沉默甲基转移酶样7B基因表达抑制肾母细胞瘤细胞的增殖、侵袭和迁移

目的:探讨甲基转移酶样7B(methyltransferase-like 7B,METTL7B)与肾母细胞瘤患者预后的关系,以及沉默METTL7B基因对肾母细胞瘤细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法:采用免疫组织化学法检测72例肾母细胞瘤组织及其配对的癌旁正常肾组织中METTL7B的表达情况;蛋白质印迹法检测人肾母细胞瘤SKNEP-1细胞和正常肾上皮细胞系(PCS-400-010、PCS-400-011和PCS-400-012)中METTL7B的表达水平。分析METTL7B与肾母细胞瘤患者临床病理特征和生存的关系,应用Kaplan-Meier法和COX比例风险回归模型分析预后相关因素。采用脂质体转染法将特异性针对METTL7B基因的siMETTL7B及阴性对照(negative control,NC)siRAN(siNC)瞬时转入SK-NEP-1细胞,然后采用蛋白质印迹法检测沉默效率;随后分别采用克隆形成实验、CCK-8法、FCM法、Transwell小室实验以及细胞划痕实验检测沉默METTL7B基因表达对SK-NEP-1细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响。结果:肾母细胞瘤组织中METTL7B的表达率为68.06%(49/72),高于癌旁正常肾组织中的16.67%(12/72)(P<0.05)。与SK-NEP-1细胞相比,PCS-400-010、PCS-400-011和PCS-400-012细胞中METTL7B蛋白的表达水平均较低(P均<0.05)。METTL7B与肾母细胞瘤的美国儿童肿瘤协作组(Children’s Oncology Group,COG)分期有关(P<0.05),与性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤直径和病理分型无关(P均>0.05)。COX多因素分析结果显示,COG分期为Ⅲ~Ⅳ期、病理分型为UFH型和METTL7B高表达是肾母细胞瘤预后不良的独立影响因素(P均<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,METTL7B高表达患者的总生存时间短于METTL7B低表达患者(P<0.05)。在SK-NEP-1细胞中沉默METTL 7B基因表达后,SK-NEP-1细胞的克隆形成能力、增殖能力、侵袭能力和细胞迁移能力均受到明显抑制(P均<0.05),而细胞凋亡率明显提高(P<0.05)。结论:METTL7B与肾母细胞瘤分期和不良预后相关。沉默METTL7B基因表达可抑制肾母细胞瘤细胞的增殖、侵袭和迁移,并促进其凋亡。

DNA甲基转移酶抑制剂地西他滨对SKM-1细胞P15^(INK4B)基因甲基化状态的影响

目的探讨DNA甲基转移酶抑制剂地西他滨(DAC)对骨髓增生异常综合征(MDS)转白血病细胞株SKM-1 P15INK4B基因甲基化状态的影响。方法对数生长期的SKM-1细胞设4组,每组1×106个细胞,其中3组为DAC处理组,分别以1.5、3.0和6.0μmol/L DAC处理SKM-1细胞48 h,另1组未加DAC的SKM-1细胞培养48 h作为对照组。甲基化特异性PCR(MSP)检测各组细胞P15INK4B基因甲基化情况,实时荧光RT-PCR相对定量法检测P15INK4B基因mRNA表达情况,羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)法检测细胞增殖抑制情况,碘化丙啶(PI)单染法检测细胞周期,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞早期凋亡情况。结果 1)对照组SKM-1细胞的P15INK4B基因完全甲基化,3个DAC处理组的甲基化条带逐渐变浅,非甲基化条带出现并逐步加深;2)P15INK4B基因mRNA表达水平:对照组与DAC为1.5、3.0、6.0μmol/L的3个处理组分别为1.00±0.12与0.91±0.13、0.51±0.06、0.43±0.04(P<0.05),3个DAC处理组之间差异甚微(P>0.05);3)CFSE平均荧光强度(MFI):对照组与DAC为1.5、3.0、6.0μmol/L的3个处理组分别为51.67±1.61与55.33±2.28、56.33±2.50、55.71±2.87,仅3.0μmol/L组较对照组变化较明显(P<0.05),而各DAC处理组之间变化差异很小(P>0.05);4)G1期细胞比例(%):对照组与DAC为1.5、3.0、6.0μmol/L的3个处理组分别为55.78±3.61与48.12±2.93、51.69±1.60、46.71±1.54,S期细胞比例(%):4个组分别为44.22±3.61与51.88±2.93、48.31±1.60、53.29±1.54,其中1.5、6.0μmol/L组较对照组变化较明显(P<0.05),而DAC各处理组中,6.0与3.0μmol/L组之间具明显差异(P<0.05);5)早期凋亡率(%):对照组与DAC为1.5、3.0、6.0μmol/L的3个处理组分别为2.91±0.26与7.77±0.22、12.45±0.28、13.86±0.27(P<0.05),DAC各处理组没有明显变化(P<0.05)。结论 DAC能逆转SKM-1细胞的P15INK4B基因完全甲基化状态,在一定程度上抑制SKM-1细胞的增殖,使细胞分化阻滞在S期,同时促进细胞凋亡,并随DAC浓度的增加而增强;尚未发现DAC逆转P15INK4B基因甲基化状态的同时使沉默的P15INK4B基因mRNA重新表达。

