甲基丙烯酸环氧丙酯对人支气管上皮细胞周期及凋亡影响的研究

目的探讨甲基丙烯酸环氧丙酯（GMA）对人支气管上皮细胞周期及凋亡的影响。方法人支气管上皮细胞（16HBE）经1-16μg/ml剂量的GMA染毒不同次数后,应用流式细胞仪（FCM）检测细胞周期及凋亡率的改变,同时测定细胞分裂指数（MI）。结果经1次染毒处理后,随着染毒剂量的增加,G0/G1期细胞显著减少（P〈0.01）,S期和G2/M期细胞显著增加,凋亡细胞数增多,细胞分裂指数下降;随着染毒次数的增加,各剂量组细胞周期均明显阻滞于G0/G1期,但高剂量组细胞仍表现出S期和G2/M期增多现象;经3次染毒后,高剂量组细胞出现凋亡率下降、分裂指数升高现象。结论经GMA染毒处理后,16HBE细胞周期由G0/G1期向S期和G2/M期移动而呈现增殖性改变。

甲基丙烯酸环氧丙酯诱导细胞转化的部分相关cDNA的克隆

在甲基丙烯酸环氧丙酯 (GMA)体外诱导建立人胚肺成纤维细胞 (HEL F)恶性转化模型的基础上 ,采用 m RNA差异显示 PCR(DD- PCR)技术 ,对恶性转化细胞与正常细胞之间基因的差异表达进行比较分析。结果显示 ,两种细胞在基因表达方面存在明显差异。已克隆到的 3个差异表达的基因片段分别与人乳腺癌转录因子 (ZABC1)、Tbx3和小鼠 E2基因高度同源 ,并在转化细胞中均呈明显的上调表达。结果提示 ,包括 ZABC1、Tbx3和 E2在内的多个基因的激活与失活可能与

甲基丙烯酸环氧丙酯致人支气管上皮恶性转化细胞DNA修复基因点突变的研究

背景与目的:研究甲基丙烯酸环氧丙酯(glycidyl methacrylate,GMA)致人支气管上皮(16HBE)恶性转化细胞DNA修复基因点突变情况。材料与方法:采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)检测GMA致16HBE恶性转化细胞DNA修复基因hMSH2、XRCC1、XPD及XRCC3的重要位点的突变情况,并以DNA测序方法加以验证。结果:16HBE细胞hMSH2IVS12-6(T>C)位点发生了突变,由野生基因型TT型突变为TC基因型,其它位点未检测到突变。DNA测序结果相符。结论:错配修复基因hMSH2IVS12-6(T>C)位点的突变可能为GMA诱导人支气管上皮细胞恶性转化过程中的重要起始分子事件之一。

甲基丙烯酸环氧丙酯毒性的研究进展

甲基丙烯酸环氧丙酯(glycidyl methacrylate,GMA)作为一种缩水甘油醛的衍生物主要用于化工材料的合成。大鼠急性经口毒性LD50为597mg/kg,按分级标准属低毒;大鼠蓄积毒性4478.6mg/kg,蓄积系数为8.36,属于弱蓄积性;皮肤涂抹具有明显的刺激性和致敏性;大鼠重复口服染毒可出现血液、生化指标异常及多种组织器官的损伤;在体内外多项致突变试验的结果呈阳性;存在生殖毒性和致畸毒性;并可诱导多种哺乳类细胞发生恶性转化,具有高度可疑的致癌性。GMA在动物体内是由还氧化物水化酶和羧酸酯酶催化而代谢。目前,有许多研究从DNA分子、细胞染色体损伤等方面对GMA的毒性作用机制进行了深入探讨,并为有针对性地对职业工人和易感人群采取职业防护措施提供实验依据。

