感冒清热片防治甲型H1N1流感病毒感染的药效学研究

目的探讨感冒清热片防治甲型H1N1流感病毒感染的药效学情况。方法108例甲型H1N1流感病毒感染患者,随机分为观察组和对照组,每组54例。对照组使用磷酸奥司他韦治疗,观察组在对照组治疗基础上使用感冒清热片治疗。比较两组患者临床疗效、症状改善指标(起效时间、退热时间、止咳时间、痊愈时间)、以及治疗前后的中医证候(发热、咽痛、头痛、鼻塞流涕、咳嗽、乏力)积分、血清炎性因子[C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)]。结果观察组治疗总有效率96.30%高于对照组的77.78%(P<0.05)。治疗后,观察组患者发热、咽痛、头痛、鼻塞流涕、咳嗽、乏力评分分别为(0.83±0.24)、(1.12±0.30)、(1.07±0.29)、(1.03±0.32)、(1.05±0.33)、(1.09±0.28)分,均低于对照组的(1.46±0.37)、(2.31±0.58)、(2.14±0.52)、(2.25±0.63)、(2.36±0.61)、(2.42±0.65)分(P<0.05)。观察组起效时间(1.03±0.34)d、退热时间(1.56±0.40)d、止咳时间(4.35±0.68)d、痊愈时间(6.63±1.26)d均短于对照组的(2.32±0.57)、(2.63±0.74)、(7.24±1.16)、(9.38±1.72)d(P<0.05)。治疗后,观察组CRP(2.11±0.56)mg/L、TNF-α(19.34±2.20)μg/L、IL-6(4.02±0.54)ng/L均低于对照组的(4.83±0.69)mg/L、(25.89±2.73)μg/L、(6.13±0.62)ng/L(P<0.05)。结论感冒清热片防治甲型H1N1流感病毒感染的疗效显著,能有效缓解证候,加快症状缓解速度,提高抗炎作用。

耐多药肺结核合并烟曲霉、甲型H1N1流感病毒感染1例并文献复习

患者,男,61岁,农民,因“反复咳嗽8年,加重伴发热1 d”入院,入院后予抗结核治疗、奥司他韦抗病毒治疗、伏立康唑抗真菌治疗等,治疗过程中关注CYP2C19基因检测、血药浓度、药物相互作用、不良反应、肝肾功能监测,经治疗后患者症状好转出院。耐多药肺结核合并侵袭性曲霉菌、甲型H1N1流感病毒感染,精准诊疗是关键,同时开展抗结核、真菌、病毒治疗可能会加重肝肾功能负担,精准用药剂量的把控,药物间的相互作用都是需要重点关注的内容。该文旨在提高对耐多药肺结核合并烟曲霉、甲型H1N1流感病毒感染病例的认识。

射干止咳胶囊体内外抗甲型H1N1流感病毒作用初探

目的初步探讨射干止咳胶囊对甲型H1N1流感病毒的体内外抗病毒作用。方法通过细胞病变效应(cytopathic effect,CPE)结合MTT法考察射干止咳胶囊体外抑制甲型H1N1流感病毒活性的作用;采用小鼠滴鼻法感染甲型H1N1流感病毒为模型,观察射干止咳胶囊对甲型H1N1流感病毒的体内抗病毒作用。结果体外抗病毒试验结果显示,射干止咳胶囊对甲型H1N1流感病毒的最高抑制率为11.86%,提示在攻毒剂量为100TCID_(50)的条件下,射干止咳胶囊在体外对甲型H1N1流感病毒的抑制作用不明显。小鼠滴鼻感染5LD_(50)的甲型H1N1流感病毒,射干止咳胶囊低、中、高剂量组小鼠的死亡率分别为30%、10%、30%,死亡保护率达50%、70%、50%,平均生存天数分别为13 d、14 d、13 d,说明各给药组对攻毒小鼠具有较好的死亡保护作用。结论射干止咳胶囊体外抗甲型H1N1流感病毒的作用不显著,但射干止咳胶囊各剂量组对甲型H1N1流感病毒攻毒致小鼠死亡却具有明显的保护作用。

