甲基转移酶样蛋白14对急性早幼粒白血病细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的调节作用

目的 探讨过表达和敲低甲基转移酶样蛋白14(METTL14)对急性早幼粒白血病细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的调节作用。方法 取人急性早幼粒白血病细胞NB4进行培养,分为过表达对照组、过表达组、干扰对照组、干扰组,过表达对照组及过表达组分别转染空白质粒和METTL14质粒,干扰对照组和干扰组分别转染si-NC和si-METTL14质粒。采用CCK-8法检测各组细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力,Dot Blotting法检测细胞N-6甲基腺苷(m6A)修饰水平。结果 与过表达对照组相比,过表达组细胞增殖率升高、细胞凋亡率降低、细胞迁移数、细胞侵袭数升高,NB4细胞m6A修饰水平提高(P均<0.05);与干扰对照组相比,干扰组细胞增殖率降低、细胞凋亡率增加、细胞迁移数、细胞侵袭数降低,NB4细胞m6A修饰水平降低(P均<0.05)。结论 METTL14可促进NB4细胞增殖、迁移、侵袭,其机制可能与提高m6A修饰水平有关。

m^(6)A甲基转移酶样蛋白14在抑郁样小鼠海马中的表达

目的研究m^(6)A甲基转移酶样蛋白14(METTL14)在抑郁样小鼠海马中的表达变化和作用。方法1)将C57BL/6J小鼠分为对照组和抑郁模型组。单笼单只饲养并加以不定期慢性不可预知刺激(CUMS),制备抑郁模型时间为4个月。2)用强迫游泳实验(FST)、蔗糖偏好实验(SPT)、悬尾实验(TST)测试模型小鼠的抑郁样行为。3)行为学检测完成后,取两组小鼠的海马组织,用qRT-PCR、Western blot、Dot blot、免疫组化及免疫荧光等技术检测小鼠海马组织m^(6)A修饰及甲基化转移酶样蛋白METTL14的表达。结果1)模型组小鼠出现明显的抑郁样行为;2)模型组小鼠海马组织中METTL14表达量在mRNA水平升高并伴随m^(6)A修饰水平升高;3)模型组小鼠海马CA1、CA3及DG区METTL14蛋白表达量升高且存在神经元损伤现象。结论抑郁样小鼠海马区m^(6)A甲基化功能活跃。

甲基转移酶样蛋白14在恶性肿瘤中作用及机制的研究进展

RNA修饰在许多生物学功能中起重要作用。其中,N^(6)-甲基腺苷(m^(6)A)是最丰富的RNA修饰。m^(6)A在许多物种中高度保守,调节RNA代谢、细胞分化、细胞昼夜节律和细胞周期,并与肿瘤进展有关。甲基转移酶样蛋白(METTL)14是m^(6)A甲基转移酶复合物中的关键成分,主要作为RNA结合支架以提高METTL3的催化能力。目前,METTL14在各种恶性肿瘤中的分子机制尚未得到充分研究。因此,METTL14作为癌症诊断新生物标志物具有潜在临床应用前景。深入研究METTL14在恶性肿瘤肿瘤中的生物学功能,可为恶性肿瘤的靶向治疗以及改善患者预后提供新思路。

甲基转移酶样蛋白3与前列腺癌患者预后的相关性

目的探讨甲基转移酶样蛋白3(METTL3)与前列腺癌(PCa)患者预后的相关性,以期建立新的预测PCa患者预后的方法。方法使用开放数据集和PCa组织芯片评估METTL3基因和蛋白的表达、METTL3与Gleason评分(GS)之间的相关性以及METTL3预测PCa不良预后的能力,构建列线图模型定量评估PCa预后。结果与正常前列腺组织比较,PCa组织中METTL3基因和蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。METTL3在高危PCa组(GS>7分)中的基因和蛋白表达水平明显高于中-低危PCa组(GS≤7分)(P<0.05)。METTL3基因高表达组患者的短期和长期无进展生存率和总体生存率均较METTL3基因低表达组患者差(P<0.05)。此外,本研究建立了一个由7个受METTL3 N6-甲基腺嘌呤(m6A)修饰调控的靶基因组成的风险模型。该风险模型中的7个靶基因主要与细胞周期过程密切相关,METTL3蛋白表达水平与细胞周期蛋白B1(CCNB1)的蛋白表达水平呈显著正相关(r=0.30,P=0.0025)。结论METTL3具有预测PCa预后的潜力,其可能通过m6A修饰调控与细胞周期过程密切相关的靶基因的表达来影响PCa预后。

