血清胶质纤维酸性蛋白、甲基化CpG结合蛋白2对脑胶质瘤的诊断价值及其与病理特征的相关性分析

目的探讨血清胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、甲基化CpG结合蛋白2(MeCP2)对脑胶质瘤的诊断价值及其与病理特征的相关性。方法回顾性选取2021年1月至2024年1月南京医科大学附属脑科医院(南京脑科医院)收治的80例脑胶质瘤患者,将其作为胶质瘤组,选取本院同期收治的80例非胶质瘤颅内良性肿瘤患者作为对照组。应用双抗体夹心法检测两组患者血清GFAP表达水平,应用荧光定量聚合酶链反应法检测肿瘤组织MeCP2表达水平。比较脑胶质瘤患者与对照组的GFAP、MeCP2表达水平,并建立ROC曲线分析GFAP、MeCP2对脑胶质瘤的诊断价值。分析不同病理特征脑胶质瘤患者GFAP、MeCP2表达水平,并采用Spearman相关性分析GFAP、MeCP2与脑胶质瘤病理特征的相关性。结果胶质瘤组患者GFAP、MeCP2表达水平分别为(81.74±7.47)ng/L、2.31±0.31,均高于对照组[(5.35±1.32)ng/L、0.72±0.16],差异均有统计学意义(P<0.05)。绘制ROC曲线结果显示,GFAP、MeCP2、两者联合诊断脑胶质瘤的曲线下面积(AUC)分别为0.721、0.698、0.897。GFAP、MeCP2两者联合对脑胶质瘤的诊断AUC高于两者单一诊断。病理分级Ⅳ级、远处转移患者GFAP水平均高于其他分级、未远处转移,差异均有统计学意义(P<0.05)。病理分级Ⅳ级、肿瘤大小≥3 cm、远处转移患者MeCP2水平均高于其他分级、肿瘤大小<3 cm、未远处转移患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关分析结果表明,GFAP与脑胶质瘤不同病理分级、远处转移均呈正相关(r=0.579、0.378,P<0.05);MeCP2与脑胶质瘤不同病理分级、远处转移、脑胶质瘤肿瘤大小均呈正相关(r=0.657、0.457、0.384,P<0.05)。结论胶质纤维酸性蛋白、甲基化CpG结合蛋白2对于脑胶质瘤均具有重要诊断参考价值,两者联合诊断敏感度、特异度更高,且两者与脑胶质瘤的病理分级、肿瘤大小、远处转移情况密切相关。

小鼠围着床期子宫内膜甲基化CpG结合域蛋白2的表达规律

为研究甲基化CpG结合域蛋白2(methyl-CpG binding domain protein 2,MBD2)在围植入期小鼠子宫内膜的表达规律,通过采用实时荧光定量PCR(Real-time fluorescence quantitative PCR,qPCR)、Western blot和免疫组化技术检测未孕小鼠(d0)和不同孕天小鼠子宫MBD2的表达情况。qPCR结果显示,d0至d7的小鼠子宫内膜组织均有MBD2 mRNA表达,在d5至d7高表达。MBD2蛋白在子宫内膜的表达规律与qPCR结果相符。MBD2蛋白在孕d1到d4中度表达于腔上皮、腺上皮和基质细胞,在d5至d7基质细胞表达增强,主要表达于蜕膜区。假孕小鼠子宫内膜中,MBD2在腔上皮、腺上皮和基质细胞中中度表达,d5至d7基质细胞表达明显减弱。动物模型中,宫角注射MBD2基因反义寡聚脱氧核苷酸,可抑制MBD2的表达,降低人工诱导蜕膜化反应和蜕膜化标志物PRL的表达。MBD2在早孕小鼠子宫内膜的表达模式提示其可能参与了蜕膜化过程。

系统性红斑狼疮患者甲基-CpG结合蛋白2基因表达水平及其与DNA甲基化相关性的初步研究

系统性红斑狼疮(SLE)是一种病因未明的累及全身多器官的慢性进行性病谱性自身免疫病。表观遗传学研究显示,DNA低甲基化为解释SLE发病机制和开发新的治疗策略提供了新的线索。DNA低甲基化通过促进CD11a/CD18、CD70等共刺激分子的表达,使得T细胞具有自身反应性。