甲基丙烯酸环氧丙酯致人支气管上皮细胞恶性转化过程中相关基因表达变化的研究

目的:对采用人类全基因组芯片检测到的甲基丙烯酸环氧丙酯(glycidylmethacrylate,GMA)致人支气管上皮(16HBE)细胞恶性转化过程中差异基因进一步进行其表达改变的研究。方法:采用实时定量PCR技术分析GMA诱导16HBE细胞恶性转化过程中,第10代(转化前期)和第30代(转化后期)细胞的信号转导和有丝分裂相关基因C19orf20、RGS14、EPB49、PSCA、CENPF、CTGF、RASD1的表达。结果:C19orf20、RGS14基因在转化前期细胞中表达分别上调421%、178%;CENPF、CTGF基因在转化后期细胞中表达分别下调93%、77%;EPB49基因在转化前期、转化后期细胞中表达分别上调191%、116%;PSCA基因在转化前期、转化后期细胞中表达分别上调593%、119%;RASD1基因在转化前期细胞中表达上调231%,而在转化后期细胞中表达下调74%。结论:GMA致16HBE细胞恶性转化过程是涉及多基因共同作用的复杂过程,C19orf20、RGS14、EPB49、PSCA、CENPF、CTGF、RASD1基因的异常表达可能在该过程中起着重要作用。

UHMWPE辐射接枝甲基丙烯酸环氧丙酯的研究

采用γ射线辐照技术在超高摩尔质量聚乙烯(UHMWPE)微粉表面接枝甲基丙烯酸环氧丙酯(GMA)。对辐照剂量、GMA用量及UHMWPE用量与接枝率的关系进行了研究;用红外光谱、DSC及扫描电镜对接枝物进行了测试。研究发现:在辐照接枝反应中,辐照剂量大于20kGy时,接枝效率较高,GMA的接枝率主要受单体浓度的控制。由于GMA的引入降低了链段的规整度,UHMWPE接枝物的熔点降低,熔融热减小;接枝后UHMWPE的表面比纯UHMWPE表面粗糙,孔洞减小。

甲基丙烯酸环氧丙酯致16HBE细胞恶性转化不同时期METTL9基因甲基化状态分析

目的:分析甲基丙烯酸环氧丙酯(GMA)致人支气管上皮(16HBE)细胞恶性转化不同时期甲基转移酶样基因METTL9甲基化状态及其表达情况,并探讨其意义。方法:收获GMA染毒第10代(早期)、20代(中期)、30代(后期)的16HBE细胞,应用甲基化芯片检测METTL9基因在GMA诱导16HBE细胞恶性转化不同时期的甲基化状态,采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测该基因在恶性转化不同时期的表达量,并与同期DMSO溶剂对照组细胞比较。结果:甲基化芯片结果显示,对照组第10代和第20代细胞未发生甲基化,第30代细胞发生甲基化;GMA染毒组16HBE细胞在第10代和第20代METTL9基因均发生甲基化(PeakScore>2),而第30代细胞未见甲基化。qPCR结果显示,与同期溶剂对照组相比,GMA染毒组16HBE细胞在第10代和第20代METTL9基因表达量上调(P<0.05);经甲基化转移酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-odr)处理后,该基因与同代龄GMA组细胞相比,第10代和第30代METTL9基因的表达量水平均上升(P<0.05),第20代表达水平下降(P<0.05)。结论:METTL9基因可作为GMA诱导16HBE细胞发生恶性转化前、中期的一个特异分子标志。

以单分散交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯树脂为基质的亲水性排阻色谱固定相的合成及其在生物大分子分离中的应用

以单分散交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯树脂为基质 ,将该树脂经化学改性后得到亲水性良好的新型尺寸排阻色谱固定相 ,其表面羟基含量高达 6 .1mmol/ g。详细评价了该改性后树脂对蛋白的质量回收率、亲水性、耐压性能及化学稳定性。用三羟甲基胺基甲烷 (Tris)缓冲溶液 ( pH =7)为流动相 ,对蛋白质混合样的分离遵循体积排阻色谱分离机理。

甲基丙烯酸环氧丙酯诱导人胚肺细胞恶性转化相关基因片段的克隆

本研究在建立GMA诱导的HELF体外恶性转化模型的基础上 ,采用mRNA差异显示 (DD PCR)技术 ,对恶性转化细胞同正常细胞之间基因的差异表达状况进行了比较分析 ,共克隆到 18个差异表达cDNA片段。其中 ,17个DNA片段与已知基因高度同源 ,另外一个为新基因序列。Northern杂交证实 ,分别有 8个和 3个基因在GMA诱导的恶性转化细胞中表达增加或降低。结果提示 ,这些基因可能参与了GMA诱导的细胞恶性转化过程 。