O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶、细胞周期相关蛋白1、F框/WD-40域蛋白7在脑胶质瘤组织中的表达情况及临床意义

目的探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)、细胞周期相关蛋白1(CAPRIN1)、F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)在脑胶质瘤组织中的表达情况及临床意义。方法选择78例脑胶质瘤患者和20例因外伤或脑出血行颅内减压治疗的患者,分别作为观察组和对照组,分别收集两组患者的脑胶质瘤组织和正常脑组织。采用免疫组织化学染色法检测两组患者中MGMT、CAPRIN1、FBXW7蛋白的表达情况,比较不同临床特征脑胶质瘤患者脑胶质瘤组织中MGMT、CAPRIN1、FBXW7蛋白的表达情况。结果观察组患者的MGMT和CAPRIN1蛋白阳性表达率分别为52.56%和74.36%,分别明显高于对照组的5.00%和30.00%,差异均有统计学意义(P﹤0.01);观察组患者的FBXW7蛋白阳性表达率为28.21%,明显低于对照组的85.00%,差异有统计学意义(P﹤0.01)。死亡脑胶质瘤患者脑胶质瘤组织中MGMT蛋白的阳性表达率为86.67%,明显高于生存患者的44.44%,差异有统计学意义(P﹤0.01)。病理分级为Ⅲ~Ⅳ级脑胶质瘤患者脑胶质瘤组织中CAPRIN1蛋白的阳性表达率为89.19%,明显高于病理分级为Ⅰ~Ⅱ级患者的60.98%,差异有统计学意义(P﹤0.01)。病理分级为Ⅲ~Ⅳ级脑胶质瘤患者脑胶质瘤组织中FBXW7蛋白的阳性表达率为10.81%,明显低于病理分级为Ⅰ~Ⅱ级患者的43.90%,差异有统计学意义(P﹤0.01)。结论脑胶质瘤组织中MGMT和CAPRIN1蛋白表达上调,而FBXW7蛋白表达下调,其中MGMT蛋白可能与患者预后有关,而CAPRIN1和FBXW7蛋白与病理分级有关。

甲基化转移酶样蛋白3在急性心肌梗死患者外周血中的表达及对缺氧缺血所致心肌细胞损伤的调节作用

目的探讨甲基化转移酶样蛋白3(METTL3)在急性心肌梗死患者外周血中的表达及对急性缺氧/缺血(HI)所致心肌细胞损伤的调节作用。方法(1)收集60例急性心肌梗死患者和60例健康者的血浆和血清,采用酶联免疫吸附测定法和实时荧光定量聚合酶链反应法分别检测血清和血浆中METTL3的表达水平。(2)取人心肌细胞AC16,分为对照组、HI-2h组、HI-4h组、siMETTL3+HI-2h组、siNC+HI-2h组;对照组不进行任何处理,HI-2h组、HI-4h组使用1%O 2和1%胎牛血清培养基诱导HI心肌细胞模型,siMETTL3+HI-2h组、siNC+HI-2h组分别转染有效沉默METTL3的小干扰RNA序列、阴性对照小干扰RNA序列后建立HI心肌细胞模型。检测各组AC16细胞的增殖率和凋亡率,METTL3、激活型天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(cleaved-Caspase3)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)。将溶酶体抑制剂巴弗洛霉素A1添加至培养基后,按照上述方法进行分组及干预,检测微管相关蛋白1轻链3B-Ⅱ(LC3B-Ⅱ)、人死骨片1(SQSTM1)的蛋白表达水平。结果(1)心肌梗死患者血浆METTL3 mRNA相对表达水平以及血清中METTL3表达水平均高于健康者(P<0.05)。(2)与对照组比较,HI-2h组、HI-4h组AC16细胞的增殖率降低,细胞凋亡率升高,METTL3蛋白、cleaved-Caspase3蛋白、Bax/Bcl-2比值、SQSTM1蛋白的表达上调,而LC3B-Ⅱ的蛋白表达下调(均P<0.05)。与HI-2h组和siNC+HI-2h组比较,siMETTL3+HI-2h组的细胞增殖率升高,细胞凋亡率降低,METTL3、cleaved-Caspase3、Bax/Bcl-2比值、SQSTM1的蛋白表达下调,LC3B-Ⅱ的蛋白表达上调(均P<0.05)。结论METTL3在心肌梗死患者体内和HI诱导的急性心肌细胞损伤模型中的表达均升高,沉默METTL3可以抑制HI心肌细胞的凋亡并增加自噬通量,从而促进细胞增殖的恢复。