组织TMEFF2基因甲基化状态与子宫内膜癌和子宫内膜增生的关系

目的分析含表皮样生长因子和卵泡抑素结构域的跨膜蛋白2(TMEFF2)基因甲基化状态与子宫内膜癌(EC)和子宫内膜增生的关系。方法选取2017年3月至2021年8月在该院妇产科住院的172例汉族女性为研究对象,包括91例EC患者(EC组)、36例子宫内膜增生患者(增生组)和45例子宫内膜正常女性(对照组)。采用实时定量焦磷酸测序检测TMEFF2基因3个CpG位点甲基化水平。根据甲基化指数(MI),将91例EC患者分为未甲基化组(MI<10%)、中低度甲基化组(MI为10%~30%)和高度甲基化组(MI>30%)。比较对照组、增生组、EC组临床资料,比较不同甲基化水平组各项临床和病理学特征。采用随机森林分类算法,根据变量在诊断中的重要性绘制出示意图,并对其进行排序,筛选鉴别诊断指标。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析TMEFF2基因CpG1位点甲基化水平对EC、增生子宫内膜及正常子宫内膜的鉴别诊断价值。结果EC组、对照组、增生组TMEFF2基因MI分别为24.53(9.20,65.78)、4.58(0.49,15.76)、13.67(2.95,28.76),EC组MI明显高于对照组和增生组,且增生组MI明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。未甲基化组、中低度甲基化组、高甲基化组的EC肿瘤(pT)分期、淋巴结转移状态(pN)分期、年龄分布情况比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。根据随机森林分类法,TMEFF2基因CpG1位点甲基化状态是仅次于体质量指数的重要诊断指标。ROC曲线分析结果显示,TMEFF2基因CpG1位点甲基化水平鉴别子宫内膜增生与正常子宫内膜、EC与子宫内膜增生的曲线下面积分别为0.700(95%CI:0.586~0.813,P<0.05)和0.933(95%CI:0.891~0.976,P<0.05)。结论TMEFF2基因CpG1位点甲基化异常与子宫内膜增生形成及增生组织进一步癌变密切相关,可作为潜在的预测因子。

DNA甲基转移酶与甲基化CpG结合结构蛋白2在胃肠间质瘤的表达

目的研究DNA甲基转移酶(DNMT)和甲基化CpG结合结构蛋白2(MBD2)在胃肠道间质瘤(GIST)的蛋白表达。方法采用免疫组织化学法与免疫印迹法对28例成人GIST标本及配对对照标本进行DNMTs与MBD2的蛋白表达研究。结果 DNMT1、DNMT2、DNMT3a、DNMT3L、MBD2蛋白在GIST中表达显著高于配对对照组织,差异有统计学意义(P<0.05),但DNMT3a在GIST的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 GIST表达DNMTs(除外DNMT3a)和MBD2更显著。

甲基化CpG结合域蛋白1在胰腺癌组织中的表达和意义

目的:检测甲基化CpG结合域蛋白1(MBD1)蛋白在胰腺癌组织中的表达,并探讨其临床意义。方法:应用S-P免疫组织化学法检测38例胰腺癌、17例胰腺癌旁组织、8例胰腺良性肿瘤、3例慢性胰腺炎和6例正常胰腺组织中MBD1蛋白的表达。结果:MBD1在胰腺癌组织、正常胰腺组织、胰腺良性肿瘤、胰腺癌旁组织中的表达阳性率分别是76.32%(29/38)、16.67%(1/6)、25.0%(2/8)、29.41%(5/17),3例慢性胰腺炎标本中未见表达;胰腺癌阳性表达率明显高于正常胰腺、慢性炎症、良性肿瘤和癌旁对照组织(P<0.05)。MBD1表达水平的高低与病人的性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、分化程度和TNM分期无显著性差异(P>0.05);而与淋巴结转移密切相关,有淋巴结转移者胰腺癌组织MBD1的表达阳性率为92.31%(24/26),高于无淋巴结转移者的41.67%(5/12)(P<0.01)。结论:胰腺癌中MBD1呈高水平表达,并与胰腺癌的高转移侵袭活性有关,其机制可能与MBD1介导抑制多个甲基化相关抑癌基因的表达有关。MBD1的转录调控机制有待进一步研究。