甲型流感病毒H1N1型灭活病毒标准物质研究

以人工培养真实病毒为原料,研制了一种甲型流感病毒H1N1型灭活病毒标准物质。该标准物质经化学灭活及灭活效果验证后,联合多家实验室采用数字PCR定量检测方法对拷贝数浓度进行定值,对标准物质的均匀性、稳定性及不确定度进行了评估。结果显示该标准物质均匀性良好,在-80~-70℃保存条件下稳定保存5个月,标准物质最终定值结果为(1384.5±249.3)copies/μL(k=2)。该标准物质可为H1N1型甲型流感病毒检测的全过程提供计量溯源和质量控制支撑,有助于提升相关核酸检测结果的准确性和可靠性。

寒喘祖帕颗粒对甲型流感病毒H1N1/PR8株感染致小鼠肺炎的作用

目的探讨寒喘祖帕颗粒对甲型流感病毒H1N1/PR8株感染小鼠肺炎的影响。方法小鼠随机分为正常组、模型组、达菲组(27.5 mg/kg)、连花清瘟颗粒组(3.3 g/kg)和寒喘祖帕低、中、高剂量组(0.38、0.76、1.52 g/kg)。除正常组外,其余组小鼠均采用甲型流感病毒H1N1/PR8株病毒液经滴鼻感染建立肺炎模型。各组连续给予相应药物4 d,取样。测定小鼠体质量、肺指数及抑制率、流感病毒载量、14 d内小鼠死亡率、生存时间;ELISA法检测肺组织中IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α水平,HE染色观察肺组织病理改变并评分。结果寒喘祖帕颗粒中、高剂量组可降低感染后小鼠肺指数,其肺指数抑制率分别为24.01%、32.63%;可降低死亡率,其死亡保护率分别为44.44%、50%。寒喘祖帕低、中、高剂量组均可降低小鼠肺组织中IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ水平,改善小鼠肺部病变,延长平均存活天数,生命延长率分别为17.84%、24.32%、19.46%。结论寒喘祖帕颗粒可改善流感病毒H1N1/PR8株感染致小鼠肺炎症状,可降低死亡率、延长平均存活天数。

半枝莲总黄酮抗甲型H1N1流感病毒感染的药效学研究

半枝莲为唇形科植物半枝莲（ScutellariabarbataD．Don）的干燥全草，具有清热解毒、化瘀、利尿等功效，黄酮类化合物是其主要有效成分。本文报道了我们采用大孔树脂吸附技术制备的半枝莲总黄酮对甲型H1N1流感病毒感染小鼠的药效实验结果。

郑州市人群甲型H1N1流感病毒感染趋势和抗体水平分布

目的:调查郑州市人群甲型H1N1流感的感染率和不同年龄人群的抗体阳性率分布。方法:采用快速调查方式,分5次采集2009年12月至2010年3月期间的血样样品1908份,按年龄分为0～5岁、～18岁、～55岁和>55岁年龄4组。采用血凝抑制试验测定甲型H1N1流感抗体。结果:郑州人群的平均抗体阳性率从12.9%逐渐升高至30.0%左右到达平台期;各个年龄组人群中,～18岁年龄组感染率最高,5次调查感染率的最高值达54.7%,>55岁老龄组的感染率最低,5次调查感染率的分布范围为4.0%～21.8%;根据前4次调查结果,非线性分析表明人群感染甲型H1N1的增长率服从指数公式Y=aekX。结论:郑州市人群的新型H1N1感染趋势和抗体的分布水平为新型H1N1的防控打下了基础。

清透邪热方对甲型H1N1流感病毒感染Ana-1细胞TLR-7、MyD88及NF-κB mRNA及蛋白表达的影响

目的研究清透邪热方体外抗甲型H1N1流感病毒效应机制。方法将清透邪热方制备成0.388、0.194、0.097、0.0485、0.024 25mg/mL不同浓度,用H1N1甲型流感病毒感染小鼠Ana-1巨噬细胞,给予不同浓度清透邪热方及达菲进行干预,检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素诱导蛋白-10(IP-10)和白细胞介素-6(IL-6)表达,Toll样受体7(TLR7)及其下游髓样分化因子88(MyD88)、核因子-κB(NF-κB)mRNA和蛋白表达。结果清透邪热方能够抑制甲型H1N1流感病毒感染Ana-1细胞TNF-α、IP-10、IL-6的表达;其中清透邪热方0.024 25mg/mL组降低H1N1病毒感染组TNF-α、IL-6显著(P<0.01);清透邪热方0.097mg/mL组降低IP-10显著(P<0.01)。清透邪热方能够抑制H1N1流感病毒感染后Ana-1细胞后TLR-7、MyD88及NF-κB mRNA及蛋白表达升高;其中清透邪热方0.048 5mg/mL组抑制H1N1病毒感染组TLR-7mRNA、MyD88mRNA表达显著(P<0.01);清透邪热方0.024 25mg/mL组抑制H1N1病毒感染组NF-κB mRNA表达显著(P<0.01);清透邪热方0.048 5mg/mL组抑制H1N1病毒感染组TLR-7蛋白表达升高显著(P<0.01),清透邪热方0.388mg/mL组抑制H1N1病毒感染组MyD88蛋白、NF-κB蛋白表达显著(P<0.01)。结论清透邪热方通过抑制甲型H1N1流感病毒感染Ana-1细胞TLR-7、MyD88及NF-κB mRNA及蛋白表达升高,减少TNF-α、IP-10和IL-6表达,起到抗病毒作用。

