不同剂量的甲型肝炎减毒活疫苗的血清学免疫效果研究

通州市２３６名不同剂量甲型肝炎减毒活疫苗的血清学免疫效果研究结果显示，小学一二年级学生第２组（接种１．５ｍｌ组）免后阳转率６１．１９％，显著高于第１组（接种１．０ｍｌ组）（３８．８９％），无免疫史的中青年人群免后阳转率第１组（９１．３０％），第２组９４．７４％均显著高于小学生。加强免疫后两组阳转率均为１００％。表明增加甲肝活疫苗接种剂量可提高小学生的免疫效果，成人接种尤其是加强接种。

冻干甲型肝炎减毒活疫苗的研制

［摘 要］目的 研制冻干甲肝减毒活疫苗，提高疫苗的稳定性，便于保存及运输，保证疫苗的接种效果。方法 采用CA－9冻干保护剂，制备冻干疫苗，疫苗液与保护剂之比为3．5∶1。结果 冻干甲肝减毒活疫苗具有与液体疫苗相同的安全性及免疫原性。在2～8℃保存的有效期较液体疫苗的3～5个月提高到18个月。在室温和37℃保存的稳定性也明显提高。结论 冻干甲肝疫苗的稳定性良好，无需低温保存、冷链运输，便于甲肝疫苗的大规模推广应用。

甲型肝炎灭活疫苗体外相对效力检测方法的研究及应用

目的建立甲型肝炎灭活疫苗体外相对效力检测方法。方法用双抗体夹心ELISA法检测试剂对甲型肝炎灭活疫苗及效力试验参比进行检测,以检测OD值为反应指标,用生物检定双平行线法的基本原理进行统计分析,计算待检疫苗对应于效力参比品的相对效力(R值)。结果样品HAAg含量与检测OD值之间具有高度的相关性,R2≥0.97,适用于建立双平行线检定方法;通过对3批样品3人次检测结果分析,验证了所建立方法的可靠性,回归、偏离平行、二次曲线、反二次曲线4个指标全部通过了验证;用所建立的体外相对效力试验检测法对32批次甲肝灭活疫苗进行检测,结果与小鼠体内效力检测结果具有良好一致性,均能反映疫苗相对效力,两种方法检测相对效力(R值)之间无明显差别(t=1.0354,P=0.3045)。结论所建立的甲型肝炎灭活疫苗体外相对效力试验是一种灵敏、特异、方便、快捷的效力测定方法,可应用于甲型肝炎灭活疫苗效力检测。

甲型肝炎减毒活疫苗冻干保护剂的研究

目的 研究冻干甲型肝炎减毒活疫苗的保护剂。方法 甲型肝炎病毒L-A-l株经2BX二倍体细胞培养,制备成甲型肝炎减毒活疫苗,再添加不同保护剂进行冷冻干燥。结果 以山梨醇、蔗糖、脂肪酸盐等为主的保护剂,对甲型肝炎减毒活苗病毒显示了较好的保护性,疫苗冻干前后感染滴度下降在1.0Log CCID50/ml以内,符合《中国生物制品规程》要求。结论 以山梨醇、蔗糖、脂肪酸盐等为主的保护剂是一种安全性较高、疫苗冻干效果较好,适合于疫苗规模化生产的保护剂。

甲型肝炎灭活疫苗抗原剂量的优化

目的通过体内效力实验,优化甲肝灭活疫苗抗原最适免疫剂量。方法用1.0mg/ml Al(OH)3将不同梯度剂量的实验苗及参比苗4倍递增系列稀释,经腹腔免疫小白鼠,4周后采血,检测各免疫组小鼠血清甲肝抗体阳转率,用Reed-Muench法计算半数有效稀释倍数,比较抗原免疫剂量与半数有效稀释倍数之间的剂量-效应关系。结果甲肝灭活疫苗实验苗抗原免疫剂量与半数有效稀释倍数之间存在着良好的剂量-效应关系。结论半数有效稀释倍数可用于不同品牌甲型肝炎灭活疫苗效力的评价及最适抗原免疫剂量的优化。