m6A甲基转移酶METTL3通过AFF4/NF-κB/MYC信号网络影响膀胱癌的研究进展

膀胱癌(BCa)是泌尿外科最常见的恶性肿瘤之一,发病机制目前尚未明确。甲基转移酶3(METTL3)是N6-甲基腺苷甲基转移酶复合物(m6A MTC)的核心部分,介导mRNA的甲基化修饰,影响mRNA的稳定性和翻译过程。研究表明METTL3可以通过AFF4/NF-κB/MYC信号网络对BCa细胞分裂增殖起到促进作用。该信号网络涉及多种信号分子,METTL3可分别影响AFF4、NF-κB和MYC的表达水平影响其下游通路,促进肿瘤发展。

脂多糖诱导人和小鼠肠上皮细胞炎症并上调细胞甲基转移酶样蛋白3(METTL3)和METTL14表达

目的探讨N_(6)-甲基腺苷(m^(6)A)修饰在HIEC-6人肠上皮细胞与MODE-K小鼠肠上皮细胞炎性状态下的变化。方法采用不同剂量的脂多糖(LPS)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激HIEC-6细胞与MODE-K细胞10 h或相同剂量LPS、IL-1β、IL-6、TNF-α分别刺激HIEC-6细胞与MODE-K细胞(0、3、6、12、24)h。实时定量PCR检测细胞炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α的mRNA表达;实时定量PCR和Western blot法分别检测m^(6)A修饰相关分子甲基转移酶样蛋白3(METTL3)、METTL14、METTL16、Wilms瘤1相关蛋白(WTAP)、烷基化修复同源蛋白5(ALKBH5)、脂肪量和肥胖相关蛋白(FTO)、YTH结构域蛋白1(YTHDC1)、YTHDC2的mRNA和蛋白表达。结果与对照组相比,HIEC-6细胞与MODE-K细胞在LPS诱导的时间依赖与剂量依赖模型中IL-1β、IL-6、TNF-α的mRNA表达水平增高,并同步上调METTL3和METTL14 mRNA与蛋白水平。结论LPS可以诱导肠上皮细胞出现炎症反应,并上调肠上皮细胞中METTL3和METTL14的表达。

m6A甲基转移酶METTL3通过β‐arrestin 1/p65调控结肠癌细胞增殖

目的探讨m6A甲基转移酶METTL3通过β-arrestin 1/p65在结肠癌细胞中的作用机制。方法使用结肠癌细胞系HCT116,应用荧光定量PCR、Western blot测定结肠癌细胞中METTL3、β-arrestin 1及增值蛋白PCNA、Cyclin D1及Cyclin E的表达水平;利用细胞转染及细胞克隆实验,观察METTL3、β-arres-tin1和p65在结肠癌细胞增殖中的作用。结果METTL3和β-arrestin 1在结肠癌细胞中表达升高(以actin作为内参基因,与正常对照组比较,P<0.05)。结肠癌细胞转染METTL3-shRNA后,转染组灰度(0.36±0.046)较对照组(1.27±0.14)明显减少(P=0.0004);与对照组克隆数(465±42)比较,转染组细胞增殖(85±37)明显减少(P<0.05);细胞增殖蛋白PCNA、Cyclin D1及Cyclin E的表达也明显减少(分别为P<0.01、0.05、0.01);结肠癌细胞中METTL3、β-arrestin 1和p-p65蛋白表达均增高(均为P<0.05)。随后HCT116细胞沉默MET-TL3的表达,发现细胞中β-arrestin 1、p-p65蛋白的表达明显下降(均为P<0.05)。结论METTL3影响结肠癌细胞的增殖可能通过β-arrestin 1/p65调控参与肿瘤的发生发展。

