甲基尿石素A对油酸诱导的Huh-7细胞脂质累积的改善作用及其机制研究

目的:研究甲基尿石素A对油酸诱导的人肝癌Huh-7细胞脂质累积的改善作用及机制。方法:采用油酸诱导建立细胞脂质累积模型。取Huh-7细胞,分为对照组(培养基)和模型组(1 mmol/L油酸)、低剂量药物组(1 mmol/L油酸+10μmol/L甲基尿石素A)和高剂量药物组(1 mmol/L油酸+20μmol/L甲基尿石素A),采用油红O染色法观察细胞中脂质累积情况;采用三酰甘油(TG)酶法测定细胞内TG含量,采用聚合酶链式反应(PCR)法检测细胞中脂肪酸合成酶(FASN)、胆固醇调节元件结合蛋白1(SREBP-1)、过氧化物酶体增殖剂激活受体α(PPAR-α)、PPAR-γ的m RNA表达水平;采用Western blotting法检测细胞中FASN的蛋白表达水平。结果:采用油酸诱导后,细胞膜周围出现大量脂滴累积;细胞内脂质及TG含量均显著升高,FASN、SREBP-1、PPAR-γ的mRNA表达水平及FASN的蛋白表达水平均显著升高,PPAR-α的mRNA表达水平显著降低(P<0.01)。采用甲基尿石素A干预后,细胞膜周围的脂滴明显减少;细胞中脂质及TG含量均显著降低,FASN、SREBP-1、PPAR-γ的mRNA表达水平及FASN的蛋白表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:甲基尿石素A对油酸诱导的Huh-7细胞脂肪累积有一定的改善作用,其机制可能与下调FASN、SREBP-1、PPAR-γ等相关因子的表达,抑制脂肪酸从头合成、促进脂质代谢有关。

甲基化尿石素A对油酸诱导的HepG2细胞脂肪变性的抑制作用

目的:研究甲基化尿石素A(methylated urolithin A; CH3OUro A)对油酸诱导的Hep G2细胞脂肪变性的影响。方法:采用油酸诱导Hep G2细胞脂肪变性,运用CCK8细胞活力检测法、油红O染色法、三酰甘油(TG)含量测定法和ALT/AST含量测定法,评价CH3OUro A对油酸诱导的Hep G2细胞脂肪变性的作用;运用实时荧光定量PCR法检测FASN、SREBP-1、PPARα和PPARγ等基因mRNA表达,探讨CH3OUro A对油酸诱导的Hep G2细胞脂肪变性的作用机制。结果:CH3OUro A在20μM、40μM能改善油酸诱导Hep G2细胞脂肪累积;显著降低脂肪变性模型中脂质含量和TG含量;同时还能显著降低脂肪变性模型中ALT、AST的含量;显著降低脂肪变性模型中FASN、SREBP-1和PPARγ的mRNA表达水平;上调该模型中PPARα的mRNA表达水平。结论:CH3OUro A对油酸诱导的Hep G2细胞脂肪变性有一定的改善作用,该作用与调控肝细胞中FASN、SREBP-1、PPARα和PPARγ基因的表达有关。