动态浊度法检测冻干甲型肝炎减毒活疫苗细菌内毒素含量的研究

探讨动态浊度法检测冻干甲型肝炎减毒活疫苗细菌内毒素含量的可行性。参照《中国药典》2015年版通则1143细菌内毒素检测法中动态浊度法,对甲肝疫苗进行标准曲线可靠性试验、干扰初筛试验、干扰验证试验及内毒素含量的测定,同时与经凝胶法检定合格的同批疫苗进行比较。标准曲线可靠性试验结果符合规定。干扰初筛试验疫苗稀释160、320及640倍,回收率在50%~200%之间,均无干扰,符合要求。干扰验证试验结果进一步表明：疫苗稀释160倍对试验无干扰作用。采用动态浊度法检测的10批甲肝疫苗细菌内毒素含量均小于该疫苗的限值L=20 EU/m L,且与经凝胶法检定的同批疫苗结果一致。采用动态浊度法检测甲肝疫苗细菌内毒素含量是可行的,值得推广应用。

可生物降解微球甲型肝炎减毒活疫苗口服免疫恒河猴的免疫应答

目的 探索用一种新型的甲型肝炎减毒活疫苗及其免疫途径。方法 用可生物降解的材料聚乳 酸／乙醇酸（ＰＬＡ／ＰＬＧ）包裹甲型肝炎减毒活疫苗，制成微球型疫苗，检测微球的大小及在体外病毒释放的状况，和口 服免疫恒河猴后病毒在体内繁殖及免疫应答状况。结果 微球大小在６～１０μｍ范围，体外病毒抗原释放长达２７ｄ 左右，体外抗原释放高峰在３～７ｄ，口服免疫恒河猴后，约１ｗ左右开始排毒，以后一直呈间断排毒。抗体应答于第 ３ｗ出现，高峰期在５～６ｗ，达１２６１ＭｍＩＵ／ｍｌ，随后逐渐下降，口服加强免疫后，抗体回升，野毒株攻击后，抗体再度回升 达１２４４ｍＩＵ／ｍｌ。结论 微球型甲型肝炎减毒活疫苗口服免疫恒河猴后，能引起一定水平的免疫应答。

甲型肝炎灭活疫苗有效剂量的评价

目的 评价佐剂吸附甲型肝炎成品疫苗有效免疫剂量。方法 将 4个厂家的 4批甲型肝炎灭活疫苗进行解离吸附后 ,检测比较HAV抗原含量 ;通过小白鼠体内效力实验 ,计算半数有效稀释倍数 ,比较评价各组疫苗的免疫效力。结果 体外吸附解离HAV抗原含量与体内免疫效力相偏离 ,传统概念上的半数有效剂量 (ED50 )不能用作比较评价指标。结论 体内半数有效稀释倍数可用于甲型肝炎灭活疫苗有效剂量的评价。

甲型肝炎减毒活疫苗(LA-1株)大规模免疫长期效果观察

目的:观察甲型肝炎减毒活疫苗(LA-1株)大规模接种的长期保护效果和不同免疫程序的免疫持久性。方法:212985例1.5-10岁儿童随机分成疫苗组和对照组。疫苗组每人接种1针甲肝疫苗,接种1mo后观察两组甲肝发病隋况。6-9岁的甲肝抗体(抗HAV)阴性儿童156例按年龄和性别均衡分为A、B、C组,A组接种1剂疫苗,B组按0、6 mo、C组按0、12 mo程序分别接种2剂疫苗,然后随访各组抗HAV变化。结果:甲型肝炎3a累积发病率在对照组为63.25/10万(71/112250),疫苗组为1.99/10万(2/100735),保护率96.85％(95％CI下限为92.44％)。A组免疫后6、12、24、36 mo抗HAV阳性率分别为91％、89％、89％、80％,抗体几何平均滴度(GMT)分别为106、105、106、99 mIU/ml;B组7、12、24、36 mo的阳性率分别为100％、98％、95％、98％,GMT分别为1204、773、489、459 mIU/ml,C组12、13、24、36 mo的阳性率分别为82％、100％、100％、97％,GMT分别为92、3463、596、506 mIU/ml。B、C组在第36个月的GMT分别是A组的4.6倍和5.1倍,阳性率高于同期A组(P=0.008)。结论:甲肝减毒活疫苗(LA-1株)1针免疫有高而持久的保护效果和免疫原性;2针免疫可显著提高其免疫持久性;0、6程序与0、12程序的长期免疫效果相同。

离心、超滤技术在甲型肝炎减毒活疫苗生产工艺中的应用

采用离心和超滤技术进行甲型肝炎减毒活疫苗生产 ,达到提高病毒的收获率。将含有甲型肝炎病毒的细胞收获液离心 ,上清进行超滤浓缩 ,回收病毒 ,病毒回收效果好。实验证明 ,该方法适合规模化生产。