甲型H1N1流感病毒感染1例死亡病例临床与病理分析

目的了解甲型H1N1流感病毒感染患儿临床与病理特征。方法分析甲型H1N1流感病毒感染1例死亡病例临床资料和尸检结果,并结合文献分析。结果男性,1岁4个月,以咳嗽和发热起病,起病1d后即出现呼吸困难和呼吸衰竭。采用WHO推荐的RT-PCR法和国家流感中心推荐的分型方法,患儿咽拭子结果示甲型H1N1流感病毒核酸检测阳性,2次气管抽取物培养均为肺炎链球菌。予机械通气等治疗无好转,入院第4天死亡。尸检结果显示:病变主要在肺脏,大体可见大片状实变,灰褐色,质韧;胸膜粘连广泛。镜下显示肺弥漫性肺泡间质增宽,大部分肺泡可见透明膜形成,肺泡有炎性渗出,可见中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞,肺泡上皮肿胀,有巨细胞形成,部分肺泡塌陷闭合,小部分肺泡扩张融合;细支气管和支气管黏膜见较多淋巴细胞浸润,局灶黏膜糜烂。脑、心、肝、脾、肾、肾上腺、胰腺和胃肠道病理改变不明显。结论本例甲型H1N1流感死亡患儿上呼吸道症状突出,病情进展快。病理改变主要在肺脏,以炎症渗出、炎细胞浸润和肺透明膜形成为主。死亡主要原因为急性呼吸窘迫综合征,呼吸循环衰竭。

防感煎剂对甲型H1N1流感病毒感染小鼠NO、iNOS以及LYZ的作用研究

[目的]探讨防感煎剂对甲型H1N1流感病毒感染小鼠一氧化氮(nitric oxide,NO)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,i NOS)以及溶菌酶(lysozyme,LYZ)的作用,进一步了解防感煎剂的疗效机理。[方法]选用清洁级雄性ICR小鼠96只,随机分为4组:正常对照组、模型对照组、防感煎剂组、达菲对照组。正常对照组和模型对照组用生理盐水灌胃,防感煎剂组按29.32g·kg-1剂量给予防感煎剂灌胃,达菲对照组按0.02g·kg-1剂量给予达菲胶囊溶液灌胃,各组给药1次/d。各组正常给药2d,第3d开始除正常对照组外均用甲型H1N1流感病毒液滴鼻造模,正常对照组用等量生理盐水滴鼻。给药持续到第8d,即造模后第5d,各组停止给药。造模后的第1、5、9、13d观察记录小鼠体重及一般情况,以上时间点每组随机处死6只小鼠,收集肺组织标本,RT-PCR检测感染小鼠流感病毒含量。取血分离血清,ELISA法检测小鼠血清NO、i NOS、LYZ含量。[结果]一般情况:模型对照组小鼠形体消瘦,毛色枯槁,精神萎靡、反应迟钝,饮食减少。防感煎剂组及达菲对照组小鼠症状明显较模型对照组减轻。体重:在第5、9、13d,防感煎剂组和达菲对照组小鼠平均体重均低于正常对照组(P<0.05),并且均高于模型对照组(P<0.01)。甲型H1N1流感病毒含量:第1、5、9、13d,防感煎剂组及达菲对照组小鼠肺组织病毒含量均低于模型对照组(P<0.05)。血清NO、i NOS、LYZ的含量:在第5d,防感煎剂组和达菲对照组小鼠血清NO、i NOS、LYZ含量明显高于模型对照组(P<0.05)及正常对照组(P<0.01),其余时间点差异无统计学意义(P>0.05)。[结论]防感煎剂可抑制甲型H1N1流感病毒复制,增强NO、i NOS以及LYZ的表达,可能通过巨噬细胞环节,达到抵御或清除病毒的目的。

