2022-2023年山东省A(H1N1)pdm09流感病毒HA、NA基因变异特征分析

目的 了解山东省2022-2023流感监测年度分离的A(H1N1)pdm09亚型流感病毒血凝素(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)基因的变异特征,为流感的防控提供科学依据。方法 从流感监测网络实验室分离的流感毒株中按地市随机选取14株A(H1N1)pdm09亚型流感毒株,以WHO推荐的当季疫苗株为参考进行全基因组测序,并采用荧光法开展神经氨酸酶抑制(neuraminidase inhibition,NI)实验以评估药物敏感性。结果 山东省2022-2023年度分离的A(H1N1)pdm09流感病毒属于6B.1A分支中的5a.2a进化簇,核苷酸序列比对分析显示,HA和NA基因与2021-2023年度北半球疫苗株A/Victoria/2570/2019的亲缘关系较为接近,同源性分别为98.5%~98.7%和98.8%~99.1%。氨基酸序列分析显示,HA蛋白有20个位点发生了氨基酸序列变异,并发现1株病毒可能发生抗原漂移,有3株病毒发生了HA蛋白糖基化位点的缺失。NA酶相关重要位点未发生变异。NI实验显示,所测流感毒株均对抗流感病毒药物敏感。结论 所监测毒株与疫苗株整体同源性很高,但氨基酸存在一定程度变异,今后有必要持续开展流感病毒基因变异特征监测以了解流感流行的风险,以及评价基因变异对流感疫苗和治疗药物效果的影响。

2017-2019年呼和浩特市甲型A(H1N1)pdm09流感病毒基因特征分析

目的了解呼和浩特市甲型A(H1N1)pdm09流感病毒遗传进化特征及抗原位点、糖基化位点和耐药位点的变异情况,为流感防控提供科学依据。方法采集2017-2019年呼和浩特市3家哨点医院的流感样病例(ILI)咽拭子标本进行核酸检测,阳性样本通过MDCK细胞和鸡胚进行病毒分离。随机抽取15株甲型A(H1N1)pdm09流感毒株进行基因测序分析。采用MEGA7.0.14软件、DNASTAR7.0.1软件和NetNGlyc1.0软件进行基因进化树分析、核苷酸同源性分析和糖基化位点分析。结果呼和浩特市2017-2019年15株甲型A(H1N1)pdm09分离株与疫苗株A/Brisbane/02/2018和A/Michigan/45/2015共同属于6B.1分支。各年度分离株与疫苗株A/Brisbane/02/2018的组间遗传距离分别为0.004、0.011和0.013。相较于疫苗株A/California/07/2009和A/Michigan/45/2015,2017年起甲型A(H1N1)pdm09病毒抗原位点变异较大,但与疫苗株A/Brisbane/02/2018相比并未发生抗原漂移现象,与疫苗株匹配效果较好。分离株与疫苗株A/California/07/2009相比多了糖基化位点162NQS/T。分离株与神经氨酸酶抑制剂耐药相关的9个关键氨基酸位点没有发生变异。结论随着时间推移,呼和浩特市甲型A(H1N1)pdm09流感病毒与疫苗株的基因相似性逐渐降低,提示呼和浩特市病毒在不断进化中,应持续监测。本次研究中的分离株与WHO推荐的2019-2020年北半球疫苗株A/Brisbane/02/2018相比未发生抗原漂移现象,WHO推荐的疫苗株对目前流行的甲型A(H1N1)pdm09流感仍有较好的保护效果。所有分离株NA基因均未发生H275Y耐药突变,提示呼和浩特市流行的甲型A(H1N1)pdm09流感仍然对奥司他韦等NA抑制剂药物敏感。

2015—2018年北京市东城区甲型H1N1pdm09亚型流感病毒分子流行病学特征分析

目的分析2015—2018年北京市东城区甲型H1N1pdm09亚型流感病毒的分子流行病学特征。方法收集2015年1月1日—2018年12月31日期间北京市东城区流感样病例的咽拭子样本,RT-PCR法检测核酸,阳性样本接种至MDCK细胞进行病毒分离,血凝抑制试验鉴定流感亚型。选取30株甲型H1N1pdm09亚型分离株,RT-PCR法扩增血凝素(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)基因序列,并测序。应用DNASTAR 5.0软件将HA、NA序列进行拼接,MEGA 6.0软件建立系统进化树,并进行遗传特征分析。结果共检测样本7533份,甲型H1N1pdm09亚型231份,阳性率为23.24%。30株甲型H1N1pdm09亚型分离株与WHO推荐的北半球疫苗株A-Brisbane-02-2018的HA基因核苷酸和氨基酸序列同源性分别为97.42%~99.53%和97.40%~99.32%;NA基因核苷酸和氨基酸序列同源性分别为98.11%~99.74%和97.72%~99.80%。HA基因共有16个氨基酸位点发生改变,NA基因共有10个位点发生改变;抗原受体结合位点、糖基化位点和耐药位点均未发生改变。结论2015—2018年北京市东城区甲型H1N1pdm09亚型流感病毒HA和NA基因位点发生了一些变异,但抗原性和耐药性未发生改变,与疫苗株匹配性较高。本研究为北京市东城区评价疫苗保护效果及制定流感防治措施提供了实验依据。

