目的:应用二甲基亚硝胺(DMN)建立肝纤维化大鼠模型,动态观察疏肝健脾活血方对肝纤维化大鼠肝组织中HIF-1α蛋白、VEGF m RNA表达的影响,探讨疏肝健脾活血方抗肝纤维化的作用机制。方法:90只大鼠随机分为正常2、4、6周组,模型2、4、6周组...目的:应用二甲基亚硝胺(DMN)建立肝纤维化大鼠模型,动态观察疏肝健脾活血方对肝纤维化大鼠肝组织中HIF-1α蛋白、VEGF m RNA表达的影响,探讨疏肝健脾活血方抗肝纤维化的作用机制。方法:90只大鼠随机分为正常2、4、6周组,模型2、4、6周组,中药2、4、6周组,共9组,每组10只。采用DMN腹腔注射建立肝纤维化大鼠模型,同时中药各组给予疏肝健脾活血方灌胃。观察各组大鼠肝纤维化病理形态学改变,Westernblot法检测肝组织HIF-1α蛋白,RT-PCR法检测肝组织VEGF m RNA表达情况。结果:与正常各组同期比较,模型各组及中药各组大鼠肝组织HIF-1α蛋白、VEGF m RNA表达量均增高(P<0.01,P<0.05);与模型各组同期比较,中药4、6周组肝组织HIF-1α蛋白、VEGF m RNA表达量均降低(P<0.05,P<0.01)。结论:疏肝健脾活血方可减轻肝脏纤维化程度;降低肝组织HIF-1α蛋白、VEGF m RNA表达量,可能是其抗肝纤维化作用机制之一。展开更多
文摘目的:研究急性移植物抗宿主病(acute graft-versus-host disease,a GVHD)患者CD4+T细胞中STAT3基因启动子DNA病理性低甲基化的分子调控机制。方法:收集行同胞全相合异基因造血干细胞移植的42例患者的血液样本。采用实时定量PCR和Western印迹检测各组患者生长阻滞与DNA损伤诱导蛋白45A(growth arrest and DNA damage-inducible protein 45 alpha,GADD45A)的表达水平,免疫共沉淀检测各组患者高迁移率族蛋白1(high mobility group box-1 protein,HMGB1)与GADD45A的结合水平,染色质免疫共沉淀检测各组患者HMGB1和GADD45A与STAT3启动子的结合水平;正常CD4+T细胞中过表达HMGB1及干扰GADD45A表达后用Western印迹检测STAT3表达水平,亚硫酸盐测序检测STAT3启动子区DNA甲基化水平。结果:与未发生a GVHD患者比较,a GVHD患者外周血CD4+T细胞中GADD45A表达水平明显升高;HMGB1与GADD45A的结合显著增加;HMGB1,GADD45A与STAT3启动子的结合水平均明显升高,且STAT3启动子区HMGB1,GADD45A结合水平与其DNA甲基化水平呈高度负相关(分别r=0.719,r=0.840;P<0.01)。与单纯过表达HMGB1相比,正常CD4+T细胞中过表达HMGB1叠加干扰GADD45A表达后STAT3表达明显降低,STAT3启动子DNA甲基化水平明显升高。结论:CD4+T细胞中HMGB1和GADD45A表达升高是异基因造血干细胞移植后患者STAT3启动子DNA低甲基化,STAT3高表达,进而诱发a GVHD的重要因素。
文摘目的:应用二甲基亚硝胺(DMN)建立肝纤维化大鼠模型,动态观察疏肝健脾活血方对肝纤维化大鼠肝组织中HIF-1α蛋白、VEGF m RNA表达的影响,探讨疏肝健脾活血方抗肝纤维化的作用机制。方法:90只大鼠随机分为正常2、4、6周组,模型2、4、6周组,中药2、4、6周组,共9组,每组10只。采用DMN腹腔注射建立肝纤维化大鼠模型,同时中药各组给予疏肝健脾活血方灌胃。观察各组大鼠肝纤维化病理形态学改变,Westernblot法检测肝组织HIF-1α蛋白,RT-PCR法检测肝组织VEGF m RNA表达情况。结果:与正常各组同期比较,模型各组及中药各组大鼠肝组织HIF-1α蛋白、VEGF m RNA表达量均增高(P<0.01,P<0.05);与模型各组同期比较,中药4、6周组肝组织HIF-1α蛋白、VEGF m RNA表达量均降低(P<0.05,P<0.01)。结论:疏肝健脾活血方可减轻肝脏纤维化程度;降低肝组织HIF-1α蛋白、VEGF m RNA表达量,可能是其抗肝纤维化作用机制之一。