基于生物信息学分析甲型H1N1流感病毒性肺炎的生物标志物

目的通过基于基因表达综合(GEO)数据集的生物信息学方法筛选和分析甲型H1N1流感病毒性肺炎的潜在生物标志物。方法从GEO数据库获取甲型H1N1流感病毒性肺炎的数据集,并筛选差异表达基因,使用STRING 12.0数据库和Cytoscape 3.9.1软件对这些差异表达基因进行分析并筛选出Hub基因,使用DAVID数据库对这些差异表达基因进行功能富集分析。结果筛选出1019个差异表达基因,其中上调基因522个,下调基因497个。富集结果显示,这些差异表达基因的功能主要富集于细胞质、蛋白质磷酸化、免疫应答、补体成分、激酶活性、T细胞受体信号通路及FoxO信号通路等。最终确定了CDK1、CCNA2、CCNB2、CDC20、TOP2A、KIF20A、DLGAP5、BUB1、KIF11和TPX2为Hub基因。结论本研究阐明了10个Hub基因(CDK1、CCNA2、CCNB2、CDC20、TOP2A、KIF20A、DLGAP5、BUB1、KIF11和TPX2)有可能作为甲型H1N1流感病毒性肺炎诊断和治疗的潜在生物标志物,但仍需更多的实验来进一步探索这些Hub基因在甲型H1N1流感病毒性肺炎中的具体机制。

藿香、苍术对甲型H1N1流感病毒感染的免疫调节作用分析

目的:探讨不同归经芳香药藿香、苍术在体外甲型H1N1(猪流感)病毒感染时,对其免疫细胞的免疫信号相关通路调节的差异,从而揭示藿香、苍术抵抗甲型H1N1病毒的免疫作用机制和原理。方法:利用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测RIG-1样解旋酶(RLH)途径相关的免疫细胞因子的表达,对比肺经芳香药藿香与非肺经芳香药苍术两者在甲型H1N1病毒的相关免疫通路的差异。结果:霍香提取部位A组各含量与模型组比较,霍香提取部位B组TNF-Q、IFN-γ含量与模型组比较,差异都具有统计学意义(P<0.05);苍术提取部位A组IL-10与模型组比较,苍术提取部位B组IFN-γ含量与模型组比较,差异都具有统计学意义(P<0.05)。结论:藿香对甲型流感病毒感染的小鼠肺炎治疗效果,与其提高血清中IFN-γ、IL-10的表达有关,藿香比苍术对甲型H1N1流感相关的免疫调节作用更为显著。

甲型H1N1流感病毒感染患者中人冠状病毒和人偏肺病毒感染情况的初步分析

目的了解北京地区部分甲型H1N1流感病毒感染确诊急诊患者中人冠状病毒HCoV—OCA3、HCoV-229E、HCoV—NL63、HCoV—HKU1和人偏肺病毒（HMPV）的感染情况和临床表现特点。方法从2009—10-11期间北京地区部分确诊感染甲型H1N1流感病毒病例中，选择采集32份鼻咽拭子标本，利用荧光定量RT—PCR法进行HCoV—OCA3、HCoV-229E、HCoV—NL63、HCoV—HKU1和HMPV筛查；对阳性患者进行临床表现初步分析。结果32份鼻咽拭子标本中荧光定量RT—PCR检出4例（12．5％）HCoV-229E阳性，1例（3．1％）HCoV—HKU1阳性，2例（6．3％）HMPV阳性，未检测到HCoV—OCA3和HCoV—NL63阳性；检出阳性标本的临床表现为急性呼吸道症状，病情较轻，病程多为1周左右。结论2009—10-11北京地区部分确诊的感染甲型H1N1流感病毒病例中存在有人冠状病毒或人偏肺病毒共感染的情况。

2010年贵阳市人群甲型H1N1流感病毒感染状况调查

2009年4月世界卫生组织公布墨西哥、美国发生甲型H1N1流感，疫情迅速在全球蔓延开来。贵阳市2009年7月10日发现了首例由国外感染的输入性病例，9月中下旬后我市学校陆续发生暴发疫情，社区散发病例不断增多。为了解贵阳市人群甲型H1N1流感病毒感染状况，为我市制定甲型H1Nl流感防治策略提供依据，分别于2010年1月、3～4月、8～9月在3个辖区内开展3次人群甲型H1N1流感病毒感染状况抽样调查。