多肽：N-乙酰氨基半乳糖转移酶-2与共刺激分子B7-H3相互作用的结构信息学初步探讨

目的 研究多肽：N-乙酰氨基半乳糖转移酶-2（ppGalNAc-T2）与共刺激分子B7-H3的相互关系.方法 通过同源模拟,得到共刺激分子B7-H3两种不同剪接体（2IgB7-H3,4IgB7-H3）的分子结构,寻找PDB数据库中的ppGalNAc-T2的蛋白质晶体结构,利用软件GRAMM（http：//vakser.bioinformatics.ku.edu/main/resources_gramm.php）,与同源模拟得到的两种不同剪接体的B7-H3分子结构相结合,寻找两者之间是否存在直接结合的可能.结果 成功地模拟了共刺激分子B7-H3两种剪接体的分子结构,发现ppGalNA-T2与共刺激分子B7-H3有相互结合的可能性.结论 结构生物信息学的研究发现ppGalNAc-T2分子与B7-H3具有潜在相互作用位点,ppGalNAc-T2可能参与B7-H3蛋白质的O-糖链合成反应,并且很有可能是通过直接接触来催化控制B7-H3分子的O-糖链合成.

甲基转移酶样蛋白3与肿瘤关系的研究进展

目前已经发现上百种转录后RNA的修饰方式,其中N6-甲基腺嘌呤(m6A)是真核mRNA最为常见的一种修饰方式。研究表明,m6A一种动态可逆的RNA甲基化修饰方式,由甲基转移酶复合体(METTL3、METTL14、WTAP)、去甲基转移酶(FTO、ALKBH5)、结合蛋白(YTHDF1、YTHDF2、YTHDF3、YTHDC1、YTHDC2)等协同调控。甲基转移酶样蛋白3(METTL3)具备独立或与其他甲基转移酶共同催化RNA的m6A修饰形成的能力,是影响m6A修饰水平至关重要的酶。近年研究表明,METTL3依靠催化m6A修饰途径或者直接与翻译起始因子作用影响肿瘤基因的翻译水平,进而调控肿瘤相关蛋白的表达,影响肿瘤细胞的增殖、侵袭、分化等生物学行为,在不同肿瘤中发挥促癌或抑癌的双重作用。此外,METTL3也是肿瘤治疗的一个有效分子靶点。

甲基转移酶样蛋白3在结直肠癌化疗耐药中的作用研究进展

目的:结直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤,提高结直肠癌疗效是重要的临床问题。近年来,表观遗传修饰相关机制在肿瘤进展及耐药中的作用日渐受到关注,靶向表观遗传改变可能逆转化疗耐药。甲基转移酶样蛋白3(METTL3)作为表观遗传修饰最常见的RNA甲基化转移酶,在结直肠癌化疗耐药中的作用值得进一步探究。该文将有关METTL3表达与化疗耐药现状及DNA修复损伤、细胞自噬、代谢紊乱等经典机制的研究进展作一综述。

