前列腺癌组织中甲基转移样酶7B的表达及其临床价值

[目的]探讨前列腺癌组织中甲基转移样酶7B(methyltransferase-like 7B,METTL7B)的表达水平及临床意义。[方法]选取武警重庆总队医院89例前列腺癌组织和60例良性前列腺增生组织,采用免疫组织化学染色法检测METTL7B表达,根据染色结果将前列腺癌患者分为高表达组和低表达组。生存分析采用Kaplan-Meier法,组间生存率比较采用Log-rank检验;采用Cox比例风险回归模型分析前列腺癌患者预后的影响因素。[结果]良性前列腺增生组织低表达50例、高表达10例;前列腺癌组织低表达29例,高表达60例(P<0.05)。Ⅲ~Ⅳ期组前列腺癌的METTL7B高表达率明显高于Ⅰ~Ⅱ期组(P<0.05),Gleason评分≥8分组的METTL7B高表达率明显高于<8分组(P<0.05),淋巴结转移组METTL7B高表达率明显高于未转移组(P<0.05)。METTL7B低表达组5年总生存率为51.05%,5年无生化复发生存率为46.32%,明显高于高表达组的32.41%和18.24%(P均<0.05)。TNM分期Ⅲ~Ⅳ期(OR=2.661,95%CI:1.409~3.897)、Gleason评分≥8分(OR=1.872,95%CI:1.314~3.008)、淋巴结转移(OR=1.573,95%CI:1.283~2.103)和METTL7B高表达(OR=3.076,95%CI:2.564~4.266)是前列腺癌患者生存时间较短的独立影响因素(P均<0.05)。TNM分期Ⅲ~Ⅳ期(OR=1.874,95%CI:1.278~2.765)、Gleason评分≥8分(OR=1.354,95%CI:1.004~1.870)、淋巴结转移(OR=2.001,95%CI:1.497~2.775)和METTL7B高表达(OR=2.897,95%CI:2.004~4.555)是前列腺癌患者无生化复发生存时间较短的独立影响因素(P均<0.05)。[结论]METTL7B与前列腺癌的发生和发展有关,对预后评价有一定价值。

甲基转移酶样7B在中国人群脑胶质瘤中的表达及预后分析

目的探讨甲基转移酶样7B基因(METTL7B)在中国脑胶质瘤患者中的表达特征及其对预后的影响。方法回顾性分析中国脑胶质瘤基因组图谱计划(CGGA)mRNA seq325数据库中表达METTL7B的288例脑胶质瘤患者的测序结果和临床资料,并对肿瘤标本进行免疫组织化学染色。采用Kaplan-Meier生存曲线分析METTL7B的表达水平对不同级别脑胶质瘤患者生存期的影响;采用单因素、多因素Cox回归分析明确影响患者生存期的相关因素。通过Pearson相关性分析筛选METTL7B共表达的基因,应用R软件中的基因富集工具分析基因的生物学功能。结果288例患者中,世界卫生组织(WHO)Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤患者的METTL7B表达量[中位数(四分位数间距)]分别为[1.05(1.93)]、[3.07(3.17)]和[4.71(2.57)];在异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)野生型和突变型的胶质瘤中,METTL7B的表达量分别为[4.99(3.40)]和[1.53(2.77)];在无1p/19q共缺失和1p/19q共缺失的胶质瘤中,METTL7B的表达量分别为[3.85(3.39)]和[0.98(1.79)],上述指标比较差异均有统计学意义(均P<0.01)。免疫组织化学染色证实高级别胶质瘤中METTL7B的染色阳性显著高于低级别胶质瘤。METTL7B高表达组和低表达组患者(各144例)的中位生存期分别为20.0个月(1.0~136.0个月)和80.0个月(2.0~149.0个月),差异有统计学意义(P<0.01)。在WHOⅡ~Ⅳ级胶质瘤患者中,METTL7B的高表达量显著降低了患者的生存时间(均P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,METTL7B表达量是影响胶质瘤患者生存期的独立影响因素(HR=1.684,95%CI:1.158~2.449,P<0.01)。在CGGA数据库中,与METTL7B表达呈正相关的基因有252个(r>0.45,P<0.05),其生物学功能主要为细胞黏附、碳水化合物代谢和蛋白折叠等,主要参与了内质网中蛋白质加工、局部黏附及癌症中的蛋白聚糖等。结论在脑胶质瘤组织中,随着肿瘤级别的升高,METTL7B的表达量也显著升高,并可作为高级别胶质瘤预后的预测因子,其机制值得进一步探索。