神经型烟碱乙酰胆碱受体α7亚单位基因和儿茶酚-O-甲基转移酶基因多态性与精神分裂症的关联研究

目的探讨CHRNA7、COMT基因多态性与精神分裂症的相关关系。方法采用聚合酶链反应及聚丙烯酰胺凝胶芯片技术,检测粤东地区精神分裂症患者(140例)与正常对照者(100例)CHRNA7基因3个单核苷酸多态性位点(rs2337980、rs1909884、rs883473)和COMT基因3个单核苷酸多态性位点(rs4680、rs737865、rs165599),并对分型结果进行测序鉴定。结果所有位点的单核苷多态性与精神分裂症发病风险无关联(均P>0.05)。结论在中国粤东地区CHRNA7基因3个位点(rs2337980、rs1909884、rs883473)和COMT基因3个位点(rs4680、rs737865、rs165599)的基因多态性可能与精神分裂症无关,但此结论尚需要进一步扩大样本量进行验证。

m6A甲基转移酶METTL3通过β‐arrestin 1/p65调控结肠癌细胞增殖

目的探讨m6A甲基转移酶METTL3通过β-arrestin 1/p65在结肠癌细胞中的作用机制。方法使用结肠癌细胞系HCT116,应用荧光定量PCR、Western blot测定结肠癌细胞中METTL3、β-arrestin 1及增值蛋白PCNA、Cyclin D1及Cyclin E的表达水平;利用细胞转染及细胞克隆实验,观察METTL3、β-arres-tin1和p65在结肠癌细胞增殖中的作用。结果METTL3和β-arrestin 1在结肠癌细胞中表达升高(以actin作为内参基因,与正常对照组比较,P<0.05)。结肠癌细胞转染METTL3-shRNA后,转染组灰度(0.36±0.046)较对照组(1.27±0.14)明显减少(P=0.0004);与对照组克隆数(465±42)比较,转染组细胞增殖(85±37)明显减少(P<0.05);细胞增殖蛋白PCNA、Cyclin D1及Cyclin E的表达也明显减少(分别为P<0.01、0.05、0.01);结肠癌细胞中METTL3、β-arrestin 1和p-p65蛋白表达均增高(均为P<0.05)。随后HCT116细胞沉默MET-TL3的表达,发现细胞中β-arrestin 1、p-p65蛋白的表达明显下降(均为P<0.05)。结论METTL3影响结肠癌细胞的增殖可能通过β-arrestin 1/p65调控参与肿瘤的发生发展。

DNA甲基转移酶3b在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的:分析结直肠癌组织与癌旁正常组织中DNA甲基转移酶3b(DNMT3b)基因的表达情况。方法:选取我院2015年20例结直肠癌患者的癌组织及癌旁正常组织,利用实时荧光定量PCR(RT-PCR),分别检测组织中DNMT3b mRNA的表达量,同时分析其表达水平与年龄、性别及肿瘤TNM分期的联系。结果:结直肠癌组织DNMT3b mRNA的表达含量(2.912±1.174)高于癌旁正常组织(0.658±0.123)(P<0.05)。男性患者组织中DNMT3b的相对表达量(3.447±0.423)高于女性患者(3.082±0.301)(P<0.05)。结论:结直肠癌组织高表达DNMT3b基因,可能是肿瘤的发生和发展原因之一。