癌组织M6A甲基转移酶样蛋白3水平对手术切除后接受索拉非尼治疗的肝细胞癌患者预后的影响

目的探讨肝细胞癌(HCC)组织N 6-甲基嘌呤(M6A)甲基转移酶样蛋白3(METTL3)水平及其对术后索拉非尼治疗的患者预后的预测价值。方法2016年8月~2019年8月我院手术切除治疗的HCC患者62例,随访2年。采用qRT-PCR法检测癌组织和癌旁组织METTL3 mRNA水平,应用受试者工作特征曲线(ROC)下面积(AUC)分析癌组织METTL3 mRNA水平对患者预后的预测价值。结果癌组织METTL3 mRNA水平为(7.7±1.4),显著高于癌旁组织【(5.3±1.1),P<0.05】;肿瘤直径≥5 cm、TNMⅢ期和肝外转移患者癌组织METTL3 mRNA水平分别为(8.1±1.1)、(8.2±1.4)和(8.6±0.8),显著高于肿瘤直径<5 cm、TNMⅠ/Ⅱ期和无肝外转移患者【分别为(7.0±0.9)、(7.3±0.7)和(7.4±1.2),P<0.05】;在随访2年末,HCC患者生存27例,死亡35例;生存组癌组织METTL3 mRNA水平为(7.0±1.0),显著低于死亡组【(8.2±1.1),P<0.05】;以METTL3 mRNA水平为7.6为最佳截断点,预测患者死亡的AUC为0.712【95%CI(0.584~00.839)】,其灵敏度、特异度和准确度分别为71.4%、66.7%和69.4%;癌组织METTL3 mRNA低水平组2 a总体生存率为64.3%,显著高于高水平组的26.5%(P<0.05)。结论肝细胞癌患者癌组织METTL3 mRNA呈现高水平,且其高水平状态与肿瘤直径、TNM分期和肝外转移有关,预示患者不良预后。检测癌组织METTL3 mRNA水平可作为手术切除接受索拉非尼治疗的HCC患者的预后指标。

JMJD3参与IFN-α和TLR7诱导的B细胞活化及凋亡

目的:探索组蛋白去甲基化酶JMJD3对B细胞活化和凋亡的影响。方法:磁珠分选纯化正常人及SLE患者外周血B细胞,用IFN-α、R848或IFN-α+R848处理纯化的B细胞,流式细胞仪检测CD86+或CD69+的细胞百分率以及CD86+Annexin V+或CD69+Annexin V+的细胞百分率;实时定量PCR和Western blot方法检测JMJD3的表达。结果:获得的B细胞纯度高达95%;IFN-α能够增强TLR7对B细胞的活化和凋亡;IFN-α也增加TLR7信号诱导的B细胞表达JMJD3,且JMJD3高表达依赖于MAPK通路,而不是NF-κB信号通路;SLE患者外周血B细胞高表达JMJD3,且JMJD3抑制剂能够抑制IFN-α+R848诱导的CD19+B细胞活化及凋亡。结论:JMJD3参与IFN-α和TLR7诱导的B细胞活化及凋亡,提示JMJD3抑制剂可能具有缓解SLE症状的作用。

CpG甲基转移酶诱导人结肠癌细胞凋亡的实验研究

目的紧密连接蛋白(claudin)-7在结肠癌中表达上调,并与肿瘤的发生转移密切相关。文中探讨CpG甲基转移酶(CpG methyltransferase)又称M.SssI在体外对人结肠癌细胞HT-29细胞的凋亡诱导和增殖的抑制作用及对紧密连接蛋白-7表达的影响。方法分别用50U/ml M.SssI为过甲基化组,10μmol/L氮杂胞苷(5-azacytidine)为甲基化酶抑制组干预培养HT-29细胞,只加PBS为对照组。24 h后用流式细胞术观察3组细胞的凋亡情况。应用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法检测各组细胞的增殖能力。用细胞免疫荧光技术观察紧密连接蛋白-7的细胞学定位和表达程度在3组细胞中的差异。结果过甲基化组细胞早期凋亡率明显高于PBS对照组,P<0.05,而甲基化酶抑制组早期凋亡率低于对照组,差异无统计学意义,P>0.05。M.SssI显著抑制HT-29细胞增殖,P<0.05,抑制率达32.1%,而甲基化酶抑制剂5-氮杂胞苷可促进细胞增殖,但与对照组比较差异无统计学意义,P>0.05。与对照组和甲基化酶抑制组相比,紧密连接蛋白-7在过甲基化组表达明显下降,P<0.05,而5-氮杂胞苷组中紧密连接蛋白-7的表达量较对照组表达明显增强,P<0.05。结论CpG甲基转移酶可诱导HT-29细胞的凋亡、抑制增殖,可能与CpG甲基转移酶促使紧密连接蛋白-7基因启动子发生过甲基化,导致相应蛋白表达下降有关。

