＬＸ）对红藻氨酸（ＫＡ）诱发大鼠癫痫发作的行为和组织学效应。方法：大鼠经戊巴比妥钠腹腔麻醉后固定于ＳＮ－１型立体定位仪上，按大鼠海马定位图谱把直径为０．５ｍｍ的金属导管植于海马双侧ＣＡ１区：用微量注射器将ＭＥ、ＮＬＸ于１０ｍｉｎ内注入，随即腹腔内注射ＫＡ１０ｍｇ／ｋｇ或１２ｍｇ／ｋｇ。海马组织石蜡切片、ＨＥ染色，显微镜观测。结果：海马内微量注入ＭＥ可易化癫痫的发生，加重海马组织损伤。ＮＬＸ可拮抗ＭＥ的作用，减轻海马组织损伤。结论：内源性阿片肽在ＫＡ诱发大鼠癫痫发作中，对海马的兴奋性的调节起重要作用。

变频体表电刺激促使慢性痛患者脊髓中释放强啡肽

本工作将皮肤电极置于人体穴位表面，用不同频率的方波脉冲进行电刺激，观察脑脊液中甲啡肽（ＭＥＫ）代谢片段ＭＥＫ１－４和ＭＥＫ２－４以及强啡肽Ａ（Ｄｙｎ－Ａ）含量的变化。观察结果如下：（１）急性和慢性疼痛患者脑脊液中ＭＥＫ１－４含量与正常组相比均无明显变化，但急性痛患者脑脊液中ＭＥＫ２－４及Ｄｙｎ－Ａ的含量显著低于正常人；（２）对照刺激或２／１５Ｈｚ变频刺激对患者脑脊液中上述神经肽片段的含量无明显影响，但２／１００Ｈｚ变频刺激后，慢性痛患者脑脊液中Ｄｙｎ－Ａ含量显著增加。韩济生实验室的动物实验结果表明，高、低频电针刺激可分别使大鼠脊髓释放Ｄｙｎ－Ａ和ＭＥＫ，并参与电针镇痛过程。本工作在疼痛患者身上也观察到不同频率的电刺激确可引起不同种类阿片肽的释放。这一发现可能有助于解释特定参数的电刺激对特定癌症的治疗作用。

脑啡肽类物质与胃肠运动

脑啡肽属内源性阿片样物质,它是一种脑肠肽,分布于中枢神经系统及整个胃肠道。脑啡肽是含5个氨基酸残基的肽,可分为两种类型,其C端为甲硫氨基酸者称为甲啡肽(结构为:H—酪—甘—甘—苯丙—蛋—OH),其C端为亮氨酸者称为亮啡肽(结构为:H—酪—甘—甘—苯丙—亮—OH)。近年来,肽类神经递质作为胃肠道的第三类神经递质成为研究比较活跃的领域。它们在调节胃肠道功能活动中起着重要的作用。脑啡肽类物质的人工合成使该领域的研究取得了很大进展。脑啡肽及其类似物有相似的生理及药理作用,它们作用于中枢及胃肠道阿片受体(包括mu,kappa,delta)调节胃肠道运动功能。

家兔下丘脑弓状核参与由中脑导水管周围灰质到伏核的上行镇痛通路

本室以往的工作表明，从中脑导水管周围灰质(PAG)有一条上行镇痛神经通路到达伏核，在伏核内5-羟色胺和甲啡肽参与镇痛信息的传递。本工作在家兔脑内埋植慢性套管，采用脑内微量注射抗体的方法研究下丘脑弓状核（ARH)及β-内啡肽(β-EP)是否参与上述镇痛神经通路。研究结果如下：

中枢八肽胆囊收缩素促进大鼠失血性休克的恢复

有资料表明,中枢八肽胆囊收缩素(CCK-8)可对抗外源性注射阿片肽和由内源性阿片肽介导的镇痛作用。我们最近的工作表明,阿片肽引起的降血压作用也能被中枢注射CCK-8所翻转(梅林等,待发表)。上述实验结果都倾向于说明CCK-8有强烈的抗阿片肽作用,可能是体内的抗阿片物质。 我室以前的工作表明,失血性休克大鼠脊髓蛛网膜下腔(ith.)