甲基化CpG结合结构蛋白2在胃癌的表达及靶向抑制

目的:研究甲基化CpG结合结构蛋白2(methyl-CpG-binding domain protein 2,MBD2)在胃癌的表达及靶向抑制。方法:免疫组化法对40例胃癌及配对胃黏膜组织,免疫荧光法对胃癌细胞SGC-7901行MBD2表达研究。构建3个靶向抑制MBD2的siRNA(MBD2-siRNA-1、MBD2-siRNA-2、MBD2-siRNA-3)。转染MBD2-siRNA入SGC-7901,RT-PCR及Western blot验证MBD2的抑制效果。噻唑蓝比色法检测SGC-7901增殖率。结果:胃癌组织MBD2表达较对照胃黏膜组织增强(χ2=6.646,P=0.010);且低分化胃癌与伴幽门螺杆菌感染的胃癌中MBD2表达更强(χ2值分别为9.730、8.700,P值分别为0.01和0.04)。MBD2蛋白在胃癌胞核分布。MBD2-siRNA可成功转染SGC-7901,并成功筛选靶向抑制MBD2的siRNA(MBD2-siRNA-2)。发现转染MBD2-siRNA-2后96 h,SGC-7901增值率被抑制。结论:MBD2在胃癌表达增强,抑制MBD2可能抑制胃癌增殖。

急性脑梗死患者静脉溶栓前后闭锁蛋白、甲基CpG结合蛋白2、钙调蛋白表达与功能结局的关系

目的:分析急性脑梗死(ACI)患者静脉溶栓前后闭锁蛋白(Occludin)、甲基CpG结合蛋白2(MECP2)、钙调蛋白(CAM)表达与功能结局的关系。方法:选取2020年1月-2022年1月我院收治的ACI患者134例作为ACI组,同期进行健康体检的健康志愿者50例作为NC组。使用酶标仪测定Occludin、MECP2、CAM水平,在ACI患者静脉溶栓后90d时,使用日常生活活动能力量表评价功能结局,根据ACI患者静脉溶栓后功能结局分为结局不良组、结局良好组两个亚组。分析ACI患者静脉溶栓前后Occludin、MECP2、CAM表达变化及与功能结局的关系。结果:ACI组Occludin水平低于NC组,MECP2、CAM水平高于NC组,差异具有统计学意义(P<0.05)。ACI患者溶栓后90d Occludin水平高于溶栓前,MECP2、CAM水平低于溶栓前,差异具有统计学意义(P<0.05)。结局不良组Occludin水平低于结局良好组,MECP2、CAM水平高于结局良好组,差异具有统计学意义(P<0.05)。由Pearson相关性分析发现,Occludin、MECP2、CAM与ACI患者静脉溶栓后功能结局相关(均P<0.05)。ROC曲线显示,相比于Occludin、MECP2、CAM单项预测,三项联合预测效能最佳,三项联合预测的AUC为0.912(95%CI=0.828~1.036),敏感度为89.00%,特异度为81.50%,P<0.001。结论:ACI患者Occludin水平降低,MECP2、CAM水平升高,静脉溶栓可改善Occludin、MECP2、CAM水平,而溶栓功能结局不良与Occludin、MECP2、CAM异常有关。

用变性高效液相色谱术筛查甲基化CpG结合蛋白2基因变异

目的用变性高效液相色谱(denaturing high-performance liquid chromatography,DHPLC)分析和DNA测序筛查甲基化CpG结合蛋白2(methyl-CpG-binding protein 2,MECP2)基因突变,评价DHPLC检测MECP2基因变异的可用性。方法建立检测MECP2基因变异的DHPLC分析法,对52例孤独症患儿MECP2基因3个外显子分为8个片段进行PCR扩增,扩增产物用DHPLC筛查,并以DNA测序验证。结果在Exon 4-1、4-2、4-3、4-4片段,分别发现有17个、2个、2个和1个样本峰型异常,DNA测序分析发现为6种MECP2基因变异。结论DHPLC技术可用于检测MECP2基因变异,方法敏感、重复性好。