DNA甲基转移酶3b催化区保守序列shRNA真核表达载体构建

目的构建针对基因DNA甲基转移酶3bmRNA催化区保守序列的shRNA真核表达载体,并对其克隆进行鉴定。方法以DNMT3bmRNA序列为靶基因设计3条shRNA和一条阴性对照HK,应用基因重组技术将其克隆到真核表达载体PGensil-1中,构建真核表达载体P-DNMT3b-shRNA1、P-DNMT3b-shRNA2、P-DNMT3b-shRNA3、P-HK。将重组质粒转化到大肠杆菌DH5α中,接种于LB平板后分别挑取5个单克隆菌落进行扩增,经筛选后对提取质粒进行测序鉴定。结果重组质粒经SalⅠ酶切鉴定得到大小2个基因片段,大片段约为4.55kb,小片段约为440bp,与设计相同;四组重组质粒经测序鉴定显示插入完全正确。结论成功构建了P-DNMT3b-shRNA(1、2、3)及HK真核表达载体,为下一步实验奠定了基础。

m6A甲基转移酶METTL3通过AFF4/NF-κB/MYC信号网络影响膀胱癌的研究进展

膀胱癌(BCa)是泌尿外科最常见的恶性肿瘤之一,发病机制目前尚未明确。甲基转移酶3(METTL3)是N6-甲基腺苷甲基转移酶复合物(m6A MTC)的核心部分,介导mRNA的甲基化修饰,影响mRNA的稳定性和翻译过程。研究表明METTL3可以通过AFF4/NF-κB/MYC信号网络对BCa细胞分裂增殖起到促进作用。该信号网络涉及多种信号分子,METTL3可分别影响AFF4、NF-κB和MYC的表达水平影响其下游通路,促进肿瘤发展。

DNA甲基化转移酶3B在脑胶质母细胞瘤中的差异表达

目的脑胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)中存在广泛的基因组低甲基化,本研究检查了DNA甲基化转移酶3B(DNA methyltransferase 3B,DMNT3B)是否在这种肿瘤中的表达和突变情况,以期寻找肿瘤基因组低甲基化发生的原因。方法用RNA抽提试剂盒从25例人脑胶质母细胞瘤组织中提取总RNA,用反转录聚合酶链反应方法扩增DNMT3B的cDNA,然后测序,所得序列经DNASTAR软件与NCBI发表的正常序列进行比对。结果从25例脑胶质母细胞瘤样本中的成功扩增了全长DNMT3B cDNA,测序分析结果显示DNMT3B基因在该肿瘤样本中差异性存在多种剪接变异体,以DNMT3B-V1、DNMT3B-V3、DNMT3B-V7为主。没有发现改变氨基酸序列的点突变。结论 DNMT3B基因在脑胶质母细胞瘤中没有点突变,但存在多种剪接变异体(以DNMT3B-V3、DNMT3B-V7为主),其是否为脑胶质母细胞瘤的广泛基因组低甲基化的原因尚有待进一步研究。

甲基转移酶样蛋白3与肿瘤关系的研究进展

目前已经发现上百种转录后RNA的修饰方式,其中N6-甲基腺嘌呤(m6A)是真核mRNA最为常见的一种修饰方式。研究表明,m6A一种动态可逆的RNA甲基化修饰方式,由甲基转移酶复合体(METTL3、METTL14、WTAP)、去甲基转移酶(FTO、ALKBH5)、结合蛋白(YTHDF1、YTHDF2、YTHDF3、YTHDC1、YTHDC2)等协同调控。甲基转移酶样蛋白3(METTL3)具备独立或与其他甲基转移酶共同催化RNA的m6A修饰形成的能力,是影响m6A修饰水平至关重要的酶。近年研究表明,METTL3依靠催化m6A修饰途径或者直接与翻译起始因子作用影响肿瘤基因的翻译水平,进而调控肿瘤相关蛋白的表达,影响肿瘤细胞的增殖、侵袭、分化等生物学行为,在不同肿瘤中发挥促癌或抑癌的双重作用。此外,METTL3也是肿瘤治疗的一个有效分子靶点。