疏风解毒胶囊治疗儿童甲型H1N1流感病毒肺炎的疗效观察

目的观察疏风解毒胶囊治疗儿童甲型H1N1流感病毒肺炎的临床效果及对患儿IL-1β、IL-6、IFN-γ的影响。方法106例甲型H1N1流感病毒肺炎患儿随机分为对照组与观察组各53例。对照组给予奥司他韦治疗,观察组给予奥司他韦联合疏风解毒胶囊治疗。比较两组临床疗效、预后相关指标、血气指标[动脉血氧分压(PaO_(2))、动脉血二氧化碳分压(PaCO_(2))、氧合指数(PaO_(2)/FiO_(2))]、炎性因子[白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、干扰素-γ(iIFN-γ)]以及不良反应发生率。结果观察组治疗总有效率为96.23%,高于对照组的81.13%(P<0.05)。观察组患儿体温恢复正常时间、咳嗽缓解时间、肺啰音消失时间、病毒转阴时间均显著短于对照组(P<0.05)。治疗后,观察组患儿PaO_(2)、PaO_(2)/FiO_(2)高于对照组,PaCO_(2)低于对照组(P<0.05)。治疗后,观察组患儿血清IL-1β、IL-6、IFN-γ均低于对照组(P<0.05)。两组患儿治疗期间不良反应总发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论疏风解毒胶囊治疗儿童甲型H1N1流感病毒肺炎的效果确切,有助于促进患儿病情快速康复,改善血气指标,降低炎性反应,且安全性良好。

荧光定量PCR反应监测发热患者甲型H1N1流感病毒感染

目的通过荧光定量PCR反应监测发热患者甲型H1N1流感病毒感染情况,探讨该方法在流行性感冒检测诊断中的意义。方法采用WHO推荐的荧光定量PCR方法对3361例发热患者咽拭子标本进行病毒核酸检测,确定甲型H1N1流感感染患者。结果共检测有流感样症状患者2156例,甲型流感病毒核酸阳性1176例,阳性率35.0%,其中甲型H1N1流感病毒核酸阳性599例,阳性率17.8%。14岁以下儿童甲型H1N1流感病毒核酸阳性283例,占甲型H1N1流感病毒核酸阳性总数的47.2%。结论实时荧光定量PCR反应快速、准确,适用于H1N1流感病毒感染的早期诊断并可作为监测手段在临床广泛开展,为控制疫情的蔓延发挥了重要作用。

受体相互作用蛋白激酶-3参与甲型H1N1流感病毒感染小鼠记忆性CD8^+T细胞的应答

受体相互作用蛋白激酶-3(receptor-interacting protein kinase 3,RIPK3)是坏死复合体的关键成分之一,介导细胞程序性死亡(programmed cell death,PCD)的发生。前期研究发现流感抗原特异性CD8^+T细胞的初次应答部分依赖于RIPK3分子,为探讨其在记忆性CD8^+T细胞应答中的作用,对初次感染后的C57BL/6小鼠在免疫记忆阶段进行了再次感染,并用流式细胞仪检测了流感病毒特异性的记忆性CD8^+T细胞的表型和功能。结果发现小鼠初次感染甲型H1N1流感病毒株A/Puerto Rico/8/34后37d,RIPK3敲除小鼠的CD8^+T细胞比例及分泌细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的能力均显著低于野生型小鼠;在再次感染相同病毒时,RIPK3敲除小鼠流感病毒特异性CD8^+T细胞比例及分泌细胞因子IFN-γ的能力依旧显著低于野生型小鼠;而CD8^+中枢型记忆性T细胞(TCM)比例显著高于野生型小鼠,效应型记忆性T细胞(TEM)或效应性T细胞(TEff)比例却显著低于野生型小鼠。提示RIPK3分子参与调节流感病毒特异的记忆性CD8^+T细胞诱生数量和分泌细胞因子功能,并影响其TCM与TEM/TEff的比例,为深入探索病毒特异的记忆性CD8^+T细胞应答的分子机制提供了新线索。

黑龙江省危重症甲型H1N1流感病毒感染的调查分析

甲型H1N1流感病毒是A型流感病毒，携带有H1N1甲型猪流感病毒毒株，包含有北美和欧亚猪流感、禽流感和人流感三种流感病毒的核糖核酸（RNA）基因片断，同时拥有亚洲猪流感和非洲猪流感病毒特征。目前处在大流行状态下的“甲流”病毒株的分子遗传学特征不具备高致病性，但具有很强的基因重配能力。