DNMT3B、MMP-2和ENA-78在子宫内膜异位组织中表达及相关性

目的:探究子宫内膜异位组织中DNA甲基化转移酶3B(DNMT3B)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和上皮来源中性粒细胞活化肽(ENA-78)的表达及相关性。方法:选择2017年3月—2020年10月在本医院就医的子宫内膜异位症患者51例为异位症组,37例行绝育手术的健康女性为对照组,免疫组化法检测异位症组异位内膜、在位内膜和对照组正常子宫内膜中DNMT3B、MMP-2和ENA-78的表达,并行相关性分析和诊断效能分析。结果:异位症组异位内膜表达阳性率DNMT3B(84.3%)、MMP-2(90.2%)、ENA-78(80.4%)均高于在位内膜和对照组正常子宫内膜(P<0.05);异位症组异位内膜中,MMP-2与DNMT3B、ENA-78均呈正相关(P<0.05);DNMT3B、MMP-2、ENA-78联合检测诊断子宫内膜异位症的AUC为0.924,准确度(92.0%)均高于各单独指标检测(75.0%、76.1%、72.7%)(P<0.05)。结论:DNMT3B、MMP-2、ENA-78在异位内膜中的阳性率增加,3项指标联合检测可为子宫内膜异位症诊断提供参考。

核糖体18S rRNA m^(6)A甲基转移酶METTL5的研究进展

N^(6)-甲基腺嘌呤(N^(6)-methyladenosine,m^(6)A)即在腺苷酸的第6位氮原子处发生甲基化,是真核生物核糖核酸(ribonucleic acid,RNA)普遍的表观遗传修饰之一,存在于多种类型的RNA分子上,参与生物发生、稳定性调节、半衰期控制和前体信使RNA(messenger RNA,mRNA)剪接、输出及翻译等诸多关键细胞过程。m^(6)A甲基化修饰是一种动态可逆的过程,涉及到甲基化、去甲基化和甲基化修饰位点的识别,分别由m^(6)A甲基转移酶、m^(6)A去甲基化酶和m^(6)A甲基化阅读蛋白介导[1-3]。

蛋白质精氨酸甲基转移酶7对肝癌细胞上皮-间充质转化及侵袭转移能力的影响

目的 观察蛋白质精氨酸甲基转移酶7（PRMT7）表达变化对肝癌细胞上皮-间充质转化（EMT）及侵袭转移的影响.方法 应用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、Western blot检测人正常肝细胞L02及不同转移潜能肝癌细胞株Hep3B、Huh7、MHCC97H、LM3细胞PRMT7表达;检测不同转移潜能肝癌细胞株抑制和上调PRMT7蛋白表达之后EMT相关指标蛋白和基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9表达变化及肝癌细胞侵袭运动能力改变.结果 PRMT7的表达水平与肝癌细胞转移潜能呈正相关.上调低转移潜能肝癌细胞株Huh7的PRMT7蛋白表达,能够促进细胞EMT的发生[E-钙黏蛋白（E-cadherin）蛋白表达下调,N-cadherin、波形蛋白（Vimentin）表达上调],上调MMP-2、MMP-9表达,其侵袭[Huh7组：（2.35±0.34）个;对照载体组：（3.11±1.09）个;PRMT7过表达组：（11.92±2.32）个]和迁移[Huh7组：（4.50±2.17）个;对照载体组：（3.43±1.29）个;PRMT7过表达组：（13.21±2.27）个]能力明显增强;抑制高转移肝癌细胞株LM3的PRMT7蛋白表达,细胞EMT发生逆转（E-cadherin蛋白表达上调,N-cadherin、Vimentin蛋白表达下调）,MMP-2、MMP-9表达下调,其侵袭[LM3组：（19.01±1.88）个;对照载体组：（21.02±2.14）个;PRMT7表达抑制组：（10.15±1.52）个]和迁移[LM3组：（22.55±3.06）个;对照载体组：（23.93±4.08）个;PRMT7表达抑制组：（13.11±1.31）个]能力明显减弱.结论 PRMT7通过影响肝癌细胞EMT的发生进而参与调控肝癌侵袭转移过程.