冻干甲型肝炎减毒活疫苗与免疫规划疫苗同时接种疑似预防接种异常反应监测数据分析

目的分析国家免疫规划(NIP)主要使用的冻干甲型肝炎减毒活疫苗产品(HepA-L)与其他NIP疫苗同时接种后疑似预防接种异常反应(AEFI)的发生特征,初步评价其安全性,为日常同时接种提供参考。方法采用描述流行病学方法对中国免疫规划信息管理系统收集的2013~2018年Hep A-L与其他NIP疫苗同时接种AEFI个案数据进行分析。结果 2013~2018年,HepA-L与其他NIP疫苗同时接种AEFI共报告482例,主要人群为1~2岁儿童,男童多于女童。同时接种NIP疫苗共有10种,AEFI报告数排前3位为麻腮风联合减毒活疫苗、无细胞百白破联合疫苗、流行性乙型脑炎减毒活疫苗。Hep A-L分别与3类疫苗同时接种后,一般反应占86.11%~88.69%、异常反应占10.24%~13.89%。同时接种98.21%AEFI发生在0~3 d,各症状转归情况良好,无死亡病例。经与各NIP疫苗单独接种国家AEFI监测数据对比,同时接种未发生新的异常反应,未增加接种风险。结论在受种者身体健康、无禁忌症的情况下,HepA-L可与适龄段其他NIP疫苗同时接种,但需关注罕见严重异常反应的发生。

一种甲型肝炎灭活疫苗灭活验证试验方法的建立

目的探讨细胞培养/链特异性RT-PCR方法可否作为甲型肝炎(甲肝)灭活疫苗(L-A-1减毒株)的病毒灭活验证试验方法。方法根据甲肝病毒(HAV)L-A-1株基因组序列,设计5条基因特异性引物,提取HAV基因组RNA,应用设计的正向引物进行反转录,再进行两轮PCR扩增,通过检测HAV复制过程中的负链中间体,对甲肝灭活疫苗灭活验证试验方法进行探讨,并与《中华人民共和国药典》甲肝灭活疫苗HAV灭活验证试验方法进行比较。结果细胞培养/链特异性RT-PCR方法对HAV负链RNA特异、敏感。通过方法学验证试验表明,该方法的特异性、敏感性和重复性均良好。利用此方法对5批甲肝灭活疫苗(L-A-1减毒株)进行检测,结果全为阴性,与《中华人民共和国药典》甲肝灭活疫苗HAV灭活验证试验测定结果相同。结论细胞培养/链特异性RT-PCR方法快速、灵敏可靠,可作为检测甲肝灭活疫苗(L-A-1减毒株)HAV灭活验证试验的方法。

树鼩经甲型肝炎减毒活疫苗、乙型肝炎疫苗及联合硫酸乙酰肝素佐剂免疫后的免疫效果评价

目的探讨甲型肝炎减毒活疫苗(HepA-1)、乙型肝炎疫苗(Hbv)以及HepA-1、Hbv分别与佐剂硫酸乙酰肝素(HS)联合对树鼩进行免疫后树鼩体液免疫应答的影响。方法按照疫苗种类、佐剂以及免疫途径将树鼩随机分组,同时设空白对照组,分别于末次免疫后的4周、8周、12周、16周和20周尾静脉采血,用ELISA法检测树鼩血清中的特异性IgG抗体水平。结果除空白对照组外,实验组均在末次免疫的第四周检测到抗甲型肝炎病毒(HAV)及抗乙型肝炎病毒(HBV)抗体,抗体水平随着免疫时间延长而逐渐升高并于12周达到峰值,此后逐渐下降。同时,联合HS佐剂组的体液免疫效果均优于单纯疫苗免疫组。并且不同抗原以及联合佐剂采用不同的免疫途径免疫树鼩其免疫效果存在显著性差异。结论通过对树鼩进行疫苗免疫原性和增强免疫效果检测,证实以树鼩作为动物模型进行疫苗评价的可行性。