甲基CpG结合域四聚体蛋白的原核表达、纯化及鉴定

目的在大肠埃希菌中表达甲基CpG结合域四聚体蛋白,并对其进行纯化和鉴定。方法将重组表达质粒4×MBD-pET30b+转化大肠埃希菌DH5a克隆扩增并测序鉴定后,转化大肠埃希菌BL21(DE3)后接种于LB培养基中,异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白的表达,表达产物经Ni-NTA亲和层析纯化,通过SDS-PAGE和Western blot鉴定蛋白表达,用此蛋白免疫染色人胚肾细胞后用荧光显微镜观察。结果克隆质粒测序结果与理论预期完全一致,SDS-PAGE显示在大肠埃希菌中表达出相对分子量为46000的目标蛋白,Western blot显示目标蛋白带有His融合标签(氨基端)和HA标签(羧基端)。荧光显微镜观察显示MBD蛋白能与细胞内的甲基化CpG基序特异性结合。结论成功表达并纯化了具有免疫原性的甲基CpG结合域四聚体蛋白,为今后进一步研究DNA甲基化奠定了基础。

甲基化CpG结合域重组蛋白的表达与鉴定

目的:在大肠杆菌中表达甲基化CpG结合域(methyl-CpG-binding domain,MBD)重组蛋白。方法:对人甲基化CpG结合蛋白2(methyl-CpG-binding protein 2,Mecp2)的MBD区行密码子优化,将人工合成的DNA克隆至原核表达载体pGS21a,在大肠杆菌E.coli Rosetta(DE3)中诱导表达,通过SDS-PAGE和Western blot鉴定蛋白表达;镍亲和层析柱纯化重组蛋白。表面等离子共振分析重组MBD蛋白与甲基化DNA的结合能力。结果:酶切和核酸测序证实,成功构建了含密码子优化的MBD基因的原核表达载体。SDS-PAGE和Western blot结果显示,MBD重组蛋白在大肠杆菌中得到表达。亲和层析法纯化后获得了相对分子量为38 000的MBD重组蛋白。SPR分析显示MBD重组蛋白能特异结合甲基化DNA。结论:成功构建含密码子优化的MBD基因的原核表达载体,MBD重组蛋白能在大肠杆菌中表达。

甲基化SIM2、GNA12、CTGF在子痫前期孕妇中表达水平及其对疾病的预测价值

目的 探究子痫前期孕妇血浆中甲基化DNA的表达水平及对子痫前期发生的预测价值。方法 纳入2022年1-12月在该院确诊的82例子痫前期孕妇作为观察组,另外纳入82例健康孕妇作为对照组。提取患者游离总DNA,经过DNA亚硫酸氢盐修饰后通过实时荧光定量PCR反应(qRT-PCR)检测患者血浆中甲基化单意同源物2(SIM2)、结缔组织生长因子(CTGF)及鸟嘌呤核苷酸结合蛋白(GNA12)基因的相对表达水平,并采用相关性分析及受试者工作特征(ROC)曲线对各甲基化DNA预测子痫前期发生的价值进行评估。结果 观察组血浆甲基化SIM2、GNA12、CTGF相对表达水平均高于对照组(P<0.05),且重度子痫前期孕妇各甲基化DNA相对表达水平更高(P<0.05)。相关性分析结果表明,血浆甲基化SIM2、GNA12、CTGF相对表达水平与孕妇发生子痫前期均呈正相关(P<0.05)。ROC曲线分析结果表明,血浆甲基化SIM2、GNA12、CTGF相对表达水平单独及联合检测对预测孕妇子痫前期的效能均较好,且三者联合检测的预测效能最高(曲线下面积为0.888,95%CI:0.827~0.949)。结论 相较于健康孕妇,子痫前期孕妇血浆中甲基化SIM2、GNA12、CTGF相对表达水平均较高,且其与孕妇子痫前期的发生率呈正相关,血浆甲基化SIM2、GNA12及CTGF相对表达水平有望成为判断子痫前期是否发生的重要指标。