江苏省2013年甲型H1N1(09pdm)流感病毒血凝素和神经氨酸酶分子特征分析

目的 ：分析江苏省2013年甲型H1N1（09pdm）流感病毒血凝素（hemagglutinin,HA）和神经氨酸酶（neuraminidase,NA）变异情况,分析其遗传进化特征。方法 ：按照流感样病例定义,收集江苏省各哨点医院流感样病例标本,阳性样本经病毒分离培养及亚型鉴定。选取2013年不同时间段、不同地区具有代表性的14株甲型H1N1（09pdm）阳性毒株,利用特异性引物扩增HA、NA基因,测序并分析其遗传进化特征。结果 ：14株分离毒株与疫苗株A/California/07/2009（H1N1）的HA基因核苷酸和氨基酸同源性分别为97.6%~98.4%和96.5%~98.0%。NA基因核苷酸和氨基酸同源性分别为98.4%~98.9%和97.0%~98.5%。遗传进化分析表明,14株分离株HA和NA基因分属于不同的进化谱系。分子特征表现为HA氨基酸序列出现D114N、K300E、E516K的变异,NA分子特征表现为N44S位点变异。从2013年左右开始甲型H1N1（09pdm）流感基因多样性增加;通过FEL模型得到一个正向压力选择HA氨基酸位点310,一个正向压力选择NA氨基酸位点4,通过REL模型得到9个正向压力选择HA氨基酸位点179、180、239、301、303、310、311、312、313（含位点310）,5个正向压力选择NA氨基酸位点4、23、52、287、374（含位点4）。HA蛋白具有9个潜在糖基化位点,7个位于HA1上,2个位于HA2上;NA蛋白共有9个潜在糖基化位点。14株分离毒株在NA蛋白酶活性中心及周围辅助位点上均未发现变异。结论：2013年江苏省甲型H1N1（09pdm）流感HA、NA基因变异加快,遗传多样性增加,未来的遗传进化值得进一步关注。

2018-2019年广西A(H1N1)pdm09亚型流感病毒抗原性及HA基因特性分析

目的了解广西壮族自治区2018-2019年人群A(H1N1)pdm09亚型流感病毒抗原性及HA基因特性。方法对2018-2019年广西分离的199株A(H1N1)pdm09亚型流感病毒株用血凝抑制试验进行抗原分析,并对其中的15株进行HA基因序列测定分析。结果抗原分析的199毒株中有196株与疫苗株A/Michigan/45/2015类似,占98.49%。广西15株毒株的HA基因核苷酸序列与疫苗株A/Michigan/45/2015的同源性为97.83%~98.50%,氨基酸同源性为98.19%~99.10%。与疫苗株相比,广西15株毒株HA基因均存在S74R、S164T和I295V 3个氨基酸位点变异。广西毒株与疫苗株HA1的糖基化位点预测结果一致。系统进化显示广西毒株与疫苗株的HA基因均属于6B.1分支。结论 2018-2019年广西流行的A(H1N1)pdm09亚型流感病毒与疫苗株A/Michigan/45/2015组分匹配良好。

2018-2019监测年度吉林省A(H1N1)pdm09亚型流感病毒抗原性和基因特性分析

目的了解吉林省2018-2019监测年度A(H1N1)pdm09亚型流感病毒的抗原性和基因特性变异情况。方法用血凝抑制的方法对2018-2019监测年度分离的92株A(H1N1)pdm09亚型流感病毒进行抗原分析,用深度测序的方法对17株病毒进行序列测定,然后进行基因特性分析。结果抗原分析结果显示,检测的92株A(H1N1)pdm09亚型流感病毒与参考株A/Michigan/45/2015(H1pdm)比较,效价均无>8倍差异,抗原性相似。序列分析的结果显示,与WHO推荐北半球疫苗株比较,HA具有高度的同源性。结论2018-2019监测年度吉林省A(H1N1)pdm09亚型流感病毒的抗原性和HA基因特性没有发生明显变异。