甲基丙烯酸环氧丙酯诱导人胚肺细胞恶性转化机制的研究

[目的 ]研究甲基丙烯酸环氧丙酯 (GMA)诱导人胚肺成纤维细胞恶性转化的机制。 [方法 ]本研究在建立GMA体外诱导的人胚肺成纤维细胞 (HELF)恶性转化模型的基础上 ,采用mR NA差异显示 (DD PCR)技术 ,对恶性转化细胞同正常细胞之间基因的差异表达状况进行比较分析。 [结果 ]实验结果显示 ,两种细胞在基因表达方面存在明显差异。在转化细胞中克隆到的 5个差异表达基因片段 ,其中 3个高表达基因片段 (cDNA)分别与人核糖体蛋白 (RP)L41、RPL15、RPS16基因高度同源 ;2个差异表达基因片段分别与人促分裂原活化的蛋白激酶激酶激酶 11(MAPKKK 11)和转化生长因子 β诱导的蛋白 (TGFBI)基因高度同源 ,它们在转化细胞中分别呈明显的上调和下调表达。[结论 ]包括上述RP、MAPKKK11和TGFBI多个基因的激活与失活可能与GMA诱导的细胞恶性转化过程有关。GMA在诱导人胚肺成纤维细胞恶性转化过程中。使MAPK及TGF β信号传导通路功能异常 。

聚丁二烯接枝聚苯乙烯和甲基丙烯酸环氧丙酯共聚胶乳的制备及其对水泥水化的影响

以聚丁二烯(PB)、苯乙烯、甲基丙烯酸环氧丙酯(GMA)为原料,采用半连续乳液接枝共聚法合成了PB接枝聚苯乙烯和GMA共聚胶乳,并用其改性水泥砂浆,通过傅里叶变换红外光谱和差示扫描量热法考察了胶乳对水泥水化作用的影响。结果表明,随着GMA含量的增加,胶乳的酯羰基吸收峰变强,说明GMA已经接枝到PB主链上;聚灰比的增加促进了水泥水化作用,Ca(OH)2分解吸热峰向低温方向偏移约40℃;随着GMA含量的增加,水化产物中Ca(OH)2含量呈现减少的趋势,Ca(OH)2分解吸热峰并未向低温方向偏移。

多孔聚(甲基丙烯酸环氧丙酯-二乙烯基苯)微球的改性及作为蛋白质疏水层析介质的应用

用悬浮聚合方法合成了富含环氧基团的多孔聚（甲基丙烯酸环氧丙酯-二乙烯基苯）[Poly（Glycidyl ethacrylate-Divinylbenzene），P（GMA-DVB）]微球，为了消除其对蛋白质的不可逆吸附，探索用聚乙二醇（Polyethylene lycol，PEG）对微球进行改性，制备了带有PEG配基的P（OMA-DVB）微球．实验考察了反应条件对PEG固载量的影响规律，发现最适反应温度为80℃．以牛血清白蛋白（Bovine Serum Albumin,BSA）和胰蛋白酶作为模型蛋白，考察了PEG改性前后P（OMA-DVB）微球对蛋白质的吸附性能．改性前P（OMA-DVB）微球有30％～40％的不可逆吸附，蛋白质回收率仅为60%～70％．改性后介质消除了不可逆吸附，对蛋白质的吸附作用表现为可逆的疏水相互作用，吸附BSA和胰蛋白酶的质量回收率和活性回收率都在97％以上．结果表明，PEG-P（GMA—DVB）微球可以作为一种新型介质进一步应用于蛋白质的吸附与分离．