甲基化CpG结合域蛋白1和VIMENTIN在胰腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨甲基化CpG结合域蛋白1(MBD1)和VIMENTIN蛋白在胰腺癌组织中的表达情况及其与胰腺癌临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学方法检测40例经手术切除的胰腺癌组织和10例良性肿瘤患者的正常胰腺组织中MBD1和VIMENTIN蛋白的表达。结果在40例胰腺癌标本中有28例(70.0%)MBD1呈阳性表达,16例(40.0%)VIMENTIN蛋白呈阳性表达,显著高于正常胰腺组织标本的1例(1/10)和0例(P值均<0.05)。MBD1与VIMENTIN蛋白的阳性表达呈正相关(r=0.423,P=0.012)。在有淋巴结转移的胰腺癌中的MBD1表达阳性率显著高于无淋巴结转移的胰腺癌(P=0.023)。在病理分化较差和有淋巴结转移的胰腺癌中的VIMENTIN表达阳性率显著高于病理分化较好及无淋巴结转移的胰腺癌(P值分别=0.027、0.003)。结论胰腺癌组织中存在MBD1和VIMENTIN的过表达,并与病理分级和淋巴结转移有关,MBD1可能通过调控甲基化过程,干预VIMENTIN的表达,在胰腺癌的发生、发展中起到重要作用。

脑内甲基化CpG结合蛋白2在物质成瘾中的作用

物质成瘾是一种慢性复发性脑病。成瘾物质诱导脑内神经适应性的改变一定程度上由表观遗传机制介导。DNA甲基化、组蛋白修饰和染色质重塑影响组织或脑内的基因表达永久性改变,最终导致个体行为异常。甲基化CpG结合蛋白2(methyl-CpG binding protein 2,MeCP2)作为一种重要的转录抑制因子,其含有的特征性结构域,具有调节染色体构象、转录激活和参与RNA剪切等功能。也已证实,在脑发育过程中,MeCP2在调控神经元可塑性和相关靶基因的转录方面有重要作用,这引起了人们对神经元功能中表观遗传重要性的关注。研究证实,DNA甲基化、组蛋白乙酰化和磷酸化调控MeCP2基因表达水平,影响学习、记忆和物质成瘾中基因和蛋白质转录、翻译和细胞调控。成瘾物质诱导机体产生身体和精神依赖,这些改变与成瘾神经环路中神经元可塑性和基因表达水平变化有关,而MeCP2在调节中枢神经系统突触传递和可塑性中发挥重要作用。因此,探究MeCP2在调控中枢神经系统神经元可塑性中的作用具有重大的科学意义。本文将就MeCP2的结构与功能,MeCP2与表观遗传的关系,以及不同成瘾性物质诱导的MeCP2表观遗传修饰在物质成瘾中的作用进行综述,以期深入理解物质成瘾的分子机制,并为临床干预提供新思路。

Rett综合征临床分析及甲基化CpG结合蛋白-2基因调查

目的探讨甲基化Cp G结合蛋白2（MECP2）基因突变在4例疑似Rett综合征（RTT）患者中的致病作用及基因测序对协助诊断RTT的意义。方法选择2014年4-8月重庆医科大学附属成都市妇女儿童中心医院收治的4例疑似RTT患者,即病例1、2、3、4,病例1为家族先证者,病例2为病例1的母亲,病例3、4为散发患者,家系依次为A、B、C。对4例患者进行临床资料分析、家系调查、核型分析等,并对患者及其父母MECP2基因进行聚合酶链反应扩增测序。结果病例1、4通过2010年最新RTT的修订诊断标准及基因诊断确诊,病例2、3的临床诊断不成立但发现致病基因突变,病例1、2为国内首例母女同患RTT,其MECP2基因测序为同一个国内未报道的突变位点,病例3、4家系中发现已有文献报道的致病位点突变。结论 RTT临床诊断可能与基因诊断结果不一致,基因诊断对确诊RTT,尤其是临床症状不典型的病例具有重要价值;疑诊患者早期完成基因诊断可降低医疗成本、早期开始康复训练并辅助优生优育。