1例甲型H1N1流感病毒合并高黏液型肺炎克雷伯菌感染患者俯卧位通气的护理体会

总结1例甲型H1N1流感病毒感染合并高黏液型肺炎克雷伯菌感染患者俯卧位通气的护理体会。护理要点:做好患者的评估,正确掌握俯卧位通气开始及结束的时机,保证治疗的安全有效;根据患者病情,选择合适的翻身方式,保护各管路,做好皮肤护理;运用Richmond躁动-镇静量表(RASS)和镇静-躁动评分(SAS)评分,做好镇痛镇静管理,提高患者的舒适度,保障有效通气。做好气囊管理,预防呼吸机相关性肺炎(VAP)的发生。观察患者有无反流及误吸,做好胃残余量的监测,保证营养供给。监测感染指标,预防导管相关感染。

人甲型禽流感病毒（H5N1亚型）感染研究最新进展

甲型禽流感病毒（H5N1亚型）（以下简称H5N1）感染是鸟类流行病，可引起人类致病，其死亡率高，可引起大流行。该文对世界卫生组织2005年版的禽流感报告进行了更新，并介绍了第二届世界卫生组织咨询会议上关于人甲型禽流感病毒（H5N1亚型）感染的临床表现方面的内容。

贵州省2022-2023年流感季A(H1N1)pdm09亚型流感病毒抗原性和血凝素基因特征

目的了解贵州省A(H1N1)pdm09亚型流感病毒抗原性和血凝素(Hemagglutinin,HA)基因特征。方法选取贵州省流感监测点2022年10月至2023年3月A(H1N1)pdm09亚型流感病毒分离株,采用红细胞凝集抑制试验检测抗原性,测定HA全基因组序列,构建遗传进化树,分析核苷酸同源性和氨基酸位点变异。结果共获得78株A(H1N1)pdm09亚型流感病毒,均鉴定为疫苗类似株。22株毒株获得HA全基因组序列,与疫苗株的核苷酸同源性为97.28%-99.14%;其中6B.1A.5a.2a、6B.1A.5a进化分支分别为19株、3株;19株发生Sb抗原决定簇的A186T和Q189E氨基酸替换并分布在1个抗原决定簇,3株发生Sa抗原决定簇的K156N和I161L氨基酸替换并分布在1个抗原决定簇。19株发生190位螺旋(184-191)A186T和Q189E以及220位环E224A氨基酸替换,3株发生220位环D222Y氨基酸替换,均发生在HA1区域。未发现糖基化位点变异。结论贵州省2022-2023年流感季A(H1N1)pdm09亚型流感病毒与疫苗株匹配性良好,但存在部分氨基酸位点变异。需加强流感病毒监测及其抗原性和基因序列分析,以利于流感防控策略制定和流感疫苗株筛选。

奥司他韦治疗甲型H1N1流感的疗效研究

目的评估奥司他韦在甲型H1N1流感病例救治中的临床疗效。方法 325例甲型H1N1流感病例被分成4组纳入研究,A组95例单服奥司他韦、B组97例口服奥司他韦和莲花清瘟胶囊、C组90例口服奥司他韦和板蓝根颗粒、D组43例单服莲花清瘟胶囊,评价第3天和第5天疗程时的临床症状和病毒学疗效。结果含有奥司他韦治疗组患者在体温复常率、临床症状消失率、咽拭子病毒阴转率方面均明显优于未含奥司他韦治疗组(P<0.05)。单用奥司他韦治疗组与奥司他韦联合板蓝根颗粒、莲花清瘟胶囊两个联合治疗组相比,体温复常率、临床症状消失率及咽拭子病毒阴转率方面的差异无统计学意义(P>0.05)。奥司他韦联合莲花清瘟胶囊治疗组在第3天、5天时的体温复常率和临床症状消失率均位居4个治疗组之首,但无统计学意义(P>0.05)。结论早期服用含奥司他韦的治疗方案可显著提高咽部甲型H1N1流感病毒清除率,缩短流感病程;联用莲花清瘟胶囊治疗可能有利于改善流感症状;板蓝根颗粒对疗效无影响。