骨髓增生异常综合征与白血病细胞p15INK4B基因甲基化及机制研究

目的探讨p15INK4B基因甲基化异常和血液系统肿瘤发病的关系及甲基化异常的机制。方法采用RT-PCR、甲基化特异PCR、Westernblot法检测20例骨髓增生异常综合征(MDS)、20例急性白血病患者(AL)、14例慢性粒细胞性白血病(CML)患者骨髓单个核细胞p15INK4B基因mRNA和p15INK4B蛋白的表达、p15INK4B基因甲基化及甲基转移酶(DNMTs)的表达。结果高危组MDS患者p15INK4B蛋白表达阳性率低于低危组MDS患者(10%vs80%,P<001),p15INK4B基因甲基化阳性率较高(60%vs10%,P<001)。20例AL有9例(45%)存在p15INK4B基因甲基化。10例CML慢性期(CML-CP)患者仅1例存在p15INK4B基因甲基化。4例CML急变期(CML-BP)患者均检测到p15INK4B基因部分甲基化。DNMT3A、DNMT3B表达在AL、高危组MDS和CML-BP患者均明显高于低危组MDS(P<005)。结论p15INK4B基因甲基化在AL、高危组MDS和CML-BP患者发生率高于低危组MDS,伴有甲基转移酶DNMT3A、DNMT3B表达较高。p15INK4B基因甲基化可能参与MDS和AL的发病机制并与MDS及CML的预后有关。

UGT2B7基因多态性与药物代谢关系的研究进展

尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGT)是药物Ⅱ相代谢中至关重要的酶,而尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶2B7(UGT2B7)基因多态性对UGT的活性起着重要的作用。不同的UGT2B7基因型与患者体内的血药浓度有关,根据基因型的不同可分为强代谢组及弱代谢组。该文主要阐述UGT2B7基因多态性与药物代谢的关系,着重叙述UGT2B7基因多态性与血药浓度的相关性。

甲基转移酶样7B在中国人群脑胶质瘤中的表达及预后分析

目的探讨甲基转移酶样7B基因(METTL7B)在中国脑胶质瘤患者中的表达特征及其对预后的影响。方法回顾性分析中国脑胶质瘤基因组图谱计划(CGGA)mRNA seq325数据库中表达METTL7B的288例脑胶质瘤患者的测序结果和临床资料,并对肿瘤标本进行免疫组织化学染色。采用Kaplan-Meier生存曲线分析METTL7B的表达水平对不同级别脑胶质瘤患者生存期的影响;采用单因素、多因素Cox回归分析明确影响患者生存期的相关因素。通过Pearson相关性分析筛选METTL7B共表达的基因,应用R软件中的基因富集工具分析基因的生物学功能。结果288例患者中,世界卫生组织(WHO)Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤患者的METTL7B表达量[中位数(四分位数间距)]分别为[1.05(1.93)]、[3.07(3.17)]和[4.71(2.57)];在异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)野生型和突变型的胶质瘤中,METTL7B的表达量分别为[4.99(3.40)]和[1.53(2.77)];在无1p/19q共缺失和1p/19q共缺失的胶质瘤中,METTL7B的表达量分别为[3.85(3.39)]和[0.98(1.79)],上述指标比较差异均有统计学意义(均P<0.01)。免疫组织化学染色证实高级别胶质瘤中METTL7B的染色阳性显著高于低级别胶质瘤。METTL7B高表达组和低表达组患者(各144例)的中位生存期分别为20.0个月(1.0~136.0个月)和80.0个月(2.0~149.0个月),差异有统计学意义(P<0.01)。在WHOⅡ~Ⅳ级胶质瘤患者中,METTL7B的高表达量显著降低了患者的生存时间(均P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,METTL7B表达量是影响胶质瘤患者生存期的独立影响因素(HR=1.684,95%CI:1.158~2.449,P<0.01)。在CGGA数据库中,与METTL7B表达呈正相关的基因有252个(r>0.45,P<0.05),其生物学功能主要为细胞黏附、碳水化合物代谢和蛋白折叠等,主要参与了内质网中蛋白质加工、局部黏附及癌症中的蛋白聚糖等。结论在脑胶质瘤组织中,随着肿瘤级别的升高,METTL7B的表达量也显著升高,并可作为高级别胶质瘤预后的预测因子,其机制值得进一步探索。