甲基CpG结合蛋白2(MeCP2)遏制HEK293细胞甲基化修饰的IL-6启动子活性及其分子机制

目的 在HEK293细胞甲基化修饰白细胞介素6(IL-6)启动子序列并过表达甲基CpG结合蛋白2(MeCP2)以及转录因子P300,探讨MeCP2抑制IL-6转录活性的分子机制。方法 通过电泳迁移率实验(EMSA)对P300 IL-6启动子区域的P300结合位点进行验证,IL-6启动子序列连接于荧光素酶报告质粒并转染HEK293细胞,同时利用规律间隔的成簇短回文重复序列-去活性Cas9核酸酶-DNA甲基转移酶3A(CRISPR-dCas9-DNMT3A)转染介导启动子的甲基化修饰,再转染MeCP2以及P300过表达质粒。亚硫酸氢盐测序PCR分析各组IL-6启动子区域胞嘧啶甲基化修饰情况;Western blot法检测胞内MeCP2、 P300蛋白水平;通过化学发光检测仪测定HEK293荧光素酶活性,并结合染色质免疫沉淀-测序技术(ChIP-seq)分析各组P300以及MeCP2在IL-6启动子区域的结合水平。结果 EMSA证实小鼠IL-6启动子部位存在P300结合位点;CRISPR-dCas9-DNMT3A转染HEK293细胞能够成功甲基化小鼠IL-6启动子;MeCP2以及P300过表达质粒能够稳定合成目标蛋白,且不受其他转染影响。相比于未被修饰的启动子,甲基化修饰可降低启动子转录活性,且于P300过表达情况下,较之单纯甲基化修饰,过表达MeCP2还将进一步遏制启动子转录活性。此外,甲基化修饰的启动子与MeCP2结合后,过表达P300未提升启动子转录活性;而在其他转染条件下,过表达P300均能促进转录活性。Chip-seq分析进一步表明,启动子的甲基化修饰并不干扰P300结合;然而甲基化修饰的启动子与MeCP2结合后,P300与启动子的结合则受到抑制。结论 MeCP2与甲基化修饰的IL-6启动子相结合,可阻遏转录因子与启动子结合,从而进一步抑制启动子的转录活性。

甲基化结合蛋白2对人胰腺癌PANC1细胞增殖和迁移的影响

目的:探讨甲基化结合蛋白2(methyl-CpG-binding protein 2,MeCP2)对人胰腺癌PANC1细胞增殖和迁移能力的影响。方法:采用qRT-PCR和免疫印迹法检测MeCP2在PANC1、Pa Tu8988、SW1990 3种胰腺癌细胞株中的表达水平;将干扰质粒sh MeCP2(实验组)与对照质粒sh EGFP(对照组)分别转入PANC1细胞中,CCK-8和克隆形成实验检测细胞增殖能力,Transwell检测细胞迁移能力。结果:MeCP2在3种胰腺癌细胞中差异性表达。与对照组相比,实验组PANC1细胞中MeCP2 mRNA和蛋白表达明显降低(t分别为6.58,8.42,P均<0.05);细胞相对增殖率、细胞克隆形成数及迁移能力明显降低(P均<0.05)。结论:下调MeCP2表达可降低胰腺癌PANC1细胞的增殖和迁移能力。

5-杂氮-2′-脱氧胞苷对宫颈癌细胞生长及其甲基化转移酶和甲基结合蛋白DNA转录的影响

目的:检测5-杂氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对体外培养的宫颈癌HeLa细胞中DNA甲基化转移酶(DNMT)及甲基CpG结合蛋白(MeCP)的DNA转录水平的影响,探索其对肿瘤细胞生长的抑制作用。方法:5-Aza-CdR(终浓度为5.0μmol.L-1)与肿瘤细胞共培养72h后,用PI染色及流式细胞仪(FCM)检测肿瘤细胞的细胞周期;利用qRT-PCR鉴定药物组与空白组细胞DNMT及MeCP的mRNA浓度。吖啶橙(AO)细胞荧光染色法鉴定药物组与空白组细胞形态学上的差异及凋亡的程度。结果:FCM检测结果显示两组肿瘤细胞的细胞周期呈现明显差异,并且药物组细胞表现为G0/G1期阻滞,sub-G1峰明显。AO染色表明药物组细胞有明显凋亡迹象且伴随少量的细胞坏死现象。qRT-PCR结果显示,空白对照组和药物组中均有一定量DNMT及MeCP的mRNA产物,但其mRNA表达量无显著差异(P>0.05)。结论:5-Aza-CdR能够诱导体外培养的HeLa肿瘤细胞凋亡,而对于肿瘤细胞中甲基化转移酶及甲基CpG结合蛋白的DNA转录无显著的影响。