伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌成孔毒素的特征分析

致病性细菌产生许多对宿主细胞有直接或间接作用的毒素,而且这些毒素常常在微生物致病中起关键作用。沙门菌可感染机体导致多种疾病,本文首次报道了伤寒、甲型副伤寒沙门菌可表达一种与大肠埃希菌(简称大肠杆菌)ClyA有同源性的成孔毒素,并证明编码ClyA的基因位点在肠道沙门菌不同血清型中是保守的,但在鼠伤寒沙门菌中则缺失。DNA序列分析发现肠道沙门菌血清型S2369/96和CT18的clyA样开放阅读框架与伤寒沙门菌Ty21a株的clyA编码序列有100%同源性,与clyA_(EC)的核苷酸序列有87%的同源性。甲型副伤寒沙门菌S3068/99的clyA_(SPa)序列与ClyA_(STy)及clyA_(EC)分别有98%和86%的同源性。ClyA_(SPa)和ClyA_(STy)是clyA基因的两个产物,两者与大肠杆菌的细胞溶素(A(ClyA_(EC))的氨基酸序列的同源性分别为91%及90%。扩增此两基因并分别克隆形成重组体Ty21a/

以霍乱毒素B亚单位为载体的甲型副伤寒多糖结合疫苗理化及生物学特性

目的制备甲型副伤寒沙门菌(Salmonella paratyphi A,SPA)O特异多糖(O-specific polysaccharide,OSP)-霍乱毒素B亚单位(cholera toxin B subunit,CTB)结合疫苗,并初步探讨其理化及生物学特性。方法 SPA OSP多糖原液(简称OSP多糖)经溴化氰活化,己二酰肼(ADH)衍化,在碳二亚胺(EDAC)作用下与CTB偶联,结合物经Sepharose4FF柱纯化,获得多糖-蛋白结合物,对其理化指标、血清特异性、免疫原性及血清体外杀菌力进行检测。结果制备的SPA OSP-CTB结合物(简称OSP-CTB结合物)衍化度为(2. 63±0. 13)%、多糖回收率为(74±0. 2)%;鉴别试验显示OSP-CTB结合物与SPA O诊断血清、CTB抗体均有阳性沉淀线产生;免疫小鼠血清中OSP-CTB结合物抗体滴度显著增长,阳转率达100%,血清体外杀菌抗体滴度为1∶64。结论用溴化氰活化多糖制备的SPA OSP-CTB结合物具有良好免疫原性,可进一步进行疫苗研发。