甲基核糖苷制备条件的优化

甲基核糖苷是制备核酸类药物的一个重要中间体,以甲醇和核糖为原料制备。本文优化了甲基核糖苷的制备条件。确定影响甲基核糖苷质量和收率的主要因素为:催化剂的用量、反应温度、以及反应完成与终止反应之间的时间间隔。在最佳条件下,制备得到了高收率和质量合格的甲基核糖苷。并分析了不同制备条件影响甲基核糖苷质量和收率的原因。

RNA甲基化“阅读器”蛋白YTHDF2在急性髓系白血病中的作用

目的探讨RNA甲基化修饰(m6A)特异性"阅读器"蛋白YTHDF2在急性髓系白血病人外周血单个核细胞中的表达水平改变,并研究YTHDF2对急性髓系白血病细胞增殖、分化的影响。方法分别收集急性髓系白血病患者以及正常人外周血的单个核细胞,实时定量PCR检测YTHDF2 mRNA在其中的表达差异;分别使用特异性靶向YTHDF2的siRNA和对照siRNA转染急性髓系(单核系)白血病细胞系THP-1细胞;通过CCK-8法检测细胞增殖;通过流式细胞计量术检测细胞向单核系分化的情况;使用放线菌素D处理结合实时定量PCR检测YTHDF2对其下游靶基因MZF1 mRNA稳定性的影响;用Western blot检测下游靶基因MZF1蛋白表达。结果 YTHDF2 mRNA在急性髓系白血病患者中的表达水平显著高于对照组正常人;敲低内源性YTHDF2的表达可以抑制THP-1细胞的增殖(P<0. 05);同时促进PMA诱导的THP-1单核细胞分化; YTHDF2可通过影响靶基因MZF1 mRNA的稳定性,抑制MZF1蛋白水平的表达(P<0. 05)。结论 YTHDF2靶向抑制MZF1的表达,在急性髓系白血病发生发展中发挥促癌功能。