LncRNA PCA3在甲基丙烯酸环氧丙酯诱导16HBE恶性转化细胞中的表达及意义

目的:探讨长链非编码RNA PCA3(LncRNA PCA3)在甲基丙烯酸环氧丙酯(GMA)诱导的16HBE恶性转化细胞中的表达水平及意义。方法:收获经8μg/mL GMA诱导的第30代16HBE恶性转化细胞及同代龄DMSO溶剂对照组细胞,应用高通量LncRNA芯片比较两组样本表达谱的差异,通过差异倍数、邻近编码基因信息分析等策略初步筛选出16HBE恶性转化细胞中LncRNA PCA3及其最可能的相关蛋白编码基因PRUNE2,采用实时荧光定量PCR(qPCR)和全基因组表达谱芯片分析LncRNA PCA3和PRUNE2的表达量,并与同代龄DMSO对照组细胞比较。结果:LncRNA芯片结果显示,与同代龄DMSO组相比,GMA诱导的16HBE恶性转化细胞中LncRNA PCA3上调7.17倍,PRUNE2下调2.54倍;qPCR结果显示,与同代龄DMSO组[(1.36±0.44)×10^(-5)]相比,GMA诱导的恶性转化细胞[(2.67±0.63)×10^(-5)]中LncRNA PCA3表达上调(P<0.05);全基因组表达谱芯片显示,16HBE恶性转化细胞的PRUNE2表达量(10.95)较DMSO组(19.46)明显下调,与LncRNA芯片结果一致。结论:LncRNA PCA3可作为GMA诱导的16HBE恶性转化细胞中相关特异分子标志之一。

合成1-(β,γ-环氧丙氧甲基)-7-异丙基-4-甲基反应影响因素探讨

研究了７异丙基４甲基１甲醇和环氧氯丙烷在碱性催化条件下反应合成１（β，γ环氧丙氧甲基）７异丙基４甲基这一新化合物的影响因素，结果表明影响反应和得率的主要因素为催化剂、碱浓度、反应温度及反应时间。在浓ＫＯＨＨ２Ｏ溶液、惰性有机溶剂、相转移催化剂、４０～８０℃水浴等反应条件下，反应可在２～３ｈ内完成，得率达６４％

甲基丙烯酸环氧丙酯致人支气管上皮细胞恶性转化过程中DNMT1及MBD1基因表达的变化

目的:分析甲基丙烯酸环氧丙酯(glycidyl methacrylate,GMA)致人支气管上皮16HBE细胞恶性转化过程中不同时点甲基化转移酶及甲基CpG结合蛋白家族基因的表达差异,初步探讨GMA诱导16HBE细胞发生恶性转化的表观遗传机制。方法:采用人类全基因组表达谱芯片筛选GMA诱导16HBE细胞恶性转化过程中甲基化转移酶及甲基CpG结合蛋白家族的差异表达基因,并采用实时定量PCR(Real time PCR)技术检测筛选所得差异基因DNMT1及MBD1 mRNA的表达情况。结果:芯片结果显示在转化第10代(前期)细胞中DNMT1及MBD1基因较同代龄对照细胞表达上调,实时定量PCR进一步确证DNMT1及MBD1基因表达分别上调80.60%、79.10%,与芯片结果一致。结论:甲基化可能是GMA致16HBE细胞发生恶性转化的一种机制,DNMT1及MBD1基因可能是多个甲基化相关基因转录表达下调的关键调控点,其在GMA致16HBE细胞恶性转化过程中起着重要作用。

甲基丙烯酸环氧丙酯的遗传毒性评价

目的:观察甲基丙烯酸环氧丙酯(GMA)诱发体外培养的中国仓鼠肺细胞(V79)微核发生变化情况,对其遗传毒性进行评价。方法:分别采用不同浓度(2.25、4.5、9.0、18.0、36.0μg/mL)的GMA染毒V79细胞,设置空白对照组和DMSO溶剂对照组,其中染毒3 h处理组分别在加和不加体外活化系统(S9)条件下进行,染毒24 h处理组在不加S9条件下进行。分别计算细胞复制指数和微核细胞率。结果:GMA的浓度在2.25~36.0μg/mL范围内,无S9的条件下,与空白对照组和DMSO溶剂对照组相比,GMA染毒3和24 h组的V79细胞复制指数均无明显变化,但微核细胞率明显升高,并呈浓度-效应关系;在有S9的条件下染毒3 h,各剂量组的GMA诱发微核细胞率的差异均无统计学意义。结论:在2.25~36.0μg/mL浓度范围,GMA可致V79细胞的微核率升高,表明GMA可诱发遗传物质损伤,具有遗传毒性。