2010-2012年福建省H3N2亚型流感病毒血凝素基因特征分析

目的通过对2010—2012年福建省分离的H3N2亚型流感毒株血凝素HA1基因进行分析，了解2010-2012年福建省H3N2亚型流感病毒的基因特征和变异规律。方法随机选择28株毒株，提取病毒RNA，采用RT-PCR扩增目的片段，纯化PCR产物后进行测序；利用DNAstar和Mega4．0等生物信患学软件进行核苷酸整理、拼接、校对、差异性比较以及基因进化树构建等分析研究。结果28株H3N2亚型流感病毒HAl区核苷酸同源性在96．4％～100％之间。基因系统进化分析显示，其进化规律都是沿着树枝主干随着时闻推移向，上延伸，序列的差异和年代成正比。2010—2012年间HAl区共出现43个氨基酸位点的变化，其中有10个氨基酸位点变异累计涉及4个抗原决定簇，2个变异位点发生在受体结合位点（RBS）及其附近，应予高度重视。结论相对于A／Perth／16／2009疫苗代表株，2012年的部分H3N2亚型流感出现了抗原漂移；部分毒株已出现氨基酸位点的改变，并涉及抗原决定簇及受体结合位点，提示2010—2012年福建省人群中流行的H3N2亚型流感正逐渐发生变异，应加强流感病原学监测，以及时发现新的流感变异株，为福建省流感防控提供科学依据。

甲型H1N1型流感患者外周血程序化细胞死亡分子5表达水平及其与疾病严重程度的相关性

目的甲型H1N1型流感具有传染性强、病毒易变异等特点,并可影响患者的生命安全。文中探讨甲型H1N1型流感患者外周血程序化细胞死亡分子5(PDCD5)表达水平及其与疾病严重程度相关性。方法回顾性分析2015年1月至2017年12月在河北大学附属医院就诊的104例甲型H1N1流感患者,根据病情严重程度分为轻症甲流组(n=78)和重症甲流组(n=26);同时选取同期健康体检受试者104例作为对照组。观察3组血常规、淋巴细胞计数和PDCD5水平。结果轻症甲流组和重症甲流组白细胞、中性粒细胞和淋巴细胞数量与对照组比较均显著降低(P<0.05);重症甲流组亦显著低于轻症甲流组(P<0.05);三组单核细胞相比较,差异无统计学意义(P>0.05)。轻症甲流组和重症甲流组PDCD5、淋巴细胞凋亡率与对照组比较均显著升高(P<0.05),重症甲流组亦显著高于轻症甲流组(P<0.05)。轻症甲流组和重症甲流组总T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞与对照组比较均显著降低(P<0.05),重症甲流组亦显著低于轻症甲流组(P<0.05)。PDCD5水平与患者病情严重程度和淋巴细胞凋亡率呈正相关(r=0.872、0.904,P<0.05),与总T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞呈负相关(r=-0.842、-0.805、-0.877,P<0.05)。PDCD5水平预测重症甲型H1N1的灵敏度为92.31%,特异性为97.25%,曲线下面积为0.941。结论甲型H1N1型流感病毒感染患者外周血PDCD5水平与患者疾病严重程度具有相关性。PDCD5水平可作为重症甲型H1N1预测的重要指标。

甲型流感H1N1临床轻型与肺炎型病情及实验室结果对比研究

目的探讨轻型与肺炎型H1N1甲型流感临床特点及实验室检查结果异同,为早期诊断肺炎型甲型流感提供依据。方法对承德市2009年9—12月经证实的206例甲型H1N1流感(全部)患者进行血常规、生化全项、胸部X线检查,疑为肺炎者进一步检查胸部CT。根据X线胸片有无片状阴影将全部患者分为轻型与肺炎型两组。结果肺炎组以0～7岁组和≥46岁组发病率最高,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。轻型组(19.9%)血白细胞总数低于正常人数百分比小于肺炎组(34.0%),差异有统计学意义(P=0.04),轻型组(77.6%)白细胞正常人数百分比大于肺炎组(50.0%),差异有统计学意义(P<0.001)。白细胞分类:肺炎组(60.0%)中性粒细胞比率高于正常人数百分比大于轻型组(42.9%),差异有统计学意义(P=0.036);肺炎组(28.0%)单核细胞比率低于正常人数百分比大于轻型组(5.1%),差异有统计学意义(P<0.001)。肺炎组(22.0%)血小板低于正常人数百分比大于轻型组(4.5%),差异有统计学意义(P=0.001)。肺炎组(20.0%)血红蛋白低于正常人数百分比大于轻型组(1.3%),差异有统计学意义(P<0.001)。血电解质:肺炎组血钾(K+)、钠(Na+)、氯(Cl-)低于正常人数百分比超过轻型组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清酶学检查发现除了肌酸激酶(CK)以外,肺炎组血清酶学高于正常人数比率均较轻型组高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论甲型H1N1发病年龄以8～45岁年龄组人群为高,但肺炎型患者则以0～7岁和≥46岁年龄组为多,性别对病情轻重可能没有影响。白细胞总数低于正常、中性粒细胞比率高于正常提示易患肺炎型H1N1流感。单核细胞比率、血小板计数、血红蛋白低于正常易患肺炎型H1N1流感。血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、肌酸激酶同工酶、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶高于正常,提示易出现肺炎型H1N1流感。