DNA甲基转移酶3B、γ-突触核蛋白在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的观察DNA甲基转移酶3B（DNMT3B）、γ-突触核蛋白（SNCG）在结直肠癌组织中的表达，探讨DNMT3B、SNCG在结直肠癌组织中表达意义及其相关性。方法采用免疫组织化学染色方法检测72例结直肠癌组织及30例癌旁正常结直肠组织中DNMT3B、SNCG的表达，分析其在结直肠癌组织中的表达与临床病理参数间的关系。结果DNMT3B在结直肠癌组织中的阳性细胞表达率55．56％（40/72）明显高于正常结直肠组织黏膜的表达率23．33％（7/30），两者差异有统计学意义（P〈0．01）。DNMT3B的异常表达与结直肠癌患者年龄、性别、肿瘤大小、浸润深度无明显相关（P〉0．05），与组织分化程度、淋巴结转移及TNM分期密切相关（P〈0．01）。SNCG在结直肠癌组织中的阳性细胞表达率41．67％（30/72）明显高于正常结直肠组织黏膜的表达率6．67％（2/30），两者差异有统计学意义（P〈0．01）。SNCG的异常表达与结直肠癌患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度无明显相关（P〉0．05），与浸润深度、淋巴结转移及TNM分期密切相关（P〈0．05）。结直肠癌组织中DNMT3B表达与SNCG表达两者呈明显负相关（r=-0．321，P〈0．01）。结论DNMT3B和SNCG在结直肠癌组织中异常表达，参与结直肠癌的发生、发展，两者之间密切相关。

甲基转移酶样7B在中国人群脑胶质瘤中的表达及预后分析

目的探讨甲基转移酶样7B基因(METTL7B)在中国脑胶质瘤患者中的表达特征及其对预后的影响。方法回顾性分析中国脑胶质瘤基因组图谱计划(CGGA)mRNA seq325数据库中表达METTL7B的288例脑胶质瘤患者的测序结果和临床资料,并对肿瘤标本进行免疫组织化学染色。采用Kaplan-Meier生存曲线分析METTL7B的表达水平对不同级别脑胶质瘤患者生存期的影响;采用单因素、多因素Cox回归分析明确影响患者生存期的相关因素。通过Pearson相关性分析筛选METTL7B共表达的基因,应用R软件中的基因富集工具分析基因的生物学功能。结果288例患者中,世界卫生组织(WHO)Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤患者的METTL7B表达量[中位数(四分位数间距)]分别为[1.05(1.93)]、[3.07(3.17)]和[4.71(2.57)];在异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)野生型和突变型的胶质瘤中,METTL7B的表达量分别为[4.99(3.40)]和[1.53(2.77)];在无1p/19q共缺失和1p/19q共缺失的胶质瘤中,METTL7B的表达量分别为[3.85(3.39)]和[0.98(1.79)],上述指标比较差异均有统计学意义(均P<0.01)。免疫组织化学染色证实高级别胶质瘤中METTL7B的染色阳性显著高于低级别胶质瘤。METTL7B高表达组和低表达组患者(各144例)的中位生存期分别为20.0个月(1.0~136.0个月)和80.0个月(2.0~149.0个月),差异有统计学意义(P<0.01)。在WHOⅡ~Ⅳ级胶质瘤患者中,METTL7B的高表达量显著降低了患者的生存时间(均P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,METTL7B表达量是影响胶质瘤患者生存期的独立影响因素(HR=1.684,95%CI:1.158~2.449,P<0.01)。在CGGA数据库中,与METTL7B表达呈正相关的基因有252个(r>0.45,P<0.05),其生物学功能主要为细胞黏附、碳水化合物代谢和蛋白折叠等,主要参与了内质网中蛋白质加工、局部黏附及癌症中的蛋白聚糖等。结论在脑胶质瘤组织中,随着肿瘤级别的升高,METTL7B的表达量也显著升高,并可作为高级别胶质瘤预后的预测因子,其机制值得进一步探索。