人DNMT3B7原核表达载体的构建和表达

目的:构建人类DNA甲基转移酶(DNMT)3B7原核表达载体,并进行初步表达。方法:根据Genebank中人DNMT3B7 cDNA序列设计并合成特异性引物;提取HCT116细胞总RNA并进行反转录,利用PCR技术扩增出DNMT3B7;将扩增产物克隆到原核表达载体PGEX-4T.3中,并对重组质粒进行鉴定;然后将重组质粒转化E.coli BL21,IPTG诱导表达目的蛋白。结果:PCR扩增得到人DNMT3B7的cDNA片段大小为1.1 kb,重组子利用限制性内切酶进行酶切、PCR鉴定和DNA序列分析得到原核表达载体PGEX-4T.3-DNMT3B7;IPTG诱导表达后,SDS-PAGE分析显示目的蛋白在E.coli BL21中高效表达,分子量约为40 kD。结论:成功构建了人DNMT3B7原核表达载体,完成了其在E.coli BL21中的诱导表达,为进一步在体外研究DNMT3B异构体提供了条件。

DNMT3B mRNA3′非编码区报告基因载体的构建与功能验证

目的构建用于鉴定microRNA(miRNA)靶基因的报告基因系统并进行功能验证,为研究动脉粥样硬化的发生发展机制奠定良好基础。方法在pGL3-control载体的荧光素酶基因下游克隆位点插入DNA甲基转移酶3B(DNMT3B)3′非编码区序列,经酶切、测序验证是否插入及正确性。生物信息学分析DNMT3B与miRNA-125b的靶向关系,并用miRNA-125b过表达载体与所构建载体共转染人血管平滑肌细胞,双荧光素酶报告基因系统检测荧光素酶活性。结果成功构建了DNMT3B3′非编码区报告基因载体,经酶切和测序鉴定正确;共转染细胞24h后,双荧光素酶报告基因系统检测荧光素酶活性,结果显示与空载体对照组相比,构建载体组荧光素酶活性下降了54.8%(P<0.01)。结论成功构建了DNMT3BmRNA 3′非编码区报告基因载体,且提示miRNA-125b靶向调控了DNMT3B。

反义DNMT3b基因真核表达载体转染对人胆管癌细胞DNMT3b基因表达的影响

目的观察反义DNA甲基转移酶3b(DNMT3b)基因真核表达载体转染对人胆管癌QBC939细胞中DNMT3b基因表达的影响。方法构建反义DNMT3b基因真核表达载体,通过脂质体转染到人胆管癌细胞株QBC939中,G418筛选得到稳定转染细胞株,PCR鉴定外源性neoR基因在转染细胞中的表达以确定转染是否成功。半定量RTPCR观察转染前后DNMT3b基因mRNA水平的变化,流式细胞术检测转染前后DNMT3b蛋白的变化。结果反义DNMT3b基因真核表达载体转染能使人胆管癌QBC939细胞中DNMT3b基因的mRNA水平从0.956±0.053降低至0.209±0.023,差异有统计学意义(P<0.01);流式细胞术检测结果显示,DNMT3b蛋白水平从(75.38±3.22)%降低到(29.87±3.46)%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论反义DNMT3b基因转染能降低人胆管癌QBC939细胞中DNMT3b基因的表达水平,为研究DNMT3b基因功能及其在胆管癌细胞中的作用提供了方法和实验依据。

人DNMT 3B7真核表达载体的构建和鉴定

目的构建人DNMT3B7真核表达载体pCMV-DNMT3B7。方法据Genebank中人DNMT3B7cDNA序列设计并合成特异性引物,以人DNMT3B1为模板,利用PCR技术扩增出DNMT3B7,并将扩增产物克隆到真核表达载体pCMV-2B中。结果 PCR扩增得到人DNMT3B7的cDNA片段大小为1.1kb,重组子利用限制性内切酶进行酶切、PCR鉴定和DNA序列分析得到真核表达载体pCMV-DNMT3B7。结论成功构建了人DNMT3B7真核表达载体,为进一步研究DNMT3B异构体提供了条件。