甲型H1N1流感的胸部影像学表现

目的观察甲型H1N1流感患者的胸片及CT表现。方法回顾性分析51例甲型H1N1流感患者(实验室确诊47例,临床诊断4例)初始胸片及CT检查的病变表现形式、分布特点及病变程度。结果甲型H1N1流感患者的胸片及CT检查最主要表现是双侧或单侧多发磨玻璃密度影,伴或不伴单发或多发实变区。CT显示病变主要沿支气管血管周围中心肺区和(或)胸膜下区分布。结论影像学诊断甲型H1N1流感时,结合病史非常重要。

重症甲型H1N1流感并肺炎的临床和影像学特点分析并文献复习(附39例病例报道)(英文)

目的探寻新型重症甲型H1N1流感的发病规律,积累诊治经验。方法回顾性分析中南大学湘雅二医院2009年甲型H1N1流感病房收治的诊断为重症甲型H1N1流感并肺炎的39例患者的临床和影像学特点,并结合文献复习。结果发病年龄2岁11月～57岁。既往有基础疾病的患者11例(28.2%),肥胖症1例(2.6%),妊娠4例(10.3%)。起病均有流感样症状(100%),10(25.6%)例出现活动后气促。血气分析提示4例为Ⅰ型呼衰,3例为低氧血症。胸部影像学表现主要为毛玻璃样模糊阴影的背景下,有局部散在、片状的高密度影,既有急性肺间质改变的表现,又有局灶肺实变的表现,但几乎未见典型的大叶性肺炎影像学改变。39例均为确诊病例。入院后立即给予奥司他韦抗病毒治疗,37例病例痊愈,2例患者死亡。结论年龄较大(大于60岁)的人群中发生重症甲流的病例很少,孕妇在此次甲型H1N1流感病毒流行中感染后较易发展为重症;重症主要并发肺炎,以双下肺野分布的磨玻璃样模糊阴影为其典型的影像学表现;发病时间超过48小时仍不应放弃奥司他韦抗病毒治疗。

上海地区猪群中H1N1甲型流感抗体检测

对2009年H1N1甲型流感流行前后的上海地区养殖场户410份猪血清样品,分别采用血凝抑制试验（hemagglutination inhibition,HI）和酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）进行检测H1N1甲型流感病毒和猪流感病毒（Swine in？uenza virus,SIV）。检测结果表明,除2007年外,2008~2010年猪血清中均存在不同水平的HI抗体,阳性率呈显著上升趋势,且抗体水平与猪群饲养周期及饲养密度正相关,而与猪流感病毒的流行无相关性。

社区及中西医结合治疗甲型H1N1流行性感冒的经验

目的总结甲型H1N1流行性感冒防治经验。方法分析378例确诊甲型H1N1流感病例的临床特征以及住院治疗与社区隔离治疗效果。社区治疗组240例,住院治疗组138例,住院治疗组分为抗病毒组67例及中药治疗组71例。结果住院治疗与社区隔离治疗临床效果无差异(P>0.05)。抗病毒组与中药治疗组临床疗效无差异(P>0.05)。结论对于传播速度快、流行广泛的呼吸道传染病可以采取社区隔离治疗,可以发挥中药治疗在防治呼吸道传染病中的重要作用。

一株从死亡黑天鹅中分离出H5N1亚型流感病毒株血凝素基因特性的研究

目的了解从黑天鹅分离H5N1亚型流感病毒株血凝素基因特性。方法用RT-PCR扩增目的基因,用PGBM-TVecTor(美国Promeqa公司)4℃过夜连接重组质检转入dH5α细菌,筛选阳性菌落,酶切鉴定。送六合通公司自动测序,然后进行进化树分析,并推导出基因树序列。结果从黑天鹅分离出H5N1毒株血凝素的重链区与轻链区连接肽的序列为R-E-R-R-R-K-R,即含一串碱性氨基酸,共有8个潜在的糖基化位点,其中6个位于重链区的第9、10、23、165、193和296位点上;其余2个位于轻链区的第154和213位点上。其HA基因进化树与无论从家禽还是从人中分离的均有差异。结论从黑天鹅中分离的H5N1亚型流感病毒为对禽是高致病性的,他的HA基因不同于从人和家禽中分离出的H5N1毒株。