甲基丙烯酸-丙烯酸丁酯-甲基丙烯酸环氧丙酯三元共聚物的合成与表征

以甲基丙烯酸（MAA），丙烯酸丁酯（BA）和甲基丙烯酸环氧丙酯（GMA）为原料，偶氮二异丁腈（AIBN）为引发剂，十二硫醇（DT）为链转移剂，通过溶液聚合法合成了甲基丙烯酸-丙烯酸丁酯-甲基丙烯酸环氧丙酯（MAA-BA-GMA）三元共聚物，其结构和性能经^1H NMR，^13C NMR，IR，GPC，DSC和TGA表征。通过调节AIBN和DT的用量可控制MAA-BA-GMA的分子量在7900-23700。热分析数据结果表明，MAA-BA-GMA具有良好的柔性；分解温度为429℃-440℃。

TGF-β信号通路在甲基丙烯酸环氧丙酯诱导16HBE细胞恶性转化过程中的改变

目的:分析甲基丙烯酸环氧丙酯(glycidyl methacrylate,GMA)诱导人支气管上皮细胞(16HBE)恶性转化过程中不同时点转化生长因子β(transforming growth factor beta,TGF-β)信号通路的改变,探讨GMA致16HBE细胞恶性转化的分子机制。方法:取经GMA染毒处理转化前期(第10代)、转化后期(第30代)及相应同代龄对照细胞,采用"人类全基因组表达谱芯片"分析不同时点转化细胞与同代龄对照细胞之间TGF-β信号通路的改变。结果:TGF-β信号通路在转化前期细胞与同代龄对照细胞之间的表达差异无统计学意义(P>0.05),而转化后期细胞与同代龄对照细胞相比表达差异具有统计学意义(P<0.05),且发现了11个差异表达的基因。结论:在GMA诱导16HBE细胞恶性转化过程中TGF-β信号通路可能发挥重要作用。

甲基丙烯酸环氧丙酯致人支气管上皮细胞恶性转化相关DNA修复基因表达改变的研究

目的:检测甲基丙烯酸环氧丙酯(glycidyl methacrylate,GMA)致人支气管上皮细胞(16HBE)恶性转化相关DNA修复基因表达改变的情况,以探讨GMA致细胞癌变的机制。方法:采用"基因组稳定和DNA修复基因芯片"分析检测GMA诱导16HBE细胞恶性转化过程中,经鉴定具备恶性细胞表型特征的第30代转化细胞DNA修复基因表达的改变。结果:GMA转化第30代细胞与同代龄对照细胞比较,在113个基因中有8个基因的表达有显著差异,其中7个基因表达上调(ratio>2),分别是NBN、RAD50、RAD51、OGG1、XAB2、TOP3A、TNKS;NEIL2基因表达下调(0<ratio<0.5)。结论:GMA致16HBE细胞恶性转化是一个多基因参与涉及多通路的复杂过程,DNA修复基因表达的改变可能是该过程中重要的分子事件。

甲基丙烯酸环氧丙酯体外诱导的人胚肺成纤维细胞DNA链断裂

甲基丙烯酸环氧丙酯 (GMA)导致人胚肺成纤维细胞 (HELFs)恶性转化及其潜在致癌机理尚未阐明 .本研究用 0 .5- 5.0 mg· L-1的 GMA给体外培养的 HELFs染毒 2 h和 1 2 h,或用 5.0 mg· L-1的 GMA染毒 1 5min- 2 4 h,应用单细胞凝胶电泳技术 (彗星试验 )对 GMA引起的 HELFs DNA断裂作用进行了初步探讨 .琼脂糖凝胶电泳及流式细胞仪检测等方法观察了 GMA对细胞凋亡的诱导作用 .结果表明 ,GMA可导致染毒细胞 DNA发生剂量和时间依赖性链断裂 .用 5.0 mg· L-1的 GMA染毒后仅 1 h断裂作用即已显著 ,并随染毒时间延长而递增 ,至 2 4 h时损伤最为严重 .但在同样条件下未观察到 GMA对细胞凋亡的诱导作用 .结果提示 GMA导致的非凋亡性 DNA链断裂可能是其诱导