B7-H4在胰腺癌中的表达及其临床意义

目的:制备小鼠抗B7-H4单克隆抗体后研究B7-H4在胰腺癌中的表达情况及临床意义。方法:以稳定表达B7-H4胞外段的3T3-B7-H4细胞为免疫原,免疫Babl/C小鼠;应用常规杂交瘤技术将免疫的小鼠脾细胞与Sp2/0小鼠骨髓瘤细胞融合,使用间接ELISA方法筛选分泌抗B7-H4单克隆抗体的杂交瘤细胞株。对所获得的单克隆抗体进行亚型鉴定,使用Western blot、免疫沉淀和免疫组化等方法对单克隆抗体特异性进行鉴定;应用免疫组织化学染色检测B7-H4分子在胰腺癌中的表达情况,并评价其与临床病理特征的关系。结果:获得1株亚型为IgM、轻链为κ型的单克隆抗体,经鉴定该单克隆抗体能与B7-H4发生反应。免疫组化显示:胰腺癌组织中B7-H4在胞浆和(或)胞膜弥漫表达,表达量显著高于正常胰腺组织(P<0.05)。B7-H4在临床肿瘤分级较高患者的胰腺癌组织及有淋巴结转移患者的胰腺癌组织中表达显著增强。结论:成功获得了特异性抗B7-H4的单克隆抗体,B7-H4在胰腺癌组织中表达上调,并与患者肿瘤分级和淋巴结转移密切相关。

基于生物信息学分析METTL7B在胶质瘤组织中的表达及其临床意义

目的:探讨甲基转移酶样蛋白7B(METTL7B)在胶质瘤组织中的表达及其与患者临床病理特征和预后的相关性。方法:基于CGGA数据库胶质瘤数据和GTEx数据库正常脑组织数据,分析METTL7B基因在胶质瘤与正常脑组织中的表达差异,并用GEPIA数据库数据和免疫组织化学染色法进行验证。用Kaplan-Meier生存分析、单因素Cox分析、多因素Cox分析及ROC曲线分析等评估METTL7B在胶质瘤患者预后中的价值,用CGGA数据库数据分析METTL7B表达与胶质瘤患者临床病理特征的相关性,用CIBERSORT及TIMER数据库进行肿瘤免疫细胞浸润分析,进行KEGG通路富集分析及GO功能富集分析,通过基因共表达分析确定与METTL7B相关的基因。结果:METTL7B在胶质瘤组织中明显上调(均P<0.05),METTL7B表达是胶质瘤患者独立的不良预后因素。METTL7B高表达与高龄(>41岁)、肿瘤分级增加、肿瘤复发或继发性肿瘤、IDH野生型、1p19q非共缺失以及肿瘤的恶性病理学有关联(均P<0.01);METTL7B表达与B细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、单核细胞、中性粒细胞、巨噬细胞、活化肥大细胞等免疫细胞有关联(均P<0.05)。KEGG通路富集及GO功能分析结果显示,肿瘤相关信号通路及多种免疫反应在METTL7B高表达表型中显著富集。基因共表达分析结果表明,METTL7B与TNFRSF12A、CHI3L1、EMP3表达呈正相关(r=0.807、0.804、0.783,均P<0.01),与ELFN2、REPS2、SHANK2表达呈负相关(r=-0.642、-0.627、-0.602,均P<0.01)。结论:METTL7B在胶质瘤组织中的表达上调是预后不良的指标,且与肿瘤免疫浸润相关。

膀胱癌DNA甲基转移酶1、3a、3b基因的表达

目的 探讨DNA甲基转移酶(DNMT)1、3a、3b mRNA在膀胱癌组织中的表达及其意义。方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测 DNMT1、3a、3b mRNA在40例人膀胱癌组织及31例人正常膀胱粘膜组织中的表达。结果 膀胱癌组织中DNMT1、3b表达的阳性率、表达值均高于正常对照组(P<0.05);DNMT3a的表达与对照组相比,差异无显著性(P>0.05);3种基因的表达率与表达值在不同肿瘤分级、分期、生长方式及原发肿瘤与复发肿瘤之间差异无显著性(P>0.05);DNMT1与DNMT3b表达值明显相关(P<0.01)。结论 DNMT1、3b表达升高是膀胱癌形成、发展中的早期、普通事件,可作为早期诊断和复发监测的有效指标,DNMT1与DNMT3b的表达可能存在共同调节机制。