基于生物信息学分析METTL7B在胶质瘤组织中的表达及其临床意义

目的:探讨甲基转移酶样蛋白7B(METTL7B)在胶质瘤组织中的表达及其与患者临床病理特征和预后的相关性。方法:基于CGGA数据库胶质瘤数据和GTEx数据库正常脑组织数据,分析METTL7B基因在胶质瘤与正常脑组织中的表达差异,并用GEPIA数据库数据和免疫组织化学染色法进行验证。用Kaplan-Meier生存分析、单因素Cox分析、多因素Cox分析及ROC曲线分析等评估METTL7B在胶质瘤患者预后中的价值,用CGGA数据库数据分析METTL7B表达与胶质瘤患者临床病理特征的相关性,用CIBERSORT及TIMER数据库进行肿瘤免疫细胞浸润分析,进行KEGG通路富集分析及GO功能富集分析,通过基因共表达分析确定与METTL7B相关的基因。结果:METTL7B在胶质瘤组织中明显上调(均P<0.05),METTL7B表达是胶质瘤患者独立的不良预后因素。METTL7B高表达与高龄(>41岁)、肿瘤分级增加、肿瘤复发或继发性肿瘤、IDH野生型、1p19q非共缺失以及肿瘤的恶性病理学有关联(均P<0.01);METTL7B表达与B细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、单核细胞、中性粒细胞、巨噬细胞、活化肥大细胞等免疫细胞有关联(均P<0.05)。KEGG通路富集及GO功能分析结果显示,肿瘤相关信号通路及多种免疫反应在METTL7B高表达表型中显著富集。基因共表达分析结果表明,METTL7B与TNFRSF12A、CHI3L1、EMP3表达呈正相关(r=0.807、0.804、0.783,均P<0.01),与ELFN2、REPS2、SHANK2表达呈负相关(r=-0.642、-0.627、-0.602,均P<0.01)。结论:METTL7B在胶质瘤组织中的表达上调是预后不良的指标,且与肿瘤免疫浸润相关。

沉默甲基转移酶样7B基因表达抑制肾母细胞瘤细胞的增殖、侵袭和迁移

目的:探讨甲基转移酶样7B(methyltransferase-like 7B,METTL7B)与肾母细胞瘤患者预后的关系,以及沉默METTL7B基因对肾母细胞瘤细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法:采用免疫组织化学法检测72例肾母细胞瘤组织及其配对的癌旁正常肾组织中METTL7B的表达情况;蛋白质印迹法检测人肾母细胞瘤SKNEP-1细胞和正常肾上皮细胞系(PCS-400-010、PCS-400-011和PCS-400-012)中METTL7B的表达水平。分析METTL7B与肾母细胞瘤患者临床病理特征和生存的关系,应用Kaplan-Meier法和COX比例风险回归模型分析预后相关因素。采用脂质体转染法将特异性针对METTL7B基因的siMETTL7B及阴性对照(negative control,NC)siRAN(siNC)瞬时转入SK-NEP-1细胞,然后采用蛋白质印迹法检测沉默效率;随后分别采用克隆形成实验、CCK-8法、FCM法、Transwell小室实验以及细胞划痕实验检测沉默METTL7B基因表达对SK-NEP-1细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响。结果:肾母细胞瘤组织中METTL7B的表达率为68.06%(49/72),高于癌旁正常肾组织中的16.67%(12/72)(P<0.05)。与SK-NEP-1细胞相比,PCS-400-010、PCS-400-011和PCS-400-012细胞中METTL7B蛋白的表达水平均较低(P均<0.05)。METTL7B与肾母细胞瘤的美国儿童肿瘤协作组(Children’s Oncology Group,COG)分期有关(P<0.05),与性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤直径和病理分型无关(P均>0.05)。COX多因素分析结果显示,COG分期为Ⅲ~Ⅳ期、病理分型为UFH型和METTL7B高表达是肾母细胞瘤预后不良的独立影响因素(P均<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,METTL7B高表达患者的总生存时间短于METTL7B低表达患者(P<0.05)。在SK-NEP-1细胞中沉默METTL 7B基因表达后,SK-NEP-1细胞的克隆形成能力、增殖能力、侵袭能力和细胞迁移能力均受到明显抑制(P均<0.05),而细胞凋亡率明显提高(P<0.05)。结论:METTL7B与肾母细胞瘤分期和不良预后相关。沉默METTL7B基因表达可抑制肾母细胞瘤细胞的增殖、侵袭和迁移,并促进其凋亡。