成人和儿童接种甲型肝炎灭活疫苗(Vero细胞)安全性和免疫原性研究

目的评价甲型肝炎灭活疫苗(Vero细胞)在成人及儿童中接种的安全性及其免疫原性。方法选择6-16岁、16岁以上2组人群,采用0、6月免疫程序接种,观察该疫苗的不良反应,抗体阳转率和抗体几何平均滴度(GMT)。结果儿童和成人剂量组局部、全身反应发生率分别为2.83%、3.06%(χ2=0.451,P>0.05)和10.3%、9.6%(χ2=1.424,P>0.05),差异均无统计学意义;免疫后1个月抗体阳转率分别为92.6%、93.5%(χ2=0.959,P>0.05),无统计学意义。两针全程免疫1月后两组抗体阳转率均达到100%,抗体几何滴度分别为16583m IU/ml、9762m IU/ml(t T1=1.65,P>0.05;t T7=1.37,P>0.05),差异无统计学意义。结论维罗信甲型肝炎灭活疫苗(Vero细胞)在儿童和成人中应用具有良好的安全性和免疫原性。

甲型肝炎灭活疫苗的研究

目的研制甲肝灭活疫苗。方法甲型肝炎病毒TZ84株、吕8株接种人胚肺二倍体细胞2BS、KMB17株,经培养繁殖、收获、提纯、甲醛溶液灭活和氢氧化铝吸附制成灭活疫苗。结果纯化的甲肝病毒经HPLC、SDS-PAGE等方法检测表明具有良好的纯度。灭活工艺经验证盲传三代证明灭活可靠。甲肝灭活疫苗在豚鼠、小白鼠、ICR小鼠、恒河猴和普通狨猴上具有良好的安全性和免疫原性;经539例临床研究表明,该疫苗儿童组和成人组副反应均轻微,全程免疫后接种者100％抗体阳转,儿童组0,6月注射500u全程免疫后抗体水平达4535mIU/ml,成人组注射500u 0,6月全程免疫后抗体水平为1657mIU/ml,均可获得较长期的保护效果;该疫苗2～8℃保存21个月、37℃保存32天,质量稳定。结论甲肝灭活疫苗安全、有效、稳定。

甲型肝炎灭活疫苗与减毒活疫苗的免疫效果分析

目的观察甲型肝炎灭活疫苗(灭活疫苗)和甲型肝炎减毒活疫苗(减毒活疫苗)基础免疫、加强免疫的效果。方法2004年对湛江市赤坎区寸金管区156名2～10岁儿童进行调查,检测抗一HAV水平。结果减毒活疫苗基础免疫后1个月抗一HAV阳性率为76.47%,灭活疫苗基础免疫后1个月抗-HAV阴性的儿童,加强接种减毒活疫苗1个月后抗-HAV全部阳性,几何平均浓度为508mlu/ml;加强接种灭活疫苗1个月后抗-HAV全部阳性,抗体几何平均浓度为3013mlu/ml。结论用减毒活疫苗进行基础免疫者需要加强接种,用灭活疫苗加强接种比用减毒活疫苗产生的甲肝抗体更高。

甲型肝炎减毒活疫苗(L-A-1)猴体安全性及免疫原性研究

[目的 ]研究甲型肝炎减毒活疫苗 (L A 1)猴体安全性及免疫原性。 [方法 ]对 10年来生产的甲型肝炎减毒活疫苗的猴体试验结果作回顾性分析 ,每年选取 1批制品 ,于当年接种 5只恒河猴 ,于 0、4、8周肝穿做肝组织病理检查及ALT检测 ,并于 0、2、4、8周采血测定 抗HAV阳转情况。 [结果 ]恒河猴接种甲肝疫苗后肝组织病理未见异常 ;8周时抗 HAV10 0 %阳转。 [结论

甲型肝炎减毒活疫苗H_2株免疫后3年的血清学效果研究

目的 研究规范化H2 株甲型肝炎 (简称甲肝 )减毒活疫苗免疫学效果和抗感染能力。方法 从30 42名 6～ 13岁儿童中筛选出甲肝病毒易感者 1117名 ,将他们随机分为疫苗组和对照组。疫苗组在接种后 6、36个月随机采样抽血检测血清甲肝抗体 (抗 -HAV)。结果 免疫后 6个月抗体转阳率达 92 8% ,几何平均滴度(GMT)为 1∶4 68。免疫后 36个月抗体阳性率为 92 3% ,GMT为 1∶2 75。免疫后 36个月疫苗组感染率为16 4% ,对照组感染率为 13 1% ,两组差异无显著性 (χ2 =2 44 ,P >0 0 5 )。结论 本疫苗具有良好的免疫原性。疫苗抗体可能只有抗发病能力 。