METTL7B促进非小细胞肺癌细胞侵袭的机制研究

目的探讨甲基转移酶样蛋白-7B(methyltransferase-like 7B,METTL7B)对非小细胞肺癌细胞侵袭的机制。方法通过Western blotting法和qPCR检测METTL7B在A549细胞和正常人上皮细胞分别在蛋白和mRNA水平上表达情况;利用慢病毒在A549细胞中过表达METTL7B,通过Western blotting法检测过表达情况,细胞Transwell侵袭实验检测过表达METTL7B对A549细胞的侵袭能力;再利用双向电泳技术对过表达METTL7B的A549细胞中蛋白质组学进行分析,探讨METTL7B促进非小细胞肺癌细胞侵袭的机制。结果RT-qPCR和Western blotting法检测结果均显示METTL7B在A549中的表达明显高于正常的人肺上皮细胞。使用慢病毒能有效地促使METTL7B在A549中过表达,侵袭实验结果显示过表达METTL7B可增强A549细胞的侵袭能力。通过双向电泳技术分析过表达METTL7B细胞中差异蛋白,发现共有12个差异表达蛋白,其中6个上调,6个下调,且通过Western blotting法实验验证发现过表达METTL7B细胞中的SOD1和SAE1表达上调。结论METTL7B可能通过上调SOD1和SAE1的表达,从而增强非小细胞肺癌细胞的侵袭能力。

METTL7B对人肝细胞脂滴形成的影响

目的探讨甲基转移酶样蛋白7B(METTL7B)对人肝细胞脂滴形成的影响。方法取5只8~10周龄雄性C57BL/6J小鼠的心、肝、脑、肺、肾、肌肉、皮肤等组织,检测组织中METTL7B蛋白表达情况。用不同浓度油酸(0、0.25、0.5、1.0mmol/L)处理人正常肝细胞LO2,采用CCK-8法检测细胞活力,油红O染色检测细胞内脂滴含量。METTL7BsiRNA转染LO2细胞,检测LO2细胞内脂滴含量以及三酰甘油和胆固醇代谢相关基因的表达情况。结果METTL7B蛋白在小鼠肝脏组织中表达最高,在其他器官组织中表达较弱或不表达。与油酸0mmol/L比较,油酸1.0mmol/L能降低细胞活力(P<0.05)。油酸0.5mmol/L处理后,细胞内脂滴含量增多,且脂滴大小清晰,METTL7BmRNA和蛋白表达升高(P<0.05)。干扰METTL7B后,细胞内脂滴含量减少(P<0.05),三酯甘油代谢相关基因载脂蛋白B100、Runt相关转录因子2、硬脂酰辅酶A去饱和酶mRNA表达上调(P<0.05),胆固醇代谢相关基因肉毒碱棕榈酰转移酶、胆固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)、SREBP2mRNA表达下调(P<0.05)。结论METTL7B与人肝细胞脂滴形成密切相关,主要通过上调三酰甘油代谢相关基因和下调胆固醇代谢相关基因的表达来发挥作用。